要了解為什么傳統 PCR 存在限制，務必要了解 PCR 反應過程中發生了什么。基本 PCR 運行可以分為三個階段：

指數期

       每個循環積聚的產物準確加倍（假定 ** 反應效率）。該反應具有高度特異性和精確度。出現指數式擴增，因為所有試劑均新鮮可用，反應的動力學推動反應有利于擴增子加倍。

線性期（高變異性）

       隨著反應繼續，一些試劑因擴增而被消耗。反應開始減緩，并且每個循環的 PCR 產物不再加倍。

平臺期（終點：使用傳統方法進行凝膠檢測）

       反應停止，不再產生更多產物，并且如果放置時間夠長，PCR 產物將開始降解。因為每個樣品具有不同的反應動力學，所以每支試管或每個反應將在不同的時間點進入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內，傳統 PCR 進行測量，又稱為終點檢測。 MiniDrop?研發團隊由微流控、光學、機電學、化學、臨床醫學、分子生物學等多學科交叉領域的**組成。寧波永諾數字PCR正規代理

       MiniDrop數字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數據分析軟件組成，該系統的**為微流控微滴生成技術，采用原創性的油液，在40um微管道中利用氣壓驅動在2分鐘內生成50萬微滴，單次運行生成400萬微滴，微滴體積達皮升級，檢測線性范圍達到5個數量級，各項指標均超越國內外的主流產品。

       MiniDrop創新性采用高壓驅動的方法將樣本分割成50萬份，打破了國外廠商在微滴式數字PCR領域的壟斷。 廣州流式數字PCR解決方案適用復雜樣品的檢測。

       數字PCR檢測及分析原理在上世紀90年代就被提出來了，但是無奈受限于當時的技術條件，樣本稀釋及分配都是靠手工來完成的，受到很多因素的干擾和限制；并且結果分析對于研究者來說也十分枯燥與繁瑣，因此在很長一段時間dPCR發展停滯不前。后來由于微流控技術與微納集成制造工藝的發展解決了dPCR過程中的幾個關鍵技術問題，推動了dPCR的研究與商業化的發展。

       目前根據dPCR樣本稀釋分配的方式，基本可分為三大類，一種是基于大規模集成微流控芯片；第二種是使用微反應室/孔板；第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式，其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或者微滴當中，每個反應器的核酸模板數少于1或者等于1。經過PCR擴增之后，有一個核酸分子的模板的反應器就會給出熒光信號，沒有模板的反應器沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積，可以推算出原始溶液的核酸濃度。

定量PCR和數字PCR的特點：

       5. 目前定量PCR已經能實現高通量樣品條件下的自動化操作。   

       6. 數字PCR在單分子層面上的***定量，可以徹底擺脫對標準曲線的依賴而直接給出靶序列的拷貝數，提高了實驗結果在批內和批間的穩定性，甚至能用來對標準品進行定標。   

       7. 基于***定量的方式，數字PCR結果的高重復性和高精度可實現微小差異的基因表達分析，如等位基因的不平衡表達、單細胞基因表達分析、microRNA表達分析等等。所謂“微小差異”的標準一般而言是指表達水平的差異在2倍以內。   

       8. 同等條件下，數字PCR在靈敏度方面擁有優勢，使得該技術已成為**的液態活檢、病原微生物檢測、轉基因成分測定、宿主殘留DNA分析等的熱門技術。

定量PCR和數字PCR的特點：

1. 在20多年的使用和發展中，定量PCR作為一種技術平臺，已經產出海量的數據，在工業界和分子檢測的某些應用上，定量PCR已經成為“金標準”。基礎研究方面，則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標準實驗指南”。   

2. 在定量PCR的各種應用中，基因表達分析(gene expression analysis)的應用比重約占七成，綜合各種因素來看，眼下定量PCR還是進行基因表達研究的理想手段。   

3. 上述的“各種因素”具體展開，主要包括：通量、自動化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考文獻與protocol的數目等等。   

4. 就目前市場上已有的數字PCR設備來看，定量PCR在檢測的線性范圍上具有優勢，意味著同一個run內可對各種表達豐度的樣品進行分析。

關于甲基化含量的鑒定。寧波永諾數字PCR正規代理

       數字PCR（Digtal PCR）是一種核酸定量精密檢測的新興技術手段，于20世紀由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應單元中，使每個反應單元中有一個或沒有核酸。利用PCR擴增的同時，加入可檢測熒光。待擴增結束時，使用統計學方法采集每個反應單元出現的熒光次數，從而定量檢測樣本中的核酸濃度。

       基于分液方式的不同，數字PCR主要分為3種：微流體數字PCR(Microfluidic digital PCR，mdPCR)、微滴數字PCR(Droplet digital PCR，ddPCR)和芯片數字PCR(Chip digital PCR，cdPCR)。

寧波永諾數字PCR正規代理

浚和（上海）儀器有限公司是一家供應國內外先進儀器和設備的專業供應商和服務商，致力于為客戶提供專業的定制化解決方案。多年來，持續為醫藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業提供先進的產品和專業的服務。

浚和在不斷引進國內外先進儀器設備的同時，結合行業和市場需求，加強和客戶之間的溝通，并與國際上多家**儀器設備制造商保持著長期穩定的合作關系，不定期地與合作商進行技術交流，努力加強自身技術力量。公司配備了數名有著多年行業經驗的技術人員，依靠雄厚的技術實力、科學合理的配置方案、專業的安裝調試和周到的售后服務，得到了廣大用戶的支持與信賴。

公司主要經營產品包括：等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數字PCR、高壓滅菌鍋、培養箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等，目前主要合作品牌有：日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時，公司還提供專業的技術服務，如設備的維護、驗證等。

浚和儀器將始終以行業特點為立足點，以客戶需求為導向，不斷地提高自身專業技術能力，不停地完善客戶服務質量，在發展中保持創新的精神，力求與客戶共同進步，為行業的發展作出不懈的努力。