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來源: 發布時間:2022-04-25

定量PCR和數字PCR的特點:


1. 在20多年的使用和發展中,定量PCR作為一種技術平臺,已經產出海量的數據,在工業界和分子檢測的某些應用上,定量PCR已經成為“金標準”。基礎研究方面,則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標準實驗指南”。   

2. 在定量PCR的各種應用中,基因表達分析(gene expression analysis)的應用比重約占七成,綜合各種因素來看,眼下定量PCR還是進行基因表達研究的理想手段。   

3. 上述的“各種因素”具體展開,主要包括:通量、自動化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考文獻與protocol的數目等等。   

4. 就目前市場上已有的數字PCR設備來看,定量PCR在檢測的線性范圍上具有優勢,意味著同一個run內可對各種表達豐度的樣品進行分析。



數字PCR技術是公認的液體活檢領域靈敏度比較好的檢測方法。南京JUE對定量數字PCR銷售電話

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       數字PCR是一種核酸分子***值定量技術,能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的***值定量。該試劑盒采用創新的一步法逆轉錄數字PCR技術,將*****的RNA逆轉錄及數字PCR擴增整合到一個反應體系,單管雙檢同時測定*****的兩個**基因,消除***變異帶來的漏檢風險。

       MicroDrop-100全新微滴式數字PCR系統為永諾生物旗下子公司永諾醫療自主研發的檢測設備,此系統檢測無需依賴標準物質,可達到***定量,具有超高靈敏度,檢測靈敏度高達1個拷貝,且具有較好的重復性,降低同樣本不同批次的檢測差異。數字PCR結果采取終點判讀法,相比熒光定量PCR的過程性讀取可有效降低對PCR 擴增效率的依賴、降低PCR***物對檢測結果的影響,對于復雜樣本也能提供穩定的檢測結果等特點,在******臨床實驗及***患者的治療過程中可發揮重要作用。 杭州MicroDrop-100數字PCR現貨高靈敏度——數字PCR的靈敏度與同體積反應體系的分割份數成正比。

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與常規PCR方法相比,數字PCR有如下優勢:

       1、能夠完全定量:常規PCR定量需要制定已知拷貝數的標準DNA曲線,但是由于待檢樣本與標準曲線不在統一體系,條件上會存在差異,另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結果的準確性。而數字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響,可進行完全定量。

       2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本

       3、靈敏度高:數字PCR是將傳統PCR反應體系分割成數萬個**PCR反應,這些反應可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質雙鏈的形成。

       4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個**反應體系中,明顯降低了背景信號和yì zhì物對反應的干擾,擴增基質效應大大減小。

       MiniDrop數字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數據分析軟件組成,該系統的**為微流控微滴生成技術,采用原創性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅動在2分鐘內生成50萬微滴,單次運行生成400萬微滴,微滴體積達皮升級,檢測線性范圍達到5個數量級,各項指標均超越國內外的主流產品。

       MiniDrop創新性采用高壓驅動的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數字PCR領域的壟斷。 適用復雜樣品的檢測。

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       CNV(Copy Number Variations,拷貝數變異)研究需要極高的定量精度以區別不同拷貝數之間的微小差異,測序方法適用于高于30%的變異率檢測,而qPCR的比較**辨在1.5倍左右,數字PCR通過直接計數目標基因與參照基因( 拷貝數為1的基因,例如RNaseP) 的數目,計算比值,直接得到目標基因的拷貝數可以達到極高的拷貝數分辨精度。


       除此之外,dPCR在病原微生物檢測、microRNA研究、基因表達研究、NGS測序文庫的***定量、表觀遺傳學直接相關的DNA甲基化定量檢測、ChIP定量鑒定等領域的應用都令人極為期待,而在轉基因成分鑒定、分子標準品精確定量、環境樣本檢測等具體的應用方向上,已經有大量實驗數據和結果證明了dPCR技術的優良性能。


線性范圍達到6個數量級,靈敏度高達萬分之一。南京JUE對定量數字PCR銷售電話

您了解數字PCR儀的優勢嗎?南京JUE對定量數字PCR銷售電話

dPCR的基本原理

       目前dPCR主要有兩種形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中,每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PCR循環之后,有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。可以使用幾種不同的方法來分配樣品,包括微孔板,毛細管,油乳劑和帶有核酸結合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設分子種群遵循泊松分布來估計不同分子的數量,根據泊松分布的原理,反應體系中目標分子的拷貝數可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計算,從而解決了多個目標分子存在于單個液滴中的可能性。 南京JUE對定量數字PCR銷售電話

浚和(上海)儀器有限公司是一家供應國內外先進儀器和設備的專業供應商和服務商,致力于為客戶提供專業的定制化解決方案。多年來,持續為醫藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業提供先進的產品和專業的服務。

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公司主要經營產品包括:等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數字PCR、高壓滅菌鍋、培養箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等,目前主要合作品牌有:日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時,公司還提供專業的技術服務,如設備的維護、驗證等。

浚和儀器將始終以行業特點為立足點,以客戶需求為導向,不斷地提高自身專業技術能力,不停地完善客戶服務質量,在發展中保持創新的精神,力求與客戶共同進步,為行業的發展作出不懈的努力。

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