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來源: 發(fā)布時間:2024-08-19

dPCR的基本原理目前dPCR主要有兩種形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中,每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PCR循環(huán)之后,有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。可以使用幾種不同的方法來分配樣品,包括微孔板,毛細管,油乳劑和帶有核酸結合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設分子種群遵循泊松分布來估計不同分子的數量,根據泊松分布的原理,反應體系中目標分子的拷貝數可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計算,從而解決了多個目標分子存在于單個液滴中的可能性??:?上海)儀器科技有限公司為您提供數字PCR ,有想法可以來我司咨詢!甘肅實驗室數字PCR供應商

數字PCR

MicroDrop-100數字PCR系統(tǒng)具有如下優(yōu)點:1、JUE對定量,結果判讀不需要依賴標準曲線;2、突破局限,檢測靈敏度可低至萬分之一;3、專利設計的具有高精度復雜三維微納防污染結構的微流控芯片,單張可同時處理1-8個樣本;4、一鍵式自動操作,20uLPCR體系可生成100,000微滴,8個樣本單次微滴生成 需2分鐘;5、FAM、HEX(VIC)雙熒光通道,半導體激光器做為激發(fā)光 源相比LED光源,穩(wěn)定性高,功率穩(wěn)定不影響檢測靈敏度,單色性能優(yōu)異降低對檢測特異性的影響,且方向性好;6、檢測器為2個光電倍增管,靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CCD,普通的硅光子計數器,增益為10^5,光電倍增管增益可以達到10^9;7、 知識產權的軟件系統(tǒng)可直接計算拷貝數、拷貝數濃度,CNV值,突變豐度;閾值線可自動或手動完成,每個樣本可單獨設定閾值線;輸出數據圖標、直方圖、一維圖、二維圖、濃度圖、95%置信度不確定性區(qū)間等;軟件可自動識別復雜微滴分簇四簇;軟件具備數據質控功能,支持陽性微滴數、陰性微滴數、總微滴數統(tǒng)計及這些指標的任意組合;單個樣本100,000微滴的反應體系以及高靈敏度的檢測系統(tǒng),配以獨特的軟件系統(tǒng),可以實現(xiàn)高達20重的PCR分析;8、單次檢測通量96個樣本,操作靈活;天津易裝拆數字PCR電話浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數字PCR ,期待您的光臨!

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二代測序輔助建庫目前靶向測序建庫方法包括擴增子方法,在均相溶液中,當擴增引物增加時,由于擴增引物之間的相互作用,從而影響擴增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴增,將可降低引物間相互作用,提高擴增效率。同時還可以實現(xiàn)對于少量模板的有效擴增,得到更多的有效測序數據。CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證CRISPR-Cas9技術的發(fā)明,是基因編輯技術的一大突破,但如何驗證實驗是否成功,仍需要高靈敏度的檢測方法,數字PCR技術可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發(fā)明了以CRISPR為基礎的SHERLOCK技術可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測,但精確定量評估時仍采取了數字PCR進行確認。

MicroDrop-100微滴式數字PCR是具有國內自主知識產權的第三代JUE對定量PCR系統(tǒng),整套系統(tǒng)由MicroDrop-100A微滴生成儀、MicroDrop-100B微滴檢測儀以及結果數據分析設備等構成。系統(tǒng)通過自主設計的微流控芯片,利用油水相不兼容的原理,在2分鐘時間內將PCR體系分割成100,000油包水的體系,每個體系為的PCR反應體系,體積約為0.2nL,單次實驗一次可生成8個樣本的油包水體系 。由于油包水體系的分割效應,使得數字PCR受PCRYi制物的影響相對較小,有利于復雜環(huán)境樣本的實驗操作。區(qū)別于熒光定量PCR的過程性判讀方法,數字PCR結果判讀為終點法,故其對PCR擴增效率的依賴也相對較小??:?上海)儀器科技有限公司是一家專業(yè)提供數字PCR 的公司,歡迎您的來電哦!

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研究方向甲基化含量鑒定作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析,現(xiàn)階段有不同的方法或技術來進行研究:如傳統(tǒng)的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序統(tǒng)計法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等。這些方法皆因方法學的問題而不能獲得精確的定量,而微滴式數字PCR系統(tǒng)通過對樣品的微滴化處理及目標因子的***拷貝數定量,為甲基化程度的精確定量檢測提供了一種全新 的技術。*****的伴隨診斷常用體液來源(如血液,胸腹水,唾液及尿液等)的待檢標本中的DNA,有正常脫落體細胞和病變脫落細胞兩種來源,前者的量遠大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細胞DNA的干擾,實現(xiàn)**標記物的有效檢測,如EGFR,ALK,ROS1,KRAS、BRAF等基因的突變檢測、乳腺*/胃*的HER2基因擴增檢測等,應用于**精細醫(yī)學的伴隨診斷??:?上海)儀器科技有限公司為您提供數字PCR ,期待您的光臨!甘肅實驗室數字PCR供應商

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數字PCR(dPCR)是近年來引起重視并迅速發(fā)展起來的一種突破性的核酸定量分析技術。該技術先將核酸模板進行稀釋,分配到大量 的反應單元中,使每個反應單元中只有單個模板分子,然后進行PCR擴增反應,擴增結束后對每個反應室的熒光信號進行統(tǒng)計學分析,來定量DNA拷貝數。數字PCR采用先擴增后定量,因此不依賴擴增曲線的循環(huán)閾值(Ct),也無需采用內參基因和標準曲線,準確度高、重現(xiàn)性好,可以實現(xiàn)***定量分析。由于其獨特的技術優(yōu)勢,已經在臨床診斷、轉基因成分定量、單細胞基因表達分析、環(huán)境微生物檢測和下一代測序等研究領域顯示出巨大的優(yōu)勢和應用前景。甘肅實驗室數字PCR供應商

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