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數(shù)字PCR(dPCR)是近年來引起重視并迅速發(fā)展起來的一種突破性的核酸定量分析技術(shù)。該技術(shù)先將核酸模板進行稀釋,分配到大量 的反應(yīng)單元中,使每個反應(yīng)單元中只有單個模板分子,然后進行PCR擴增反應(yīng),擴增結(jié)束后對每個反應(yīng)室的熒光信號進行統(tǒng)計學分析,來定量DNA拷貝數(shù)。數(shù)字PCR采用先擴增后定量,因此不依賴擴增曲線的循環(huán)閾值(Ct),也無需采用內(nèi)參基因和標準曲線,準確度高、重現(xiàn)性好,可以實現(xiàn)***定量分析。由于其獨特的技術(shù)優(yōu)勢,已經(jīng)在臨床診斷、轉(zhuǎn)基因成分定量、單細胞基因表達分析、環(huán)境微生物檢測和下一代測序等研究領(lǐng)域顯示出巨大的優(yōu)勢和應(yīng)用前景。浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ，有想法可...

與常規(guī)PCR方法相比，數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢：1、能夠完全定量：常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標準DNA曲線，但是由于待檢樣本與標準曲線不在統(tǒng)一體系，條件上會存在差異，另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準確性。而數(shù)字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響，可進行完全定量。2、樣本需求量低：適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本3、靈敏度高：數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個 PCR反應(yīng)，這些反應(yīng)可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性：由于目的序列被分配到多個 反應(yīng)體系中，明顯降低了背景信號和yìzhì物對反應(yīng)的干...

數(shù)字PCR（DigtalPCR）是一種核酸定量精密檢測的新興技術(shù)手段，源于于20世紀由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應(yīng)單元中，使每個反應(yīng)單元中有一個或沒有核酸。利用PCR擴增的同時，加入可檢測熒光。待擴增結(jié)束時，使用統(tǒng)計學方法采集每個反應(yīng)單元出現(xiàn)的熒光次數(shù)，從而定量檢測樣本中的核酸濃度。基于分液方式的不同，數(shù)字PCR主要分為3種：微流體數(shù)字PCR、微滴數(shù)字PCR和芯片數(shù)字PCR，數(shù)字PCR儀器目前是市場測試校準高的。浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ，有想法的可以來電咨詢！青海立式數(shù)字PCR商家數(shù)字PCR相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而...

MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數(shù)據(jù)分析軟件組成，該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù)，采用原創(chuàng)性的油液，在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴，單次運行生成400萬微滴，微滴體積達皮升級，檢測線性范圍達到5個數(shù)量級，各項指標均超越國內(nèi)外的主流產(chǎn)品。MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動的方法將樣本分割成50萬份，打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。-----數(shù)字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，用戶的信賴之選，歡迎您的來電！廣東精密數(shù)字PCR供應(yīng)商數(shù)字PCR相對于...

在定量PCR時，我們常常糾結(jié)一個問題，究竟是相對定量還是***定量呢？如今，你無需糾結(jié)了，因為數(shù)字PCR（digitalPCR）來了。盡管這兩種技術(shù)有些類似，都是估計起始樣品中的核酸量，但它們有一個重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量，而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù)，是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域：拷貝數(shù)變異、突變檢測、基因相對表達研究（如等位基因不平衡表達）、二代測序結(jié)果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。數(shù)字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，讓您滿意，歡迎您的來電哦！重慶便攜式數(shù)字PCR咨...

目前數(shù)字PCR技術(shù)在臨床領(lǐng)域已經(jīng)有著非常***且***地應(yīng)用，例如在病原微生物檢測中的應(yīng)用：HBV檢測、HIV檢測、甲型流感病毒檢測等；在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用：13/18/21號染色體三倍體檢測、遺傳性耳聾檢測、地中海貧血檢測及優(yōu)生五項的病毒檢測等；在**靶向***相關(guān)基因檢測中的應(yīng)用：肺*EGFR基因突變、ALK基因融合檢測、結(jié)直腸*KRAS、BRAF基因突變檢測、乳腺*HER2基因 擴增檢測、神經(jīng)膠質(zhì)瘤IDH基因突變檢測等。以**靶向***相關(guān)基因檢測為例，在**形成的超早期,會出現(xiàn)**細胞的壞死和凋亡,這些凋亡或壞死的**細胞會釋放其DNA進入外周血,因此通過分析循環(huán)血液中是否含有**特異的...

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數(shù)字PCR也叫DigitalPCR（dPCR），是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說，數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴增曲線循環(huán)Ct值，不受擴增效率的影響，能夠直接讀出DNA的分子個數(shù)，能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份，然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中，使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子（即DNA模板），每個單元都會對目標分子進行擴增，然后再對每個單元進行熒光信號的統(tǒng)計并計算。相對而言，傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當中，這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。 數(shù)字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技...

研究方向甲基化含量鑒定作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析，現(xiàn)階段有不同的方法或技術(shù)來進行研究：如傳統(tǒng)的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序統(tǒng)計法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等。這些方法皆因方法學的問題而不能獲得精確的定量，而微滴式 數(shù)字PCR系統(tǒng)通過對樣品的微滴化處理及目標因子的***拷貝數(shù)定量，為甲基化程度的精確定量檢測提供了一種全新的技術(shù)。*****的伴隨診斷常用體液來源(如血液，胸腹水，唾液及尿液等)的待檢標本中的DNA，有正常脫落體細胞和病變脫落細胞兩種來源，前者的量遠大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細胞DNA的干擾，實現(xiàn)**標記物的有效檢測，如EG...

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研究方向*****的實時監(jiān)控已有數(shù)篇文章報道了使用數(shù)字PCR技術(shù)對患者***過程中的循環(huán)**DNA(ctDNA)進行檢測，實時監(jiān)控疾病進展。在非小細胞肺*、乳腺*和腸*等多種**患者中都取得了令人鼓舞的結(jié)果。與影像學及其他常規(guī)指標相比，ctDNA突變及豐度改變通常會提前數(shù)月出現(xiàn)，這樣就可以提醒醫(yī)生及時調(diào)整***方案，使患者得到更有效的***。隨著數(shù)字PCR熒光通道的增加和多指標檢測的成熟，數(shù)字PCR將會進入更多應(yīng)用領(lǐng)域，有力推動生命科學、醫(yī)學診斷、檢驗檢疫、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的快速發(fā)展。浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ，有需要可以聯(lián)系我司哦！黑龍江樣本數(shù)字PCR咨詢報價數(shù)字PCR無創(chuàng)產(chǎn)...

個體化診療通過檢測T790M位點突變情況，可以更好地評估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導(dǎo)第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而，由于qPCR平臺ARMS檢測技術(shù)的靈敏度有限，沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準確的檢測到T790M突變。這個時候dPCR技 術(shù)展現(xiàn)出了 的檢測精度，此外，dPCR***定量的優(yōu)勢也能充分發(fā)揮出來了，可以監(jiān)控突變含量變化，做到及早發(fā)現(xiàn)耐藥。2.）基因表達分析伊馬替尼（Imatinib）可以有效幫助很多慢性髓細胞白血病（CML）患者延長生存期，但是臨床上發(fā)現(xiàn)，伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物表達量有很大的關(guān)系。研究人...

二代測序輔助建庫目前靶向測序建庫方法包括擴增子方法，在均相溶液中，當擴增引物增加時，由于擴增引物之間的相互作用，從而影響擴增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴增，將可降低引物間相互作用，提高擴增效率。同時還可以實現(xiàn)對于少量模板的有效擴增，得到更多的有效測序數(shù)據(jù)。CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗證CRISPR-Cas9技術(shù)的發(fā)明，是基因編輯技術(shù)的一大突破，但如何驗證實驗是否成功，仍需要高靈敏度的檢測方法，數(shù)字PCR技術(shù)可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發(fā)明了以CRISPR為基礎(chǔ)的SHERLOCK技術(shù)可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測，但精確定量評估時仍采取了數(shù)字PCR進行確認。數(shù)字P...

與常規(guī)PCR方法相比，數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢：1、能夠完全定量：常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標準DNA曲線，但是由于待檢樣本與標準曲線不在統(tǒng)一體系，條件上會存在差異，另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準確性。而數(shù)字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響，可進行完全定量。2、樣本需求量低：適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本3、靈敏度高：數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個 PCR反應(yīng)，這些反應(yīng)可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性：由于目的序列被分配到多個 反應(yīng)體系中，明顯降低了背景信號和yìzhì物對反應(yīng)的干...

相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言，數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:●靈敏度可達到單個核酸分子：檢測限低至0.001%，主要系為數(shù)字PCR可以實現(xiàn)靶標DNA/RNA的生物濃縮；●無需標準曲線活參照基因進行對比來測定核算量，可對靶分子起始量進行***定量，直 接獨處DNA分子的個數(shù)；●適合環(huán)境復(fù)雜樣品的檢測：終點PCR檢測，不依賴Ct值，不依賴擴增效率，能克服PCR***劑的影響，避免樣品間的交叉***問題，適合各類復(fù)雜環(huán)境中的樣本進行***定量，如動血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等；浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ，期待您的光臨！重慶檢測數(shù)字PCR銷售數(shù)字PCR二代測序...

研究方向甲基化含量鑒定作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析，現(xiàn)階段有不同的方法或技術(shù)來進行研究：如傳統(tǒng)的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序統(tǒng)計法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等。這些方法皆因方法學的問題而不能獲得精確的定量，而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過對樣品的微滴化處理及目標因子的***拷貝數(shù)定量，為甲基化程度的精確定量檢測提供了一種全新 的技術(shù)。*****的伴隨診斷常用體液來源(如血液，胸腹水，唾液及尿液等)的待檢標本中的DNA，有正常脫落體細胞和病變脫落細胞兩種來源，前者的量遠大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細胞DNA的干擾，實現(xiàn)**標記物的有效檢測，如EG...

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定量PCR和數(shù)字PCR的特點：1.在20多年的使用和發(fā)展中，定量PCR作為一種技術(shù)平臺，已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù)，在工業(yè)界和分子檢測的某些應(yīng)用上，定量PCR已經(jīng)成為“金標準”。基礎(chǔ)研究方面，則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標準實驗指南”。2.在定量PCR的各種應(yīng)用中，基因表達分析(geneexpressionanalysis)的應(yīng)用比重約占七成，綜合各種因素來看，眼下定量PCR還是進行基因表達研究的理想手段。3.上述的“各種因素”具體展開，主要包括：通量、自動化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考文獻與protocol的數(shù)目等等。4.就目前市場上已有的數(shù)字PCR設(shè)備來看，定量PCR在...

dPCR的基本原理目前dPCR主要有兩種形式，芯片式和液滴式，但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中，每個反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個。這樣經(jīng)過PCR循環(huán)之后，有一個核酸分子模板的反應(yīng)器就會給出熒光信號，沒有模板的反應(yīng)器就沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應(yīng)器的體積，就可以推算出原始溶液的核酸濃度。可以使用幾種不同的方法來分配樣品，包括微孔板，毛細管，油乳劑和帶有核酸結(jié)合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設(shè)分子種群遵循泊松分布來估計不同分子的數(shù)量，根據(jù)泊松分布的原理，反應(yīng)體系中目標分子的拷貝數(shù)可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計算，從而解決了...

無創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細胞貧血（sicklecellanemia）是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病，有嚴重的危害，可以導(dǎo)致高達5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測孕婦胎兒游離DNA（cff-DNA）HBB基因突變。結(jié)果顯示，dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒（n=45）和75%的女性胎兒（n=20）H BB基因的突變狀態(tài)。當cff-DNA濃度大于7%時，可以**的檢測出HBB基因突變[3]，可以說是相當厲害了。浚和(上海)儀器科技有限公司是一家專業(yè)提供數(shù)字PCR 的公司，有需求可以來電咨詢！西藏...

MicroDrop-100數(shù)字PCR系統(tǒng)具有如下優(yōu)點：1、JUE對定量，結(jié)果判讀不需要依賴標準曲線；2、突破局限，檢測靈敏度可低至萬分之一；3、專利設(shè)計的具有高精度復(fù)雜三維微納防污染結(jié)構(gòu)的微流控芯片，單張可同時處理1-8個樣本；4、一鍵式自動操作，20uLPCR體系可生成100,000微滴，8個樣本單次微滴生成 需2分鐘；5、FAM、HEX（VIC）雙熒光通道，半導(dǎo)體激光器做為激發(fā)光 源相比LED光源，穩(wěn)定性高，功率穩(wěn)定不影響檢測靈敏度，單色性能優(yōu)異降低對檢測特異性的影響，且方向性好；6、檢測器為2個光電倍增管，靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CCD,普通的硅光子計數(shù)器，增益為10^5，光電倍增管增...

研究方向基因表達差異研究檢測時完全不依賴傳統(tǒng)的Ct值即可實現(xiàn)真正意義上的***定量，從而提供了比實時熒光定量PCR更精確的基因差異表達研究，尤其對于那些靶基因表達差異微小的情況：microRNA、lncRNAs等的表達分析、等位基因的不平衡表達、單細胞基因表達分析、Exosome內(nèi)核酸分子定量分析等。拷貝數(shù)變異(CNV)研究微滴化的樣品處理及檢測，這種擺脫Ct值的計算方法而直接獲取目標基因的***拷貝數(shù)，為拷貝數(shù)變異的研究提供了***的檢測精度。是其他諸如二代測序、芯片雜交等平臺無法達到的，因此采用數(shù)字PCR能夠有效對NGS、aCGH的實驗結(jié)果進行驗證，并具有成本低、通量高的特點。數(shù)字PCR ...

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MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR應(yīng)用范圍如下：a.動植物檢驗檢疫，動物源性分析、極微量病原菌檢測定量分析、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測；b.降低篩查成本、縮短檢測周期，適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風險評估；適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監(jiān)測等；適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導(dǎo)；c.可用于DNA甲基化的檢測、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測等。d.基因表達差異監(jiān)測單細胞研究：測序、PCRe.無創(chuàng)產(chǎn)前篩查：低成本、快速、傳染性疾病：HBV、HIV、COVID-19定量浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ，歡迎新老客戶來電！四川便攜式數(shù)字P...

數(shù)字PCR采用的策略概括起來非常簡單，就是“分而治之”（divideandconquer）［1］，這種做法非常類似于計算機科學中的“分治算法”，將一個標準PCR反應(yīng)分配到大量微小的反應(yīng)器中，在每個反應(yīng)器中包含或不包含一個或多個拷貝的目標分子(DNA模板)，實現(xiàn)“單分子模板PCR擴增”，擴增結(jié)束后，通過陽性反應(yīng)器的數(shù)目“數(shù)出”目標序列的拷貝數(shù)。在實際的數(shù)字PCR實驗中，事實上是通過呈現(xiàn)兩種信號類型的反應(yīng)器比例和數(shù)目進行統(tǒng)計學分析，計算出原始樣本中的模板拷貝數(shù)。數(shù)字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，用戶的信賴之選，有想法可以來我司咨詢！江蘇醫(yī)用數(shù)字PCR電話數(shù)字PCR無創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細胞...

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相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言，數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:●靈敏度可達到單個核酸分子：檢測限低至0.001%，主要系為數(shù)字PCR可以實現(xiàn)靶標DNA/RNA的生物濃縮；●無需標準曲線活參照基因進行對比來測定核算量，可對靶分子起始量進行***定量，直 接獨處DNA分子的個數(shù)；●適合環(huán)境復(fù)雜樣品的檢測：終點PCR檢測，不依賴Ct值，不依賴擴增效率，能克服PCR***劑的影響，避免樣品間的交叉***問題，適合各類復(fù)雜環(huán)境中的樣本進行***定量，如動血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等；浚和(上海)儀器科技有限公司是一家專業(yè)提供數(shù)字PCR 的公司，歡迎新老客戶來電！廣東立式數(shù)字PCR安裝數(shù)...

微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)在傳統(tǒng)的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理，即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬個納升級的微滴，其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子，或者含有一個至數(shù)個待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴增后，逐個對每個微滴進行檢測，有熒光信號的微滴判讀為1，沒有熒光信號的微滴判讀為0，根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。與傳統(tǒng)PCR相比所具有的優(yōu)勢不依賴Ct值或內(nèi)參基因，即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的***數(shù)目。微滴技術(shù)讓數(shù)字PCR更低成本，且更實用。數(shù)字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，用戶的信賴之選，有想法可以來我司咨詢！四川小型數(shù)字PCR要多少錢數(shù)...

數(shù)字PCR檢測及分析原理在上世紀90年代就被提出來了，但是無奈受限于當時的技術(shù)條件，樣本稀釋及分配都是靠手工來完成的，受到很多因素的干擾和限制；并且結(jié)果分析對于研究者來說也十分枯燥與繁瑣，因此在很長一段時間dPCR發(fā)展停滯不前。后來由于微流控技術(shù)與微納集成制造工藝的發(fā)展解決了dPCR過程中的幾個關(guān)鍵技術(shù)問題，推動了dPCR的研究與商業(yè)化的發(fā)展。目前根據(jù)dPCR樣本稀釋分配的方式，基本可分為三大類，一種是基于大規(guī)模集成微流控芯片；第二種是使用微反應(yīng)室/孔板；第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式，其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或者微滴當中，每個反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于...

二代測序輔助建庫目前靶向測序建庫方法包括擴增子方法，在均相溶液中，當擴增引物增加時，由于擴增引物之間的相互作用，從而影響擴增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴增，將可降低引物間相互作用，提高擴增效率。同時還可以實現(xiàn)對于少量模板的有效擴增，得到更多的有效測序數(shù)據(jù)。CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗證CRISPR-Cas9技術(shù)的發(fā)明，是基因編輯技術(shù)的一大突破，但如何驗證實驗是否成功，仍需要高靈敏度的檢測方法，數(shù)字PCR技術(shù)可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發(fā)明了以CRISPR為基礎(chǔ)的SHERLOCK技術(shù)可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測，但精確定量評估時仍采取了數(shù)字PCR進行確認。數(shù)字P...