腦組織分離方法簡述:將腦組織剪成薄片,放入離心管中加上消化液進行消化,經水浴、反復輕輕上下顛倒,再用移液間斷緩慢吹吸至消化結束。隨后加入培養基于消化液中,混勻,置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程,包括除雜、濾膜過濾、超離等。較后用PBS重懸外泌體,用重懸...
多糖多酚植物RNA提取試劑盒專門針對多糖,多酚等難提的植物RNA樣本提取設計,至今為止未發現不能攻克的樣本(棉花,番茄,板栗,龍眼,荔枝,葡萄,針葉植物,百合,獼猴桃,香蕉,甘蔗,海棠,蘋果,銀杏,小麥,水稻,玉米等農作物,果實,花卉,蔬菜等多糖多酚,色素等次...
多糖多酚植物RNA提取試劑盒專門針對多糖,多酚等難提的植物RNA樣本提取設計,至今為止未發現不能攻克的樣本(棉花,番茄,板栗,龍眼,荔枝,葡萄,針葉植物,百合,獼猴桃,香蕉,甘蔗,海棠,蘋果,銀杏,小麥,水稻,玉米等農作物,果實,花卉,蔬菜等多糖多酚,色素等次...
經典Trizol法并不能獲得總RNA:這個事實可能會刷不少新手甚至老手的三觀,但確有實驗支持:經典Trizol法會選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點,源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國鼎鼎大名的美女科學家,專做RNA相關的研究,包括miR...
細胞凍存步驟說明:配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;離心1000rpm,5min;去除胰蛋白酶,加入適量配制好的...
外泌體相關miRNA與肺病的診斷:miRNAs是一類含有20~25個核苷酸的非編碼小RNA,能夠通過下調或壓制靶mRNAs來調節轉錄水平上的基因表達,目前非編碼RNA被普遍發現存在于NSCLC患者外泌體中,參與一些病癥的形成和演化過程。單個miRNA可能通過壓...
原代細胞的小知識:1.解凍原代細胞對解凍過程非常敏感,因此將小瓶置于37℃水浴鍋中,保持并輕輕旋轉直到內容物剛剛解凍是很重要的。然后應立即從水浴中取出小瓶,并轉移到無菌操作臺。確保您的培養瓶在解凍前已經準備就緒,以便可以立即用于接種細胞,并置于培養箱中,我們在...
病毒RNA提取試劑盒可以快速從全血、血清、血漿、口腔拭子等生物液體中提取病毒RNA。在此試劑盒中,使用了核酸助沉劑--carrierRNA。核酸助沉劑不光有利于微量RNA的沉淀,同時也可以減少RNA的降解。本試劑盒操作簡捷方便。30-40min就可以完成一個樣...
RNA指的是核糖核酸。真核生物體的遺傳物質存在于細胞核內,多數的真核生物使用DNA也就是脫氧核糖核酸來作為遺傳的中心物質,但是少量的病菌遺傳物質可以是RNA。正因為病菌的遺傳物質是RNA,所以可以通過檢測病菌的RNA是否存在,或者其濃度和含量來判斷是否存在相應...
細胞外基質的介紹:細胞外基質(extracellularmatrix,ECM),是由動物細胞合成并分泌到胞外、分布在細胞表面或細胞之間的大分子,主要是一些多糖和蛋白,或蛋白聚糖。這些物質構成復雜的網架結構,支持并連接組織結構、調節組織的發生和細胞的生理活動。細...
細胞外基質重建你的身體:但部位并不是較少我們想要再生的目標,巴迪拉克立即意識到,基質的錨定作用可以幫助他解決不同的問題——肌肉生長。損壞的肌肉能夠在一定程度上再生,但如果某一特定肌肉群受到嚴重傷害,傷疤組織將阻礙肌肉的重生。從身體其他部位移植肌肉是目前較少的辦...
鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當的骨修復材料是治好骨缺損的中心環節。目前,臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植。其中,人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機礦物材料[1-2],由于不含自體骨組織中的有機大分子Ⅰ型膠原蛋白,其臨床療效遠遠低于...
鼠尾膠原使用方法:1、細胞培養器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例,用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應的培養器皿中,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開蓋在超凈臺上過夜晾干,也可以在室溫放置1小時后,用PBS洗3...
細胞外基質的主要類型及功能:細胞外基質多細胞生物不光*由細胞組成,還包括分布于細胞外空間,由細胞分泌的蛋白質和多糖所構成的網絡結構————細胞外基質(extracellularmatrik,ECM)。細胞外基質在結締組織中較為豐富,占據了結締組織的大部分空間,...
含細胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準備好懸浮于培養液的細胞,并放置于冰浴中。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠...
膠原蛋白的提取方法:酶法提取:酶法提取是利用蛋白酶使膠原溶解,水解條件溫和,反應速率快,提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結構,蛋白純度高,理化性質穩定,且無環境污染。酶法提取常用的蛋白酶有:胃蛋白酶、胰蛋白酶或者復合酶。工藝可選擇一步法,即利用酶液直接提取;二...
細胞外基質通過調節糖代謝影響癥轉移:考慮到葡萄糖代謝在細胞生長和遷移過程中的重要性,科學家們已經對葡萄糖代謝如何受到內部和外界刺激做出反應進行了深入的研究,但還是少有研究關注代謝和細胞外基質中特殊成分改變的關系,而細胞外基質成分的改變在正常發育和疾病進展過程中...
用于外泌體提取的體液收集注意事項:1、抽血技巧。操作要輕柔迅速。試管可翻轉8-10次使樣本與抗凝劑混勻,避免劇烈搖晃。混勻后,將試管固定垂直放置于離心分離器,在頂部記錄抽血的準確時間,因為抽血與離心之間的時間間隔可能是一個影響因素。外泌體在抽血后30分鐘內是比...
細胞外基質的成分:構成細胞外基質的大分子種類繁多,可大致歸納為四大類:膠原、非膠原糖蛋白、氨基聚糖與蛋白聚糖、以及彈性蛋白。上皮組織、肌組織及腦與脊髓中的ECM含量較少,而結締組織中ECM含量較高。細胞外基質的組分及組裝形式由所產生的細胞決定,并與組織的特殊功...
RNA的全稱是什么?核酸是一個叫米歇爾的瑞士青年化學家發現的,那還是1869年的事,到了1909年,一位美國生化學家又發現核酸中的碳水化合物有兩種核糖分子,因此核酸也有兩種,一種叫脫氧核糖酸,英文縮寫就是DNA,另一種是核糖核酸,英文縮寫是RNA。DNA一般只...
外泌體的提取、分離方法:聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史,近幾年,將其作為一種新的方法來分離外泌體。目前,市場已經有應用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒,較常見的是Syste...
原代細胞體外培養現狀:原代細胞自然生長有兩種方式,錨定依賴或非錨定依賴,這主要取決于它們在體內的組織來源:外周血(非錨定依賴)或固體組織部位(錨定依賴)。原代細胞一旦分離后,24-48h內需要進行貼壁或起始,開始培養。廣義地說,所有的哺乳動物細胞,無論其類型或...
植物RNA提取:植物組織中,富含酚類化合物,或富含多糖,或含有某些尚無法確定的次級代謝產物,或RNase的活性較高。這些物質在細胞裂解后與RNA緊密結合形成難溶復合物或者膠狀沉淀,很難將其去除。所以我們在提取植物組織時,要選取針對植物的試劑盒,試劑盒里的裂解液...
細胞外基質的化學組成包括3類:氨基聚糖和蛋白聚糖、膠原和彈性蛋白以及纖連蛋白和層粘連蛋白。主要功能表現在:對細胞組織起支持、保護、提供營養,以及胚胎發育形態建成、細胞分裂、細胞分化、細胞運動遷移、細胞識別、細胞黏著和通信聯絡等方面。植物細胞的細胞壁相當于植物體...
在細胞中,根據結構功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA(轉運RNA),rRNA(核糖體RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白質的模板,內容按照細胞核中的DNA所轉錄;tRNA是mRNA上堿基序列(即遺傳密碼子)的識別者和氨基酸的轉運者;rRN...
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:RNA完整性的電泳檢測:如果需要做Northern雜交,強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行RNA電泳,因為非變性膠不能分離所有的RNA分子。注意:大部分昆蟲的28SRNA被切割成兩個小的片段,彼此用氫鍵相連,所以在甲醛變性膠中,沒...
常用總RNA提取試劑:異硫氰酸胍法和Trizol法是動物組織及動物細胞總RNA提取較常用的方法,異硫氰酸胍法操作簡單快捷,適用于樣本足夠大的常規動物組織;Trizol法裂解能力較強,尤其適合小樣本及特別難提取的組織,如兔子皮膚,動物結締組織等總RNA的提取;另...
細胞外基質的作用:1.決定細胞的形狀體外實驗證明,各種細胞脫離了細胞外基質呈單個游離狀態時多呈球形。同一種細胞在不同的細胞外基質上粘附時可表現出完全不同的形狀。上皮細胞粘附于基膜上才能顯現出其極性。細胞外基質決定細胞的形狀這一作用是通過其受體影響細胞骨架的組裝...
注意事項:染色時:①染色時必須嚴格按照染色操作說明書進行染色。②在染色過程中,前一個染液浸染完成后,在進行下一個染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個染液沖洗干凈后再進行下一步驟。③每次滴加染液前,務必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染...
具膜囊泡,當我們使用常規方法分離這些結構時不推薦使用其他的名稱來稱呼它們。外泌體(exosome)適用于通過特殊手段拿到的由胞內體來源的釋放到細胞外的膜泡結構。建議對細胞外囊泡進行細分時使用物理上的界定如小細胞外囊泡(sEV)和中/大細胞外囊泡(m/lEV),...