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  • 國(guó)產(chǎn)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑
    國(guó)產(chǎn)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑

    LentiBOOST 和硫酸魚(yú)精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn),且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。人間充質(zhì)干細(xì)胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長(zhǎng)期轉(zhuǎn)基因表達(dá),并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來(lái)巨大希望。Polybrene是實(shí)驗(yàn)室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,但它未被批準(zhǔn)用于人體,并且還被證明會(huì)損害MSCs細(xì)胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗(yàn)是非常有必要的。LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)...

  • 快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案
    快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案

    慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達(dá)載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的慢病毒顆粒,需要利用表達(dá)載體和包裝載體同時(shí)共轉(zhuǎn)染293細(xì)胞或其衍生細(xì)胞,在細(xì)胞中進(jìn)行病毒的包裝,包裝好的慢病毒顆粒分泌到細(xì)胞外的培養(yǎng)基中,離心取得上清液后,通過(guò)純化濃縮進(jìn)一步提供慢病毒滴度,即可以直接用于宿主細(xì)胞的gan ran。目的基因進(jìn)入到宿主細(xì)胞之后,經(jīng)過(guò)反轉(zhuǎn)錄,整合到基因組,從而高水平的表達(dá)效應(yīng)分子。加入轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病...

  • 腫瘤細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)原理
    腫瘤細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)原理

    人間充質(zhì)干細(xì)胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長(zhǎng)期轉(zhuǎn)基因表達(dá),并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來(lái)巨大希望。Polybrene是實(shí)驗(yàn)室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,但它未被批準(zhǔn)用于人體,并且還被證明會(huì)損害MSCs細(xì)胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗(yàn)是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚(yú)精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn),且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚(yú)精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且對(duì)細(xì)胞活力或干細(xì)胞特性沒(méi)有劑...

  • 多功能慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)
    多功能慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)

    慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達(dá)到持久性表達(dá)目的序列的效果。在gan ran能力方面可有效地gan ran神經(jīng)元細(xì)胞、肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞,從而達(dá)到良好的的基因zhi liao效果。對(duì)于一些較難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,如原代細(xì)胞、干細(xì)胞、不分化的細(xì)胞等,使用慢病毒載體,能da da提高目的基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且目的基因整合到宿主細(xì)胞基因組的幾率da da增加,能夠比較方便快捷地實(shí)現(xiàn)目的基因的長(zhǎng)期、穩(wěn)定表達(dá)。有關(guān)慢病毒導(dǎo)染的臨床案例。多功能慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)...

  • DC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)
    DC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)

    在病毒附著到宿主細(xì)胞后,病毒RNA滲透進(jìn)宿主細(xì)胞,并以此為模板,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過(guò)程中,RNA的兩端都進(jìn)行了復(fù)制,產(chǎn)生了長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,每條鏈含有U3-R-U5序列,然后雙鏈DNA被運(yùn)送到細(xì)胞核內(nèi)。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒。德國(guó) Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物細(xì)胞的效率。LentiBOOST 是一種無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床應(yīng)用。可以用什么做慢病毒轉(zhuǎn)染?DC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)L...

  • 腫瘤細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)生產(chǎn)系統(tǒng)
    腫瘤細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)生產(chǎn)系統(tǒng)

    為了達(dá)到研究目的,在轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中加入轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑也能有效提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。近幾年LentiBOOST作為一種無(wú)毒性的化學(xué)轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑guang fan引起關(guān)注。LentiBOOST通過(guò)與細(xì)胞膜相互作用降低膜黏稠度,提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。可以用什么做慢病毒轉(zhuǎn)染?腫瘤細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)生產(chǎn)系統(tǒng)慢病毒載體的研究發(fā)展得很快,研究的也非常深入...

  • TAKARA慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)
    TAKARA慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)

    Lentiboost可增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,高達(dá)90%以上,研究證明對(duì)于細(xì)胞增殖無(wú)不良影響,且在T細(xì)胞中觀察到一定的促增殖效果。可減少M(fèi)OI,從而降低物料成本。均勻增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的數(shù)量,但不會(huì)過(guò)度增加單個(gè)細(xì)胞病毒載體拷貝數(shù)(VCN),符合FDA/EMA對(duì)ATMP產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)。LentiBOOST是德國(guó)SirionBiotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。目前該產(chǎn)品在美國(guó)和歐洲已有30多個(gè)藥物phaseIII/I...

  • HSC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)非特異性結(jié)合
    HSC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)非特異性結(jié)合

    LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。SIRION Biotech 為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開(kāi)發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗(yàn)提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。LentiBOOST 目前在美國(guó)和歐洲的多個(gè)臨床試驗(yàn)中使用。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級(jí)的臨床前研究和工藝開(kāi)發(fā),以及評(píng)估研究。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方...

  • 干細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)關(guān)鍵要素
    干細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)關(guān)鍵要素

    慢病毒載體的研究發(fā)展得很快,研究的也非常深入,在美國(guó)已經(jīng)開(kāi)展了臨床研究,效果非常理想,因此具有廣闊的應(yīng)用前景。慢病毒也被guang fan地應(yīng)用于表達(dá)RNAi的研究中。由于有些類型細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑瞬時(shí)轉(zhuǎn)染效果差,轉(zhuǎn)移到細(xì)胞內(nèi)的siRNA半衰期短,體外合成siRNA對(duì)基因表達(dá)的抑制作用通常是短暫的,因而使其應(yīng)用受到較大的限制。SIRION Biotech 為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開(kāi)發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗(yàn)提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。LentiBOOST 目前在美國(guó)和歐洲的多個(gè)臨床試驗(yàn)中使用。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級(jí)的臨床前研究和工藝開(kāi)發(fā),以及評(píng)估研究...

  • 淺談慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)怎么樣
    淺談慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)怎么樣

    慢病毒gan ran效率受到多種因素的影響,首先,考慮病毒包裝制備是否存在問(wèn)題,比如外源基因是否正確,病毒滴度是否合格等。其次,考慮病毒運(yùn)輸和保存方式是否得當(dāng),解凍病毒一定要在冰上進(jìn)行,避免反復(fù)凍融,否則會(huì)影響病毒滴度;-80℃保存半年以上需要重新測(cè)定滴度。細(xì)胞狀態(tài)對(duì)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,良好的生長(zhǎng)狀態(tài)是達(dá)到高gan ran效率的保證,一般選擇細(xì)胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行g(shù)an ran可提高gan ran效率。什么是慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑?淺談慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)怎么樣產(chǎn)品簡(jiǎn)介:LentiBOOST是德國(guó)SirionBiotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用...

  • 自動(dòng)化慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)品
    自動(dòng)化慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)品

    研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚(yú)精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且對(duì)細(xì)胞活力或干細(xì)胞特性沒(méi)有劑量依賴性的不良影響。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的組合dai biao了一種有價(jià)值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力。細(xì)胞狀態(tài)對(duì)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,良好的生長(zhǎng)狀態(tài)是達(dá)到高gan ran效率的保證,一般選擇細(xì)胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行g(shù)an ran可提高gan ran效率。慢病毒載體的研究發(fā)展是怎樣的?自動(dòng)化慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)品目前,CAR-T細(xì)胞主要通過(guò)病毒載體制備,大多數(shù)情況...

  • 增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)
    增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)

    慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒Zui外層是包膜(包膜蛋白決定了gan ran細(xì)胞的類型),再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,Zui里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒gan ran的xian zhu特點(diǎn)是gan ran個(gè)體在出現(xiàn)典型的臨床癥狀之前,大多經(jīng)歷長(zhǎng)達(dá)數(shù)年的潛伏期,之后緩慢發(fā)病,因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒載體是指以人類免疫缺陷病毒-1 (HIV-1) 來(lái)源的一種病毒載體,慢病毒載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息,是慢病毒載體系統(tǒng)的主要組成部分。慢病毒載體的研究發(fā)展。增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服...

  • 高效慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)
    高效慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)

    目前的基因&細(xì)胞zhi liao主要采用病毒和非病毒兩種載體形式。根據(jù)統(tǒng)計(jì),病毒載體約占進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)的項(xiàng)目 65%;而慢病毒因無(wú)嚴(yán)重的臨床事故出現(xiàn)成為目前相對(duì)安全的病毒載體選擇之一。慢病毒載體具有能gan ran非分裂期細(xì)胞、容納外源性目的基因片段大、穩(wěn)定性強(qiáng)、免疫原性小等特點(diǎn)。大量研究表明,相對(duì)其他病毒載體,慢病毒gan ran效率高,更容易gan ran一些較難gan ran的組織和細(xì)胞,其效率一般可以達(dá)到 30%-95% 以上。病毒顆的限制性攝取粒往往會(huì)降低基因或 shRNA 表達(dá)的成功率,并要求應(yīng)用更高的病毒滴度。然而,增加病毒數(shù)量以促進(jìn)表達(dá)可能會(huì)導(dǎo)致許多細(xì)胞類型的毒性副作用,并帶來(lái)不...

  • 腫瘤細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)
    腫瘤細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)

    SirionBiotechGmbH公司于2007年在德國(guó)馬丁雷德成立,此后一直致力于改變病毒載體供應(yīng)的模式。Sirion載體被用于基因功能研究、臨床前靶點(diǎn)驗(yàn)證、基因zhi liao和疫苗開(kāi)發(fā)。SirionTechnologies獲得了歐洲和美國(guó)幾項(xiàng)主要臨床試驗(yàn)(PhaseI/II/III)的許可,是歐洲主要的病毒載體技術(shù)商業(yè)供應(yīng)商,在短時(shí)間內(nèi)可提供quan mian的定制病毒載體組合,并提供個(gè)性化項(xiàng)目管理服務(wù)。LentiBOOST是德國(guó)SirionBiotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)...

  • 自動(dòng)化慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)生產(chǎn)系統(tǒng)
    自動(dòng)化慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)生產(chǎn)系統(tǒng)

    慢病毒載體是一種源于人類免疫缺陷病毒的基因載體,被guang fan用于真核細(xì)胞如造血干細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞的基因編輯。隨著對(duì)基因遞送工具長(zhǎng)期深入的研究,慢病毒作為基因載體已然guang fan用于基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)踐當(dāng)中。如在白血病的臨床zhi liao中,慢病毒可以gan ranT細(xì)胞,使其可以識(shí)別并且殺滅Zhong LiuB細(xì)胞;在地中海貧血的zhi liao中,慢病毒可以將正常的β-珠蛋白基因序列送入造血干細(xì)胞中,矯正貧血癥狀;它還在很多單基因遺傳病的zhi liao中發(fā)揮很大作用。隨著后基因組時(shí)代的來(lái)臨,基因zhi liao在醫(yī)學(xué)研究中所占比重越來(lái)越大。一些難以geng zhi或者緩解的傳統(tǒng)...

  • 增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)怎么樣
    增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)怎么樣

    慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達(dá)載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的慢病毒顆粒,需要利用表達(dá)載體和包裝載體同時(shí)共轉(zhuǎn)染293細(xì)胞或其衍生細(xì)胞,在細(xì)胞中進(jìn)行病毒的包裝,包裝好的慢病毒顆粒分泌到細(xì)胞外的培養(yǎng)基中,離心取得上清液后,通過(guò)純化濃縮進(jìn)一步提供慢病毒滴度,即可以直接用于宿主細(xì)胞的gan ran。目的基因進(jìn)入到宿主細(xì)胞之后,經(jīng)過(guò)反轉(zhuǎn)錄,整合到基因組,從而高水平的表達(dá)效應(yīng)分子。慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的限制是什么?增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)怎么樣慢病毒載體的研究發(fā)展得很快,研究的也非常深入,在美國(guó)已經(jīng)開(kāi)展了臨床研究,效果非常理想,因此具...

  • GMP級(jí)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)用途
    GMP級(jí)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)用途

    聚凝胺(polybrene)是一種陽(yáng)離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。polybrene的確切作用機(jī)制尚不清楚,多認(rèn)為它是通過(guò)中和細(xì)胞表面與病毒粒子之間的負(fù)靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細(xì)胞表面,從而促進(jìn)病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)。在增強(qiáng)各種細(xì)胞的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中,轉(zhuǎn)導(dǎo)效率隨polybrene濃度的增加而增加。但轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)的同時(shí)也會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生一定毒性作用,polybrene不僅對(duì)細(xì)胞增殖有劑量依賴性抑制作用,還會(huì)不同程度的影響各類細(xì)胞的生長(zhǎng)潛力。哪個(gè)牌子的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑比較好?GMP級(jí)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)用途為了達(dá)到研究目的,在轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中加入轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑也能有效提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。近幾年LentiBOOST...

  • 詳述慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)注意事項(xiàng)
    詳述慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)注意事項(xiàng)

    慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達(dá)到持久性表達(dá)目的序列的效果。在gan ran能力方面可有效地gan ran神經(jīng)元細(xì)胞、肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞,從而達(dá)到良好的的基因zhi liao效果。對(duì)于一些較難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,如原代細(xì)胞、干細(xì)胞、不分化的細(xì)胞等,使用慢病毒載體,能da da提高目的基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且目的基因整合到宿主細(xì)胞基因組的幾率da da增加,能夠比較方便快捷地實(shí)現(xiàn)目的基因的長(zhǎng)期、穩(wěn)定表達(dá)。LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。在轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)...

  • 自動(dòng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)生產(chǎn)系統(tǒng)
    自動(dòng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)生產(chǎn)系統(tǒng)

    在病毒附著到宿主細(xì)胞后,病毒RNA滲透進(jìn)宿主細(xì)胞,并以此為模板,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過(guò)程中,RNA的兩端都進(jìn)行了復(fù)制,產(chǎn)生了長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,每條鏈含有U3-R-U5序列,然后雙鏈DNA被運(yùn)送到細(xì)胞核內(nèi)。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒。德國(guó) Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物細(xì)胞的效率。LentiBOOST 是一種無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床應(yīng)用。慢病毒轉(zhuǎn)染可以使用哪些試劑?自動(dòng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)生產(chǎn)系...

  • 關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)技巧
    關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)技巧

    慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達(dá)到持久性表達(dá)目的序列的效果。在gan ran能力方面可有效地gan ran神經(jīng)元細(xì)胞、肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞,從而達(dá)到良好的的基因zhi liao效果。對(duì)于一些較難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,如原代細(xì)胞、干細(xì)胞、不分化的細(xì)胞等,使用慢病毒載體,能da da提高目的基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且目的基因整合到宿主細(xì)胞基因組的幾率da da增加,能夠比較方便快捷地實(shí)現(xiàn)目的基因的長(zhǎng)期、穩(wěn)定表達(dá)。慢病毒轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)導(dǎo)的區(qū)別。關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)技巧LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)...

  • 快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)工藝
    快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)工藝

    為了達(dá)到研究目的,在轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中加入轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑也能有效提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。近幾年LentiBOOST作為一種無(wú)毒性的化學(xué)轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑guang fan引起關(guān)注。LentiBOOST通過(guò)與細(xì)胞膜相互作用降低膜黏稠度,提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。什么可以增加慢病毒轉(zhuǎn)染的速度?快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)工藝LentiBOOST可廣泛應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細(xì)...

  • 提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)工藝
    提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)工藝

    目前,CAR-T細(xì)胞主要通過(guò)病毒載體制備,大多數(shù)情況下由慢病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒做載體。慢病毒載體(LVs)由于其有效的將基因整合進(jìn)靶細(xì)胞基因組,穩(wěn)定的基因表達(dá)等特點(diǎn),被認(rèn)為是Zui有希望的基因zhi liao載體。與其他病毒載體相比,慢病毒載體的整合模式具有更低的致Ai風(fēng)險(xiǎn),以及隨機(jī)整合基因風(fēng)險(xiǎn)低,因此,用慢病毒載體生產(chǎn)CAR-T細(xì)胞更加安全有效,而且靈活。更重要的是慢病毒相較于其他病毒載體,生產(chǎn)成本相對(duì)較低。另外,慢病毒載體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)分化細(xì)胞,也可以轉(zhuǎn)導(dǎo)分化細(xì)胞,因此,慢病毒載體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)更為guang fan的細(xì)胞,包括那些難轉(zhuǎn)導(dǎo)的血液前體細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。什么可以幫助增強(qiáng)慢病毒...

  • 提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)原理
    提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)原理

    di yi代慢病毒載體以Naldini以及Kafri[2]構(gòu)建的三質(zhì)粒系統(tǒng)為dai biao。該載體系統(tǒng)由包裝質(zhì)粒、包膜質(zhì)粒及載體質(zhì)粒3種質(zhì)粒組成。二代慢病毒載體系統(tǒng)是在di yi代基礎(chǔ)上改進(jìn)的,在包裝質(zhì)粒中刪去了HIV的所有附屬基因vif、vpu、vpr和nef,以減少產(chǎn)生RCR的風(fēng)險(xiǎn)。這些附屬基因的去除并不影響病毒的滴度和轉(zhuǎn)染能力,同時(shí)增加了載體的安全性。第三代慢病毒載體系統(tǒng)又增加了兩個(gè)安全特性:一是構(gòu)建了自身失活的慢病毒載體,即刪除了U3區(qū)的3’ LTR,使載體失去HIV-1增強(qiáng)子及啟動(dòng)子序列,即使存在所有的病毒蛋白也不能轉(zhuǎn)錄出RNA;二是去除了tat基因,代之以異源啟動(dòng)子序列,這樣原始...

  • T細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)策略
    T細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)策略

    人間充質(zhì)干細(xì)胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長(zhǎng)期轉(zhuǎn)基因表達(dá),并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來(lái)巨大希望。Polybrene是實(shí)驗(yàn)室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,但它未被批準(zhǔn)用于人體,并且還被證明會(huì)損害MSCs細(xì)胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗(yàn)是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚(yú)精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn),且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚(yú)精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且對(duì)細(xì)胞活力或干細(xì)胞特性沒(méi)有劑...

  • 高效慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)條件
    高效慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)條件

    產(chǎn)品簡(jiǎn)介:LentiBOOST是德國(guó)SirionBiotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。目前LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑在美國(guó)和歐洲已有30多個(gè)藥物phaseIII/II/I臨床實(shí)驗(yàn)中,并有相關(guān)藥物已上市銷售。產(chǎn)品特點(diǎn):1.增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,可高達(dá)90%—提高zhi liao蛋白表達(dá)量,有利于取得臨床試驗(yàn)成功2.減少M(fèi)OI低至2倍,從而降低COGS(Costofgoodssold)——減少Lent...

  • 多功能慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)
    多功能慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)

    LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。SIRION Biotech 為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開(kāi)發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗(yàn)提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。LentiBOOST 目前在美國(guó)和歐洲的多個(gè)臨床試驗(yàn)中使用。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級(jí)的臨床前研究和工藝開(kāi)發(fā),以及評(píng)估研究。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方...

  • 進(jìn)口慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)常見(jiàn)問(wèn)題
    進(jìn)口慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)常見(jiàn)問(wèn)題

    第三代慢病毒載體系統(tǒng)又增加了兩個(gè)安全特性:一是構(gòu)建了自身失活的慢病毒載體,即刪除了U3區(qū)的3’ LTR,使載體失去HIV-1增強(qiáng)子及啟動(dòng)子序列,即使存在所有的病毒蛋白也不能轉(zhuǎn)錄出RNA;二是去除了tat基因,代之以異源啟動(dòng)子序列,這樣原始的HIV基因組中的9個(gè)基因在慢病毒載體中只保留了3個(gè)(gag、pol和rev) ,因此第三代慢病毒載體系統(tǒng)更加安全。與第三代系統(tǒng)相比,第二代慢病毒系統(tǒng)使用更多的HIV蛋白(在較少的質(zhì)粒上)以產(chǎn)生功能性慢病毒顆粒。第三代包裝系統(tǒng)不表示tat,被認(rèn)為比第二代系統(tǒng)更安全,但可能更難使用,因?yàn)樗鼈冃枰盟膫€(gè)單獨(dú)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染才能產(chǎn)生功能性慢病毒顆粒。慢病毒包裝系統(tǒng)一般都是...

  • 關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)
    關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)

    LentiBOOST是德國(guó)SirionBiotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。目前該產(chǎn)品在美國(guó)和歐洲已有30多個(gè)藥物phaseIII/II/I臨床實(shí)驗(yàn)中,并有相關(guān)藥物已上市銷售。LentiBOOST可廣泛應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細(xì)胞類型,包括CD34+造血干細(xì)胞(HSCs),間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs),神經(jīng)干細(xì)胞,原代T細(xì)胞,NK細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等,對(duì)于難轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠T細(xì)胞亦有效。已成為改進(jìn)體外基因zhi liao和CAR...

  • DC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)
    DC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)

    基于慢病毒載體的體外基因zhi liao已在臨床試驗(yàn)中取得良好的效果,有望zhi yu一些造血系統(tǒng)的單基因遺傳病。通過(guò)提高靶細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和減少轉(zhuǎn)導(dǎo)中病毒載體量,基因zhi liao有效性、安全性和成本都可以得到改善。不同包膜糖蛋白偽型慢病毒載體通過(guò)與細(xì)胞膜表面的不同受體結(jié)合,促進(jìn)病毒黏附和入胞,增強(qiáng)不同靶細(xì)胞的病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。此外病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑可以在病毒進(jìn)入細(xì)胞過(guò)程或進(jìn)入后發(fā)揮作用,在提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的同時(shí)使靶轉(zhuǎn)導(dǎo)基因在體內(nèi)長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)。什么可以增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的速度?DC細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)SirionBiotechGmbH公司于2007年在德國(guó)馬丁雷德成立,此后一直致力于改變病毒載體供應(yīng)的模式。Si...

  • 創(chuàng)新慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)技巧
    創(chuàng)新慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)技巧

    在病毒附著到宿主細(xì)胞后,病毒RNA滲透進(jìn)宿主細(xì)胞,并以此為模板,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過(guò)程中,RNA的兩端都進(jìn)行了復(fù)制,產(chǎn)生了長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,每條鏈含有U3-R-U5序列,然后雙鏈DNA被運(yùn)送到細(xì)胞核內(nèi)。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒。德國(guó) Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物細(xì)胞的效率。LentiBOOST 是一種無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床應(yīng)用。慢病毒載體的研究發(fā)展。創(chuàng)新慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)技巧Le...

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