原代細胞標準化培養：由于每種原代細胞培養的條件迥異，而且每個實驗室都摸索出自己的培養條件，而對于一個特定的組織塊，所用培養條件不一樣，得出的所需細胞族群就不一樣，因為每種組織塊都含有不同種類的細胞群，而每一種細胞群在所選定的培養條件下（比如所選蛋白分解酶的種類和條件，細胞因子的種類，基礎培養基的種類或者是培養時間長短）都會得出不同的結果。由于各實驗室采取不同的培養條件，即使是同一塊心組織就有可能造成A實驗室獲得30%的心肌細胞，70%其他種類細胞，而B實驗室卻能獲得70%所需心肌細胞，30%為成纖維、脂肪等種類。這樣的話，即使是做同一項目的實驗，就有可能得出相反的科學結論。因此，早在2004年，美國科學界就質疑之前以原代細胞為主的科研文章，并同時提出原代細胞標準化培養的概念。原代細胞是出了名的難養，對培養環境和實驗操作的要求更苛刻。深圳原代細胞分離試劑盒哪里買

注意事項：所有相關器皿耗材都應為RNase-free產品，操作過程要小心，帶口罩、手套避免環境中RNA酶污染樣品。RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之間，但這并不表示RNA不純，需電泳檢測。使用時一定要根據自己的實驗需要購買提取試劑盒，如果不是試劑盒，或許能提出RNA，但不能確保其質量以及完整性，會影響RT-PCR、Northernblot、Dotblot、RealtimeRTPCR、芯片分析、polyA篩選、體外翻譯、RNase保護分析、分子克隆等后續實驗的結果。當前提取效果好的是RNA提取試劑盒，但其售價較高，單次實驗費用花費太大，對精度要求不高的實驗沒有必要購買，當然還有其它的進口試劑盒，但是均存在價格高、訂貨周期長的問題（如果碰上國內無貨的時候，要從國外發貨，會等很長一段時間）。普通的提取實驗用國產的試劑盒就足以，價格不高，基本上各地均有現貨，如天根（國內生產的試劑盒中銷售面比較廣的一種）等，其價格比進口試劑盒要便宜許多，且效果還不錯，性價比還可以珠海原代細胞分離試劑盒廠家使細胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。

原代細胞與細胞系該如何選：原代細胞生長緩慢，一般認為，原代細胞培養的第1代和傳代到第10代以內統稱為原代培養。原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細胞的生長會出現停滯，大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續傳下去，這些存活的細胞一般能夠傳到40-50代，這種傳代細胞叫做細胞株。當細胞傳至50代以后又會出現“危機”，這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有變的特點，從而可能無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱為細胞系。

原代細胞培養：組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，較簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘，若懸液量大，可適當延長離心時間，但速度不能太高，延時也不能太長，以避免擠壓或機械損傷細胞，離心沉淀用無鈣、鎂PBS洗兩次，用培養基洗一次后，調整適當細胞濃度后再分瓶培養，若選用懸液中某些細胞，常采用離心后的細胞分層液，因為，經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。原代細胞不僅普遍應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究。

細胞凍存：通常我們不推薦重新凍存原代細胞，因為這可以促進細胞衰老和/或導致功能變化。原代細胞非常敏感，重新凍結可能導致細胞死亡或損傷。與細胞系不同，原代細胞增殖有限，我們建議盡早使用原代細胞進行實驗以防止遺傳漂移，如果你正在使用一個增殖困難的細胞類型，你應該密切監測細胞形態，因為少量混雜的細胞（如成纖維細胞）可能隨著時間的推移，大量生長從而成為主要細胞。正常的原代細胞培養，在無污染的情況下，建議培養基中不加抗體，抗體會影響細胞的某些基因變異從而導致實驗數據有差異，所以cellsystems的細胞在分離提取時就考慮到這點，他們不會采用任何抗體去分離和純化的同時，通過酶消化或者離心洗滌的方法讓細胞達到95%以上的純度，這樣得到的實驗數據更為準確給培養的細胞提供更多的類似于在體內時細胞之間的相互作用。北京正規原代細胞分離試劑盒進貨價

大多數組織可以制備原代細胞，但生長的快慢及難易程度不一。深圳原代細胞分離試劑盒哪里買

原代細胞的培養：原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和部位后立即進行培養。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基本性質，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。但實際上，通常把靠前代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。較常用的原代細胞的培養有組織塊培養和分散細胞培養。組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上，加入培養基后進行培養。分散細胞培養大致步驟為：將動物組織從機體中取出離散成單個細胞(常用胰蛋白酶)，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。深圳原代細胞分離試劑盒哪里買