外泌體鑒定：參與生物功能的分子，如凋亡轉接基因2互作蛋白X（ALIX）、一些病癥易感基因101蛋白（TSG101）、熱休克蛋白（HSP70、HSP90），以及細胞分泌的特異性蛋白。外泌體高通量檢測。外泌體內含有與細胞來源相關的蛋白質和核酸，可以運輸蛋白質、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等進入受體細胞，參與細胞間通訊。不同細胞來源的外泌體所含有的蛋白成分和RNA不太相同，可作為多種疾病的早期診斷標記物，也能作為靶向藥物的載體進行疾病治病。高通量測序。2.mRNA高通量測序。芯片（人、小鼠）。芯片（人、小鼠）。5.蛋白質組分析（iTRAQ、TMT、Label-free）。通過離心篩選初步去除體液中的細胞成分和細胞碎片，制成體液樣本備用。徐州外泌體提取試劑直銷廠家

人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合，進而靶細胞細胞內的信號通路。二是在細胞外基質中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合，從而細胞內的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質、mRNA以及microRNA。溫州正規外泌體提取試劑無法實現臨床的常規化應用。

外泌體相關蛋白質與肺病的診斷：近年來，高通量質譜分析被普遍地應用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究，這為我們揭示了更多具有生物標志物價值的分子。Birgitte等采用微陣列芯片技術研究了431例肺病患者和150例對照者血漿外泌體中的蛋白表達情況，發現CD151、CD171和TSPAN8這三種蛋白表達不光能區分一些病癥與正常組織，同時也能區分各種肺病的組織亞型。此外，聯合應用這三種蛋白診斷NSCLC的AUC達到0.74。Clark等采用納升液聯用技術（nano-ESI-LC-MS/MS）分析了來自正常支氣管上皮細胞系和兩個攜帶NSCLC細胞系的外泌體的蛋白表達譜，從中篩選出如細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子、溶酶體膜糖蛋白2等多種存在顯著性差異表達的蛋白，同時檢測分析這些蛋白有助于提高NSCLC診斷的敏感性和特異性。由于國內有關外泌體提取試劑的缺乏，我國對外泌體的研究還基本依賴于過程繁瑣的超速離心和進口提取試劑盒。

外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體，可通過細胞內吞泡膜向內凹陷形成多泡內涵體，內涵體與細胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間，其中包含RNA、蛋白質、microRNA、DN段等多種物質，存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中。外泌體從發現至今已有30多年的歷史，雖然較初被認為可能是細胞的“垃圾”，所以才被排出來，但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞。如今，研究已經發現外泌體在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、一些病癥細胞發生的發展、神經細胞信號轉導過程中都發揮著重要作用。主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。

外泌體與神經退行性疾病：外泌體可能促進或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質的聚集。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測到Tau和Aβ蛋白。類似的現象也在PD和ALS疾病中發現。PD病人腦脊液外泌體可檢測到α-synuclein，ALS病人外泌體中也可以檢測到SOD1或TDP-43。外泌體與疾病診斷（應用潛能）：外泌體生成機制表明，通過分析外泌體的組分，可以幫助識別其來源的細胞類型。這一特性已被應用于開發心血管疾病，神經系統疾病和一些病癥的分子診斷方法，也在肝腎肺相關疾病中進行研發測試。將沉淀物用PBS緩沖液進行懸浮，使外泌體懸浮于液體上層。超速離心法是目前外泌體相關文章中的主流方法，由于離心步驟繁瑣。南昌外泌體提取試劑供應商

外泌體表面有其特異性標記物，用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合。徐州外泌體提取試劑直銷廠家

外泌體的提取、分離方法：梯度密度離心法。研究發現，外泌體的密度在1.1~1.19kg·L-1之間，因此，可以采用密度梯度離心法來分離外泌體。該方法是將超速離心結合蔗糖密度梯度或蔗糖墊結合，原理是先除去非囊泡物質，再通過梯度密度濃縮提取外泌體，該方法可以得到相對較為純凈的外泌體。傳統的梯度密度方法通常需要離心16h，但是2012年，研究者[15]使用了62~90h才分離出某些確切囊泡，因此，該方法可能不足以沉淀所有的外泌體。如果離心時間不充足，污染物質可能和外泌體保持在相同的密度層，特別是這個密度范圍又比較寬。徐州外泌體提取試劑直銷廠家

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