昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法：將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中，加入50～100μLRNA洗脫液，室溫放置1～2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用~帶口罩、帽子，屏住呼吸、不說話，帶乳膠手套并要時常更換。南京RNA提取試劑價格

總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實(shí)驗(yàn)操作快速方便，顏色鮮明，便于分層。本試劑適用范圍普遍，可以從動物組織、植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細(xì)胞等樣品中提取總RNA。該方法對少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果。樣品在總RNA提取試劑中被充分裂解的同時能夠較大限度地保證RNA的完整性。在加入氯仿離心后，溶液會分成三層：上層無色水相、中間層和下層紅色有機(jī)相，RNA分布在上清層中。收集上清層后，經(jīng)異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA。提取的總RNA完整性好，無蛋白和DNA污染，可用于各種分子生物學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn)，如RT-PCR、Real-timeRT-PCR、Northernblot、DotBlot、體外翻譯等。上海太原RNA提取試劑他生物大分子如蛋白質(zhì)、多糖和脂類分子的污染應(yīng)降低到較低程度。

動物細(xì)胞RNA提取：1、懸浮細(xì)胞：可直接離心后棄掉培養(yǎng)基，用無菌PBS清洗1~2遍后，再用適量PBS懸浮起來，然后再加入裂解液進(jìn)行裂解。千萬不要完全棄掉液體后，往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液，這樣會使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè)，從而限制沉淀內(nèi)部的細(xì)胞與裂解液的接觸，從而導(dǎo)致細(xì)胞裂解不徹底，降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細(xì)胞：棄掉培養(yǎng)基后，用PBS洗1~2次，然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿，把細(xì)胞吹下來，轉(zhuǎn)移到無RNA酶的EP管中，加裂解液進(jìn)行提取。3、貼壁細(xì)胞：需要先用胰酶消化，然后收集到無RNA酶的EP管中，離心去其上清，用PBS洗1~2次，去除多余的胰酶，以適量PBS重懸后繼續(xù)進(jìn)行提取步驟。

與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能。RNA是以DNA的一條鏈為模板，以堿基互補(bǔ)配對原則，轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈，主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá)，是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過程中的橋梁。在此過程中，轉(zhuǎn)運(yùn)RNA是攜帶與三聯(lián)體密碼子對應(yīng)的氨基酸殘基與正在進(jìn)行翻譯的mRNA結(jié)合，而后核糖體RNA將各個氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進(jìn)而構(gòu)成蛋白質(zhì)分子。有些生物，例如一些病菌，也直接使用RNA作為遺傳信息的載體，而不是DNA。RNA存在于水相中。水相轉(zhuǎn)移后，RNA通過異丙醇沉淀回收。

植物RNA提取過程：植物組織成分相對于動物組織來說復(fù)雜多樣，因此其RNA的分離和純化的難度也隨之加大，如果要完美的數(shù)據(jù)結(jié)果，那么提取純度高、完整性好的RNA就成了關(guān)鍵所在。植物RNA的提取一般會經(jīng)歷以下幾個過程：1.破碎細(xì)胞壁。2.裂解細(xì)胞膜。3.雜質(zhì)去除，包括：DNA、蛋白質(zhì)、多糖、多酚、次生代謝產(chǎn)物等。4.純化和濃縮RNA。而在RNA提取過程中，純化除雜的過程是影響RNA純度的關(guān)鍵所在。在完整的細(xì)胞內(nèi)，多糖多酚類化合物，次級代謝產(chǎn)物，蛋白質(zhì)如RNase等與核酸是分離的，一旦細(xì)胞破碎，這些物質(zhì)就不可避免的會與RNA發(fā)生相互作用。純的RNA用RE緩沖液洗脫，不用酚提取或醇沉淀。南京RNA提取試劑廠家批發(fā)價

主要取決于離心柱對核酸的吸附能力。南京RNA提取試劑價格

拭子RNA提取試劑的選擇？拭子樣本的量與提取的核酸量成正比，如果要提高核酸得率，也可通過增加樣本量來實(shí)現(xiàn)。一般先取一根拭子的涮洗液樣本，然后進(jìn)行提取，如結(jié)果不理想可考慮增加樣本量或重新采樣。但如果增加樣本量或重新采樣還不能得到滿意結(jié)果，應(yīng)及時考慮更換試劑盒。目前國內(nèi)常用的拭子核酸提取試劑有Q、Biog等。根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn)，Q和T品牌試劑盒的拭子RNA提取得率（一根口腔拭子在口咽部來回刮擦10次）在0.5-3.5ug。同樣處理的口咽拭子，Biog試劑盒的提取得率在1-4ug，基本上都能滿足下游PCR相關(guān)實(shí)驗(yàn)的要求南京RNA提取試劑價格