鼠尾膠原使用方法：1、細胞培養器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例，用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應的培養器皿中，確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開蓋在超凈臺上過夜晾干，也可以在室溫放置1小時后，用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個月以上的時間。三維膠原凝膠的制備：A、無細胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）將200μL本品加到置于冰浴的離心管中，加入690μL雙蒸水，然后加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入100μL10×PBS或10×培養液，混勻后立即加到培養器皿中（混勻后pH為7左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要測定pH值）。將培養器皿在室溫放置20min待膠凝固后，轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。放上小玻片，自然干燥后小玻片就固定于培養瓶之中。寧波太原鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：將培養器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后，轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10PBS，使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。B．含細胞的三維膠原的制備（以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入23ul10PBS10培養液，混勻(混勻后pH左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養液，轉移到培養箱中培養。注意事項：在室溫下pH中性時可迅速成膠，在操作過程中要盡量保持低溫。溫州正規鼠尾膠原廠家現貨制備鼠尾膠原：離心，4000轉/分，10-15分鐘。

鼠尾膠原是一種天然培養基和一種天然的黏附劑，可用于細胞培養皿的包被，特別適合普通細胞培養器皿不易貼壁細胞的培養；也可用于制備三維膠原凝膠，使細胞在模擬的三維環境中生長。制備鼠尾膠原方法：1、取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡5分鐘；2、手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的較高，折斷尾骨后拉出尾腱；3、將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡；4、重復步驟2、3，直至尾腱量夠用；5、吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）；6、將尾腱置于平皿內剪碎，轉移至三角燒瓶中；7、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液；8、搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期；9、離心，4000轉/分，10-15分鐘；10、吸取上清，分裝成小瓶，4℃保存。

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步驟:(1)將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱，真空冷凍干燥備用；(2)凍干鼠尾腱經低溫凍干粉碎至200?400目；(3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹，鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL，期間不斷攪拌，防止凍結成塊，得到膠原溶脹液；(4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中，鼠尾腱與蛋白酶質量比為50:I?100:1，在4°C，48?74小時酶解，期間間歇性攪拌。鼠尾膠原醋酸溶解：氯仿的量約為膠原溶液的10%。

詳細步驟如下：1.75％酒精浸泡大鼠尾巴30min；2.將尾巴剪開、去掉皮毛，并剪成小段（3cm左右），抽出銀色的尾鍵；3.把剪碎的尾鍵置于150ml，0.1％消過毒的醋酸中，4℃放置，并不時振蕩；4.48h后取上清，4000轉離心30min后，取上清；5.分裝上清（鼠尾膠）4度（或-20度）保存。有時可繼續向4。中沉淀中加入10－20ml醋酸，重復以上步驟，以制備更多的鼠尾膠。在使用時，先將冰存的膠原液在室溫下解凍，再按以下步驟包被培養器皿：1）用吸管吸取膠原液，在無菌的培養器皿的生長面內壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液。2）若包被的是培養瓶，可向培養瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻。讓氨氣充入瓶內后，即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞。若為培養皿或板的話，可將培養皿或板放在已消毒的飯盒內，將浸有氨水的棉球放入飯盒內，蓋緊飯盒蓋，四周用封口膠封死。成功建立了利用自制鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法，并且制作簡便,成本低廉。重慶正規鼠尾膠原價格

通常情況下骨質總量中的鈣、鎂、磷等無機物質光占總量的百分之幾而膠原蛋白等有機物質卻要占超過80%。寧波太原鼠尾膠原

膠原蛋白分離提純實驗方案：提取鼠尾膠原蛋白的實驗步驟：1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對初步處理的鼠尾腱進行酶解，持續一段時間待混合物變成無色、透明、粘稠液體后即可在4℃，5000g的離心力下離心20min，收集上清即為粗制鼠尾膠原蛋白原液。2、將一定濃度的氯化鈉溶液加入其中，持續攪拌直至白色絮狀沉淀從溶液中析出，繼續加入氯化銨直至沉淀不在析出為止，4℃，5000g的離心力下離心20min后獲得白色沉淀。沉淀物加入一定濃度的醋酸溶液中溶解。3、將溶解后的鼠尾膠原蛋白溶液繼續反復進行鹽析處理，重復步驟2的過程2~4次。_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x000c_鼠尾膠原蛋白經SDS-PAGE蛋白質電泳。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。寧波太原鼠尾膠原