如何提高細胞轉染效率：1.組織培養試劑優化細胞生長條件。只使用新鮮配制的培養基和添加劑，并經可能減少所用試劑的變更。基礎培養基—目前所使用的各種市售培養基(如，RPMI1640和DMEM)。培養基的成分包括營養物質(氨基酸，葡萄糖)，維生素，無機鹽，和緩沖物質。有些成分非常不穩定，因此如果不在使用時新鮮加入就可能會產生問題。務必要使培養基避光保存。因為已知有一些組分和緩沖物質，如HEPES，當暴露于光照下就會分解產生細胞毒性物質。另外，血清，添加劑，來自于培養箱內的污染物、化學物質，或/細胞的污染也都可能影響到細胞生理。2.細胞生長狀態密切觀察您的細胞;確保它們狀態良好。在開始轉染細胞之前，先制定一個適當的種板方案，使細胞密度從轉染開始到結束都保持較佳狀態。增加成功幾率—細胞是轉染過程中的一個關鍵元素，它可以是影響結果的一致性和質量的較重要的變量。陽離子脂質體轉染試劑脂質轉染試劑，以其適用宿主范圍廣。無錫細胞高效轉染試劑產品介紹

細胞轉染，你至少要掌握以下幾點：主要有下面幾種方法：：化學法：磷酸鈣法、DEAE-右旋糖苷法、陽離子脂質體法；物理法：電穿孔法、顯微注射法、顆粒傳遞法；細菌介導法：逆轉錄細菌、腺細菌A.陽離子脂質體法：帶正電的脂質體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物被細胞內吞。特點：簡單通用，適用性廣，轉染效率高，重復性好，但轉染時需除血清，轉染效率隨細胞類型變化大。由于脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會遠大于懸浮細胞，所以貼壁比懸浮轉染效率要高。懸浮細胞建議使用電穿孔法。B.電穿孔法：利用高壓電脈沖對細胞膜的干擾，使其形成利于核酸進入的微孔。青島正規細胞高效轉染試劑直銷廠家建議選擇50%~80%區間密度進行細胞轉染。

細胞轉染方法：1.脂質體轉染法陽離子脂質體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過靜電作用，將DNA分子包裹入內，形成DNA脂復合物，也能被表面帶負電的細胞膜吸附，再通過融合或細胞內吞進入細胞。脂質體轉染適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中，是目前實驗室較方便的轉染方法之一，其轉染率較高，優于磷酸鈣法。由于脂質體對細胞有一定的毒性，所以轉染時間一般不超過24小時。常用細胞類型：cos-7、BHK、NIH3T3、Hela等2.電穿孔轉染法電流能夠可逆地擊穿細胞膜形成瞬時的水通路或膜上小孔促使DNA分子進入胞內，這種方法就是電穿孔。當遇到某些脂質體轉染效率很低或幾乎無法轉入時建議用電穿孔法轉染。一般情況下，高電場強度會殺死50%-70%的細胞。現在針對細胞死亡開發出了一種電轉保護劑，可以較大的降低細胞的死亡率，同時提高電穿孔轉染效率。

細胞轉染簡介：轉染，是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例；化學介導方法很多，如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術；生物介導方法，有較為原始的原生質體轉染，和現在比較多見的各種細菌介導的轉染技術。通過實驗優化合適的轉染條件對于轉染效率的提高很重要。

DNA細胞轉染步驟：1.提前現在細胞鋪板提前現在將細胞種植在24孔板中，以轉染時細胞密度在60％左右為宜。2.轉染過程⑴將0.8μg的DNA用25μl無血清稀釋液稀釋，充分混勻，制成DNA稀釋液。注意：無血清稀釋液建議采用OPTI-MEM、無血清DMEM或1640。⑵將2μlEntransterTM-H4000用25μl無血清稀釋液體稀釋，充分混勻，制成EntransterTM-H4000稀釋液。室溫靜置5分鐘。⑶將EntransterTM-H4000稀釋液分別加入到DNA稀釋液中，充分混勻（可用振蕩器振蕩或用加樣器吹吸10次以上），室溫靜置15分鐘。轉染復合物制備完成。⑷將轉染復合物加入到含細胞和完全培養基的培養容器上，輕柔混勻。注意：①對本試劑，采用含血清的全培養基有助于提升轉染效率。一類是瞬時轉染，一類是穩定轉染（很長轉染）。石家莊細胞高效轉染試劑廠家

轉染 ，是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。無錫細胞高效轉染試劑產品介紹

細胞轉染常用步驟：1.轉染試劑的準備①將400ul去核酸酶水加入管中，震蕩10秒鐘，溶解脂狀物。②震蕩后將試劑放在－20攝氏度保存，使用前還需震蕩。2.選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質體體積：DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的DNA，震蕩后在加入合適體積的轉染試劑，再次震蕩。3.將混合液在室溫放置10―15分鐘。4.吸去培養板中的培養基，用PBS或者無血清培養基清洗一次。5.加入混合液，將細胞放回培養箱中培養一個小時。6.到時后，根據細胞種類決定是否移除混合液，之后加入完全培養基繼續培養24－48小時~無錫細胞高效轉染試劑產品介紹