經典Trizol法并不能獲得總RNA：這個事實可能會刷不少新手甚至老手的三觀，但確有實驗支持：經典Trizol法會選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點，源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國鼎鼎大名的美女科學家，專做RNA相關的研究，包括miRNA。幾年前她們組發現一個奇怪的“現象”，即貼壁細胞在消化之后，會有一些miRNA的豐度突然降低，看起來好像是被快速“降解”掉了，并據此寫了一篇文章發到MolecularCell上。但很快她們就發現，這個“現象”難以重復：如果用Trizol做實驗，就一定是陽性結果，而用試劑盒提RNA，就重復不出來。難道是號稱能提總RNA的Trizol方案出了問題？確實如此。經進一步實驗后發現，經典的Trizol方案會使得低GC比的miRNA丟失。血漿/血清RNA提取試劑盒：高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質，提取RNA的純度高，產量大。無錫RNA提取試劑哪家便宜

RNA提取：預備工作（1）塑料制品：盡量使用一次性無菌塑料制品。已標明RNase-free的塑料制品，如沒有開封使用過，通常不必再處理。處理的步驟如下：O在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強的劇毒物，須在通風櫥中小心使用）O將待處理的塑料制品放入一個可以高溫滅菌的容器中，注入DEPC-H2O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通風柜中37℃或室溫下處理過夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中，將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口，高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥，置潔凈處備用。（2）玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時以上。杭州RNA提取試劑銷售廠家提取的RNA樣品中不應存在對酶存在壓制作用的有機溶劑及過高濃度的金屬離子。

提取RNA的詳細步驟：首先，將研缽晾干夠，倒入1/3體積的液氮，加入0.2g均質的植物材料，充分研磨后轉入一個含有300微升GMT的1.5ml的離心管中，搖勻。然后，加入30微升2mol/lNaAc進行搖勻，加入300微升酸酚搖勻，加入100微升的氯仿搖勻。然后，在四攝氏度12000r/min下離心二十分鐘，吸取上清液的3/4，加入等體積的異丙醇，于冰上放置十五分鐘。然后，在四攝氏度12000r/min下離心十分鐘，將沉淀懸浮于含100微升的4mol/lLiCl小試管中，于-20攝氏度下放置過夜。然后，在4攝氏度13000r/min下離心10-15min，將沉淀溶于0.4mlDEPC處理水中，加入1/2體積氯仿和1/2體積酸酚，搖勻，進行抽提，在4攝氏度13000r/min下離心五分鐘。將上清液中加入等體積的氯仿搖勻，進行抽提，在四攝氏度13000r/min下離心五分鐘，上清液中加入1/10體積3mol/lNaAc和兩倍體積的午睡乙醇與-20攝氏度放置一小時。

細胞RNA提取的方法：異丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以見到側壁沉淀，輕輕吸棄上清。向EP管中加入75%酒精洗滌沉淀，幫助分離剩余的有機試劑（剩余有機試劑過多會影響OD值和PCR反應），輕彈沉淀，使其浮在酒精，靜置1-2min，讓酒精充分接觸沉淀，充分溶解有機試劑，然后4度離心5min。輕輕吸棄上清。將EP管再次放于離心機中瞬時離心，棄掉管壁殘余液體。然后將EP管置于超凈臺中干燥5-10min.。注意RNA樣品不要過于干燥，否則很難溶解。加入50ulDEPC處理水，震蕩充分溶解沉淀。測量RNA濃度。將RNA保存于-80度。細菌總ＲＮＡ提取試劑盒：提取的總RNA純度高，沒有DNA和蛋白質污染，適用于RT-PCR。

新型土壤總RNA快速提取試劑盒：獨特裂解劑/裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶，然后RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于玻璃奶，然后將粗純化的玻璃奶轉移到離心柱，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細胞代謝物、蛋白等雜質去除，較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。試劑盒特點:離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。兼容性強，適用于各種不同的土壤、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。快速，簡捷，單個樣品操作一般可在1小時內完成。多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達1.9以上，可直接用于PCR，Northern-blot和各種酶切反應。tRNA是mRNA上遺傳密碼的識別者和氨基酸的轉運者。杭州RNA提取試劑銷售廠家

移去水相后，用乙醇可從中間相沉淀得到DNA，加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質。無錫RNA提取試劑哪家便宜

RNA提取試劑注意事項：1、需自備氯仿，異丙醇，DEPC，75%乙醇(DEPC水配制)，和DEPC水。2、所有離心管，泵頭及相關溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶，其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜，然后滅菌，烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中，處理過夜，滅菌即成DEPC水。3、使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些。因為在細胞或組織凍融過程中一些細胞或組織內的RNase會被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時抽提RNA，推薦先加入適量TRIReagent，并裂解樣品后凍存。無錫RNA提取試劑哪家便宜