眾所周知，RNA提取是一項困難的工作。常見的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染。此外，不同的樣品類型有自己獨特的特性，需要特別注意。例如，微生物(如革蘭氏陽性/陰性細菌、菌類、古生菌等)的細胞壁堅硬，不易被化學(xué)和酶解。其他樣本類型，如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等)，可與RNA共沉淀，并可壓制下游分析，如RT-qPCR。RNA是不穩(wěn)定的，極易降解。許多樣品含有高水平的RNase，會快速降解RNA。為了使之較小化，較好在采集時穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室。然而，這些方法也有缺點，如核酸的凍融損傷，并不是所有的研究人員在采集樣品時都能立即使用這些方法。研缽150度烘烤4小時，離心管、吸頭用DEPC處理。RNA提取試劑供應(yīng)商

酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型)：一、原理簡介。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶，然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。二、試劑盒特點：1、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好，純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點，不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程，RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨有的RL裂解液配方，可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程，提取RNA純度更高。5、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量，提高了純度~寧波正規(guī)RNA提取試劑哪里買根據(jù)它們在不同的PH值和不同極性溶劑的溶解度不同而使得分開。

RNA提取醇沉淀不是越多就越好。有些實驗方案會推薦，在異丙醇沉淀后，用乙醇沉淀兩次。實際上，任何提取實驗，都會在純度和得率這一對矛盾中取舍。醇沉淀會將脂溶性雜質(zhì)去掉，但部分非脂溶性的雜質(zhì)依然會連同RNA一起被沉淀下來。因此，多整幾次，并不會讓RNA的純度翻倍，反而還會有降低得率的風(fēng)險。一般情況下，異丙醇和乙醇各沉淀一次即可。但是，倘若預(yù)計RNA濃度很低，那就只能放棄純度，在低溫沉淀數(shù)小時，以換來較高的得率。圍繞DEPC的玄學(xué)。許多實驗方案會推薦使用0.1%DEPC處理RNA相關(guān)用水，以滅活RNase。這一點是要肯定的。不過，在使用DEPC的過程中，又充斥著一些玄學(xué)。高壓滅菌后的DEPC水，會有一股“香甜”的味道。許多人會以為那是殘留的DEPC而不敢用。實際上，這只是DEPC分解成CO2和乙醇后，產(chǎn)生的一些揮發(fā)性酯類副產(chǎn)物。

植物RNA提取：植物組織中，富含酚類化合物，或富含多糖，或含有某些尚無法確定的次級代謝產(chǎn)物，或RNase的活性較高。這些物質(zhì)在細胞裂解后與RNA緊密結(jié)合形成難溶復(fù)合物或者膠狀沉淀，很難將其去除。所以我們在提取植物組織時，要選取針對植物的試劑盒，試劑盒里的裂解液能有效解決多酚易氧化、多糖化合物與核酸分離等難題。1、植物的果皮、果肉、種子、葉片等要在研缽中充分研磨，研磨過程中液氮要及時補充，避免樣品融化，研磨后的樣品應(yīng)迅速加入裂解液中震蕩混勻，避免RNA降解。2、像水稻及小麥葉片等富含纖維的樣本，則應(yīng)適當(dāng)減少提取用量，否則組織研磨及裂解不徹底，會使提取的RNA產(chǎn)量較低。3、含水分較多的植物組織例如石榴果實、西瓜果實、桃子果實等則應(yīng)當(dāng)適當(dāng)提高樣本量（可選100~200mg）。4、植物組織，如植物葉片、根莖、堅硬的果實等材料一般建議使用液氮在研缽中徹底研缽成份，再繼續(xù)進行提取步驟。常規(guī)的組織勻漿機對植物組織的勻漿效果可能不佳，一般不建議使用。為了提高裂解效果，可以將裂解緩沖液與機械裂解步驟（研磨珠破碎）匹配。

總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實驗操作快速方便，顏色鮮明，便于分層。本試劑適用范圍普遍，可以從動物組織、植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細胞等樣品中提取總RNA。該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。樣品在總RNA提取試劑中被充分裂解的同時能夠較大限度地保證RNA的完整性。在加入氯仿離心后，溶液會分成三層：上層無色水相、中間層和下層紅色有機相，RNA分布在上清層中。收集上清層后，經(jīng)異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA。提取的總RNA完整性好，無蛋白和DNA污染，可用于各種分子生物學(xué)常規(guī)實驗，如RT-PCR、Real-timeRT-PCR、Northernblot、DotBlot、體外翻譯等植物花總ＲＮＡ提取試劑盒：特殊的提取緩沖液保證特殊植物材料中的總RNA充分溶解。無錫RNA提取試劑廠家直銷

提取的RNA樣品中不應(yīng)存在對酶存在壓制作用的有機溶劑及過高濃度的金屬離子。RNA提取試劑供應(yīng)商

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒1、高純度：試劑盒的進口吸附柱具有的專一吸附特性和強吸附力。三管齊下保證所提取RNA的產(chǎn)量和純度，前期得到的高質(zhì)量RNA才能保證后續(xù)實驗成功，尤其是對熒光定量PCR實驗等。2、無DNA污染可直接用于熒光定量PCR：目前市面上的試劑盒大多提出的RNA會出現(xiàn)DNA污染其結(jié)果嚴(yán)重影響后續(xù)實驗，特別是非常靈敏的熒光定量PCR的實驗。一些市面上單獨賣的去DNA污染的試劑，效果不穩(wěn)定，去除DNA污染不徹底。本產(chǎn)品操作簡單，去除DNA徹底，得到的RNA樣品可直接用于熒光定量PCR，反轉(zhuǎn)錄等各種后續(xù)實驗。RNA提取試劑供應(yīng)商