鼠尾膠原簡介：鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備，純度達到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養皿的包被，特別適合普通細胞培養器皿不易貼壁細胞的培養；也可用于制備三維膠原凝膠，使細胞在模擬的三維環境中生長。質量標準：1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無菌檢驗結果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細胞培養皿后培養PC-12細胞，貼壁及生長正常。4、本品濃度1mg/mL，pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠，NIH-3T3細胞在三維凝膠內生長正常、PC-12細胞在三維凝膠表面生長正常。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個月以上的時間。上海正規鼠尾膠原廠家供應

鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當的骨修復材料是治好骨缺損的中心環節。目前，臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植。其中，人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機礦物材料[1-2]，由于不含自體骨組織中的有機大分子Ⅰ型膠原蛋白，其臨床療效遠遠低于自體骨組織。但是，自體骨移植和同種異體骨移植均來源于人類自身骨組織，數量有限，難以滿足臨床需要。因此，研發與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料，成為全世界骨組織工程學者孜孜以求的目標。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產物，在分子結構上，羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板，呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙，沿著膠原纖維的長軸縱向礦化生長[3]。本研究仿生天然骨組織的分子結構，酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型膠原蛋白，重構形成Ⅰ型膠原纖維，然后將Ⅰ型膠原纖維放置在礦化液中模擬人體內骨生物礦化，通過透射電子顯微鏡(TEM)和電子衍射觀察羥基磷灰石鈣晶體在膠原纖維內部的骨生物礦化。上海正規鼠尾膠原廠家供應為了盡可能減少對動物的傷害和方便試驗人員的操作，剪下一小段鼠尾是一個不錯的選擇。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準備好懸浮于培養液的細胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入23ul10×PBS或10×培養液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養液，轉移到培養箱中培養。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。

I型鼠尾膠原是借鑒NavneetaRajan,JasonHabermehl法，經過乙酸抽提、離心、滅菌、透析等步驟制備得到的高純度、高活性膠原蛋白，屬于醫藥級別產品，可用于包被細胞培養器皿（單分子層包被），適合多種類型細胞的貼壁如肝臟細胞、神經節細胞、胚胎細胞、肌細胞、肺細胞、神經鞘細胞等。I型膠原蛋白包被細胞培養板，規格為6/24孔板，表面經I型膠原蛋白包被，可以很好的降低蛋白質的吸附。使用這種細胞培養板培養細胞，可以獲得良好的細胞貼壁率，細胞增殖速度快，形態均一，細胞培養成功率高。制備鼠尾膠原：重復步驟2、3，直至尾腱量夠用。

鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌、預冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水不含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul生友鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入100ul10xPBS或10x培養液，混勻后立即加到培養器皿中(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴。上海正規鼠尾膠原廠家供應

對于生物科研汪們來說，大白鼠、小白鼠們簡直渾身是寶。上海正規鼠尾膠原廠家供應

鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代培養中的應用：在國外的藥理,毒理和皮膚病學的研究領域中已得到的限翩,否則培養成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養層,提高了培養細胞的材料和方法r1]實驗材料:培養液DEIdE(G皿}ao),表皮細胞生長因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細胞培養皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細胞的分離和細胞懸液的制備:2～3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細胞懸液,加入細胞培養液.用梯度離心收集細胞,以3xi0/m]濃度接種平皿.(3)鼠尾膠原凝膠體的制備:具體方法參見文獻c13o(4)培養皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴入~35mm培養皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中30rain,散盡剩余氨氣。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。上海正規鼠尾膠原廠家供應