1983年，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn)，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應(yīng)功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。由于國內(nèi)有關(guān)外泌體提取試劑的缺乏，我國對外泌體的研究還基本依賴于過程繁瑣的超速離心和進口提取試劑盒。長沙外泌體提取試劑推薦廠家

外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型，其可參與到機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換，從而導(dǎo)致大量新生血管的生成，促進了一些病癥的生長與侵襲。功能：當(dāng)外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后，其被認(rèn)為是細胞排泄廢物的一種方式，如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。長沙外泌體提取試劑推薦廠家首先在無菌條件下提取人體體液，并用PBS緩沖液進行稀釋。

外泌體（exosomes）是活細胞經(jīng)過"內(nèi)吞-融合-外排"等一系列調(diào)控過程而形成的膜性囊泡，來源于晚期核內(nèi)體(也稱為多囊泡體)，直徑約為30-150nm，密度在1.13-1.21g/ml，天然存在于血液、唾液、尿液及母乳等體液中，同時外泌體也存在于組織和細胞間隙中。人體中幾乎所有類型的細胞均能產(chǎn)生外泌體，人體中大約有1014個外泌體，大約平均每個細胞產(chǎn)生1000-10000個。外泌體中含有核酸（DNA、miRNA、lncRNA、mRNA、tRF等）、蛋白和脂類，在細胞間物質(zhì)和信息轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用，研究表明其在干細胞、免疫調(diào)控、瘤轉(zhuǎn)移、血管生成以及生物標(biāo)志物等領(lǐng)域都發(fā)揮著不可替代的作用。

用于外泌體提取的體液收集注意事項：1、抽血技巧。操作要輕柔迅速。試管可翻轉(zhuǎn)8-10次使樣本與抗凝劑混勻，避免劇烈搖晃。混勻后，將試管固定垂直放置于離心分離器，在頂部記錄抽血的準(zhǔn)確時間，因為抽血與離心之間的時間間隔可能是一個影響因素。外泌體在抽血后30分鐘內(nèi)是比較穩(wěn)定的，若時間過長將導(dǎo)致外泌體數(shù)量增加。血小板極易因抽血時的物理因素而并釋放出外泌體，其中包括接觸、壓力、切力。2、抽血時間。除了血液黏度，體內(nèi)血液的各項指標(biāo)在1天中變化很大。生理節(jié)律會對血小板的產(chǎn)生很大的影響。白細胞的募集和循環(huán)系統(tǒng)中促炎細胞和細胞會隨時間變化。大量的具有特殊表面分子的微粒也被證明會隨時間變化。目前尚無設(shè)計較好的實驗對證實不同時間血液中外泌體的變化，故應(yīng)在相同的時間采集樣本。目前飲食是否會對EV產(chǎn)生影響尚未可知，但是由于脂蛋白可運載RNA且食物的攝取可以影響循環(huán)脂蛋白顆粒的類型、數(shù)量和作用，故抽血可在較后一次用餐后一段確定的時間進行。如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性），顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物。

外泌體的提取、分離方法：開發(fā)高效、快速、穩(wěn)定，并且保持外泌體結(jié)構(gòu)和生物功能完整性的方法，是目前外泌體應(yīng)用于臨床的基礎(chǔ)和前提。從細胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多，但是外泌體的純度和產(chǎn)量卻和分離方法息息相關(guān)。通常分離步驟少、產(chǎn)率高，但是純度會受到影響。鑒于每種分離方法都有其優(yōu)缺點，實驗可以根據(jù)樣本來源、下游實驗?zāi)康牡?，選擇合適的外泌體分離方法。2015年，國際囊泡組織(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出，簡單依靠一種分離方法得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都難滿足實驗的需求。因此，推薦聯(lián)合使用各種方法，從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多。南昌外泌體提取試劑廠家批發(fā)價

靜置10～15分鐘，留取沉淀物備用。長沙外泌體提取試劑推薦廠家

外泌體相關(guān)技術(shù)在過去幾年一直在快速發(fā)展，預(yù)計市場將大幅增長，因為它們可被應(yīng)用到液體活檢、精細醫(yī)學(xué)和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。特別是，一些疾病衍生的外泌體通過調(diào)節(jié)血管生成、轉(zhuǎn)移和免疫來影響細胞的侵襲性，使其成為用于一些疾病檢測、診斷和治病選擇的極其有用的生物標(biāo)志物來源。在風(fēng)險投資方面，有很多市場活動。2016年1月，ExosomeDiagnostics公司在B輪融資中獲得6000萬美元資金，并于2017年7月獲得3000萬美元的C輪融資。同樣，CodiakBiosciences公司于2016年由MDAnderson一些疾病中心與兩家風(fēng)險投資公司共同成立，以8000多萬美元的A和B輪融資成立該公司。2017年11月29日，CodiakBioSciences公司又增加了7650萬美元的C輪融資。在整個A、B和C輪融資中，CodiakBioSciences公司募集了驚人的1.685億美元。長沙外泌體提取試劑推薦廠家