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南京正規鼠尾膠原產品介紹

來源: 發布時間:2021-11-09

詳細步驟如下:1.75%酒精浸泡大鼠尾巴30min;2.將尾巴剪開、去掉皮毛,并剪成小段(3cm左右),抽出銀色的尾鍵;3.把剪碎的尾鍵置于150ml,0.1%消過毒的醋酸中,4℃放置,并不時振蕩;4.48h后取上清,4000轉離心30min后,取上清;5.分裝上清(鼠尾膠)4度(或-20度)保存。有時可繼續向4。中沉淀中加入10-20ml醋酸,重復以上步驟,以制備更多的鼠尾膠。在使用時,先將冰存的膠原液在室溫下解凍,再按以下步驟包被培養器皿:1)用吸管吸取膠原液,在無菌的培養器皿的生長面內壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液。2)若包被的是培養瓶,可向培養瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻。讓氨氣充入瓶內后,即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞。若為培養皿或板的話,可將培養皿或板放在已消毒的飯盒內,將浸有氨水的棉球放入飯盒內,蓋緊飯盒蓋,四周用封口膠封死。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無菌下制備,純度達到95%以上。南京正規鼠尾膠原產品介紹

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鼠尾膠原制備詳細步驟: 1、取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡 5 分鐘; 2.將尾巴剪開、去掉皮毛,并剪成小段,抽出銀色的尾鍵 3、將尾腱剪斷置于平皿中,PBS 浸泡; 4、將所有的尾鍵放于 Tris-HCl 中,4 度過夜。 0.05mol/L Tris-bas 的 Tris-HCl 的配制方法。 稱量 6gTris 置于 1L 燒杯中,加入約 800ml 去離子水,充分攪拌溶解,濃鹽酸調節 PH,高壓滅菌。 5、吸去 Tris-HCl,將尾腱稱重(0.5-1 克); 6、將尾腱置于平皿內剪碎,轉移至三角燒瓶中; 7、按每克尾腱 50ml 的比例,加入 0.1%醋酸溶液; 8、搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期; 9、離心,4 度 4000 轉/分,30 分鐘; 10、吸取上清,過 300 目濾器。 11、每 600ml 上述粗提液中加入 100ml 0.14 mol/LNaOH,8000 轉 5min 離心,棄上清,留絮狀沉淀。 12、將絮狀沉淀物置于三蒸水中,用 0.1mol/L(1000:6)醋酸溶解沉淀物。南京正規鼠尾膠原產品介紹制備鼠尾膠原:吸取上清,分裝成小瓶,4℃保存。

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鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等 步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養器皿,培養一些在普通細胞 培養器皿中不易貼壁的細胞。也可用于制備三維膠,模擬真實的生長環境, 使細胞在三維環境中生長。 1,在使用鼠膠原蛋白 型包被的細胞培養皿中檢查到PC-12 細胞的 貼壁和生長。 1mg/ml濃度以上,pH 左右時可形成具有一定強度的三維膠,檢查到 NIH-3T3 細胞在三維膠內正常生長、PC-12 細胞在三維膠表面 正常生長。 使用方法: 1、細胞培養器皿的表面包被 推薦濃度: 1-5ug/cm 0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應的培養器皿中。

鼠尾膠原蛋白的用途是什么:將尾巴從動物身體切除后,會冷凍起來,并提取尾巴里的筋腱。然后,將筋腱切成小塊,并在離心處理之前添加到由醋酸和水勾兌而成的混合物中。用這種方法,能將膠原蛋白從動物材料中分離出來。在食品加工領域,鼠尾膠原蛋白用于生產明膠并添加到布丁和棉花糖中。它還可以當作酸奶,冰淇淋,果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用。在一些低脂肪食品中,它用于模仿全脂食品的感覺和質地。它還用于生產膳食保健品,據說能讓手指甲和皮膚看起來更好。此外,還有基于膠原蛋白的保健品,可用于促進關節健康。將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡。

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鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養模式,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統的研究提供科學有效的方法。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養法培養人鼻腔纖毛上皮細胞,培養7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細胞形態和結構,應用高速攝像技術測量纖毛擺動頻率。結果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細胞呈不規則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細胞間為緊密連接;同一細胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的;同一來源體外培養的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的。結論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養模式的成功建立,為今后研究鼻內用藥對纖毛除去功能的影響提供了良好的方法和途徑。鼠尾膠原醋酸溶解:氯仿的量約為膠原溶液的10%。南京正規鼠尾膠原產品介紹

I型膠原蛋白分布非常普遍,是主纖維束的主要成分。南京正規鼠尾膠原產品介紹

鼠尾Ⅰ型膠原:材料與方法:1. 主要材料、試劑和儀器鼠尾、鹽酸、等滲氯化鈉溶液、鈣液、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司。日立高新TEM HT770(日本日立公司);多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈,用75%的乙醇浸泡5 min。將尾巴剪開,去掉皮毛,并剪成小段,抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中,用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡。吸去等滲氯化鈉溶液,將肌鍵置于平皿中剪碎,按每克肌鍵50 mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。搖晃,將肌鍵分散于醋酸溶液中,4 ℃放置一周,然后以2186×g離心20 min。在醋酸溶液的酸解下,肌腱水解成膠凍狀凝膠,置于冰箱4 ℃保存。南京正規鼠尾膠原產品介紹

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