鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質對角膜上皮細胞增殖的影響：目的探討鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質對體外培養角膜上皮細胞增殖的影響。方法采用鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質包被培養器皿,以普通培養器皿作對照,培養角膜上皮細胞,觀察細胞形態,進行細胞計數并描繪細胞生長曲線,比較不同基質對角膜上皮細胞的增殖作用。結果使用基質包被的培養器皿培養角膜上皮細胞,細胞增殖速度較普通組快,細胞形態、活力和長勢比普通組更佳,促進增殖的能力為鼠尾膠原多聚賴氨酸明膠。結論鼠尾膠原可促進角膜上皮細胞增殖,且增殖效果優于多聚賴氨酸和明膠。鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當的骨修復材料是治好骨缺損的中心環節。濟南鼠尾膠原產品介紹

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱，真空冷凍干燥備用； (2)凍干鼠尾腱經低溫凍干粉碎至200?400目； (3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹，鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL，期間不斷攪拌，防止凍結成塊，得到膠原溶脹液； (4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中，鼠尾腱與蛋白酶質量比為50: I?100: 1，在4°C，48?74小時酶解，期間間歇性攪拌。溫州鼠尾膠原廠家直銷制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。

鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養皿(實驗組)和普通培養皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2誘導。24 h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態,應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態,流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達。結果與結論:兩組培養皿中,隨著過氧化氫濃度的增高,均可見細胞凋亡狀態明顯加重,細胞存活率及細胞內過氧化氫活力明顯下降,細胞凋亡率及細胞內丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性。

鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代培養中的應用：在國外的藥理,毒理和皮膚病學的研究領域中已得到 的限翩,否則培養成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養層,提高了培養細胞的 材料和方法r1]實驗材料:培養液DEIdE(G皿}ao),表皮細胞生長因子(EGF Sigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰 蛋白酶,]~DTA,細胞培養皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細胞的分離和細胞 懸液的制備:2～3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下 皮膚后.以 消化12h.輕刷表皮面,收集細胞懸液,加入細胞培養液. 用梯度離心收集細胞,以3xi0/m]濃度接種平 皿.(3)鼠尾膠原 凝膠體的制備:具體方法參見文獻c13o(4)培養皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴 入~35mm培養皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中 30rain,散盡剩余氨氣。結論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁。

鼠尾膠原包被培養板：胎干細胞在體外可誘導分化為血管內皮細胞,進而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細胞來源之一。目的:探討建立定向誘導人胚胎干細胞向血管內皮細胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纖維細胞飼養層上培養人胚胎干細胞H1,將H1細胞團塊轉移到鼠尾膠原包被的培養板,貼壁24-48h后,培養基換為含不同輔助因子和內皮細胞生長添加劑的EGM-2內皮細胞培養基。結果與結論:①在EGM-2內皮細胞培養基誘導下,細胞逐步表達內皮細胞特異性標記基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化細胞表達內皮細胞特異性標記VE-cadherin、CD31。③分化細胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。說明將人胚胎干細胞接種在鼠尾膠原包被培養板上,通過EGM-2內皮培養體系誘導,可直接分化為功能性血管內皮細胞。為研究胞外基質對誘導胚胎干細胞血管內皮細胞分化的作用以及相關信號分子機制打下了基礎。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。鼠尾膠原是一種天然培養基，它具有促進體外培養細胞（特別是上皮細胞）貼壁的作用。鄭州鼠尾膠原哪里買

使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。濟南鼠尾膠原產品介紹

三維膠原的制備：鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH 7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。需要的溶液 ( 均需要 無菌 、 預冷 ):10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水A．不含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。濟南鼠尾膠原產品介紹