鼠尾膠原蛋白：膠原蛋白（Collagen）是結締組織和內臟部位外基質的主要成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布較為普遍。膠原蛋白在結構和遺傳學上被分為不同類型，I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體，在37℃中性條件下可形成3股螺旋結構，被普遍用于多種細胞的培養基質，如肝細胞、纖維細胞、脊髓神經節、雪旺氏細胞等。另外，I型膠原蛋白在細胞生長、分化、遷移和組織形態的發生等方面也具有重要應用。膠原蛋白I（rat tail tendon collagen type I）根據Birkedal-Hansen方法，經過醋酸（HAc）抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備所得，可用于制備三維膠，模擬細胞真實的生長環境；也可以用于包被組織培養皿表面，提高細胞表面粘附性，比如培養角質形成細胞、肝細胞等原代細胞。開蓋在超凈臺上過夜晾干，也可以在室溫放置1小時后。蕪湖鄭州鼠尾膠原

膠原蛋白分離提純實驗方案：提取鼠尾膠原蛋白的實驗步驟： 1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對初步處理的鼠尾腱進行 酶解， 持續一段時間待混合物變成無色、 透明、 粘稠液體后即可在 4℃， 5000g 的離心力下離心 20min， 收集上清即為粗制鼠尾膠原蛋白原液。 2、將一定濃度的氯化鈉溶液加入其中，持續攪拌直至白色絮狀沉淀 從溶液中析出，繼續加入氯化銨直至沉淀不在析出為止，4℃，5000g 的離心力下離心 20min 后獲得白色沉淀。 沉淀物加入一定濃度的醋酸 溶液中溶解。 3、將溶解后的鼠尾膠原蛋白溶液繼續反復進行鹽析處理，重復步驟 2 的過程 2~4 次。 _x000c_鼠尾膠原蛋白經 SDS- PAGE 蛋白質電泳。北京鼠尾膠原進貨價鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當的骨修復材料是治好骨缺損的中心環節。

實驗應用：鼠尾膠原在原代培養耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用。目的：建立利用自制的鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。結果：自制的鼠尾膠原能正常地培養出大鼠耳蝸邊緣細胞，細胞角蛋白18表達陽性，免疫組織化學結果和掃描電鏡證實所培養的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征。結論：成功建立了利用自制鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法，并且制作簡便,成本低廉。

具體實施方式實施例1 止血材料的制備1、選擇能與鼠尾膠原蛋白聯合發揮作用的聚乙烯醇、殼聚糖作為輔料。各個材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為 0.2% 0.2%。余量為水。2、將混合材料用無菌水溶解后澆入培養小板，-40°C預凍池，再轉入_80°C超低溫冰箱急凍4h，再轉入真空冷凍干燥機中將復合材料在-4°C下冷凍干燥10h，即可以得到復合型凍干止血材料。Co60輻射滅菌，干燥保存。凍干的材料可直接用于各種傷口的止血。實施例2 止血材料的制備1、選擇能與鼠尾膠原蛋白聯合發揮作用的聚乙烯醇、殼聚糖作為輔料。各個材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為5% 2% 1%，余量為水。2、將混合材料用無菌水溶解后澆入培養板，-20°C預凍，再轉入_80°C超低溫冰箱急凍8h，再轉入真空冷凍干燥機中將復合材料在-4°C下冷凍干燥30h，即可以得到復合型凍干止血材料。Co60輻射滅菌，干燥保存。鼠尾膠原是一種天然培養基，它具有促進體外培養細胞（特別是上皮細胞）貼壁的作用。

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1M NaOH。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4）在無菌條件下執行以下步驟。4.1加入10×PBS（終體積/10）mL4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積（不要添加到管中直到步驟4.6為止）終體積x終膠原蛋白I濃度（mg/mL）。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的膠原體積×0.023）mL的無菌冰冷1M NaOH。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水：添加蒸餾水體積=V（終）—V（膠原蛋白）—V(10× PBS）—V（1M NaOH）4.5混合管中的物質并放入冰中。4.6加入膠原蛋白I并計算體積，混勻，冰上備用。5）膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時。6）使用時，無菌條件下將溶液加入到細胞培養裝置中37°C凝膠30min。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）。貴陽正規鼠尾膠原哪家好

鼠尾膠原，是一種細胞支持物，它是細胞外基質的主要成份。蕪湖鄭州鼠尾膠原

膠原蛋白（Collagen）是結締組織和內臟部位外基質的主要成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布*為普遍。膠原蛋白在結構和遺傳學上被分為不同類型，I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體，在37℃中性條件下可形成3股螺旋結構，被普遍用于多種細胞的培養基質，如肝細胞、纖維細胞、脊髓神經節、雪旺氏細胞等。另外，I型膠原蛋白在細胞生長、分化、遷移和組織態的發生等方面也具有重要應用。注意事項：1） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。2） 整個操作請于冰上進行，因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠。3） 整個操作請在無菌環境下無菌操作，避免污染以影響細胞生長。蕪湖鄭州鼠尾膠原

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