工作原理:通常基于圖像分析技術,通過光學系統對細胞懸液樣本進行拍照,然后利用機器學習或人工智能算法對圖像中的細胞進行識別和計數。部分儀器還可結合熒光染色技術,對特定標記的細胞進行檢測和分析。特點:準確性高:采用先進的算法和光學系統,能精確識別細胞,減少人為計數誤差,如賽默飛 Countess 3 自動細胞計數儀利用機器學習算法,可準確計數成團細胞并忽略碎片。自動化程度高:具備自動聚焦、自動調節光強度、自動上樣等功能,只需將樣品準備好放入儀器,即可快速得出計數結果,無需繁瑣的手動操作。速度快:可在短時間內完成細胞計數,如 CCEasy 全自動高通量細胞計數分析儀能在 1 分鐘內完成單個樣品的制備及檢測。功能多樣:除了基本的細胞計數,還能進行活細胞與死細胞區分、細胞活力分析、細胞大小測量、細胞形態分析等,部分儀器支持多通道熒光檢測,滿足不同實驗需求。數據管理方便:可自動保存數據,并支持多種格式輸出,還能通過網絡將數據傳輸到電腦或云端,便于數據的存儲、分析和共享。血液、組織勻漿等復雜樣本:選擇帶雜質過濾功能的計數儀(如配備熒光通道排除細胞碎片);科研高靈敏多色熒光成像細胞計數儀功能

手工計數(血細胞計數板法)是傳統的細胞計數基準,可直接驗證自動計數儀的準確性。操作步驟:取同一份細胞懸液,按自動計數儀標準流程計數(重復 3 次,取平均值)。同時用血細胞計數板手工計數:取 10μL 細胞懸液(或染色后的混合液)滴加至計數板計數室,顯微鏡下計數 4 個角 + 中心共 5 個大方格的細胞數。計算濃度:濃度(個 /mL)=(5 個方格總細胞數 ÷5)×10?× 稀釋倍數。比較兩種方法的結果:若偏差在10%-15% 以內,說明自動計數儀準確性可接受;若偏差過大(如 > 20%),需排查自動計數儀的參數設置(如細胞大小閾值、是否排除團塊)或手工計數是否有誤(如漏數、計數區域錯誤)。科研Countstar細胞計數儀直銷價藥物毒性評估:通過活性率變化判斷藥物對細胞的殺傷作用(如化療藥物 IC50 測定)。

樣本制備關鍵細胞懸液均勻性:細胞團會導致計數偏高(算法可能將團塊誤判為單個細胞),需充分吹打或過濾(用 40-70μm 細胞篩)。染色時間:臺盼藍染色超過 5 分鐘可能導致活細胞被染色,影響活率計算,需嚴格控制時間。濃度適配:濃度過低(<1×10?個 /mL)會導致計數誤差大,可減少稀釋倍數;濃度過高(>1×10?個 /mL)會導致細胞重疊,需增加稀釋倍數。2. 儀器與耗材維護計數板清潔:重復使用的計數板需用無水乙醇或 75% 酒精擦拭,避免殘留細胞或染料影響下次計數;禁止用硬物刮擦計數池。鏡頭保護:若圖像模糊,用鏡頭紙輕輕擦拭鏡頭,勿用酒精或其他試劑。定期校準:按儀器說明書定期校準(如用標準微球溶液),確保計數準確性。3. 結果驗證若對結果存疑,可通過顯微鏡手動計數(血細胞計數板)進行比對。同一樣本多次計數(3 次以上),取平均值以減少誤差。
上樣與計數操作1. 上樣用 10μL 移液器吸取染色后的混合液,緩慢滴加到計數板的計數池中(避免產生氣泡,若有氣泡需重新上樣)。確保液體充滿計數池但不溢出(計數池容量通常為 10μL 左右,具體看耗材規格),放置 1-2 分鐘讓細胞沉降。2. 儀器計數將計數板放入儀器的樣品槽,調整位置使鏡頭對準計數池。打開計數軟件,選擇參數:細胞類型(如 “動物細胞”“酵母”,儀器會根據大小閾值識別);稀釋倍數(輸入之前的稀釋比例,如 2 倍);計數區域(部分儀器可選擇全視野或特定區域)。點擊 “計數” 按鈕,儀器自動拍攝圖像并分析:識別活細胞(透明、形態完整)和死細胞(藍色),排除雜質和細胞團。30 秒內生成結果:細胞總數、活細胞數、死細胞數、活細胞率(活細胞數 / 總細胞數 ×100%)、濃度(個 /μL 或個 /mL)。全自動血細胞計數儀是常用設備,可對血液中的紅細胞、白細胞和血小板進行快速準確的計數和分類。

數據記錄與驗證保存計數結果(支持 Excel 或 PDF 導出),記錄關鍵參數:濃度、活率、稀釋倍數。重復計數:同一樣本建議計數 3 次,取平均值(減少隨機誤差)。結果異常處理:若多次計數差異大,需檢查細胞懸液是否混勻,或重新制備樣本。實驗后處理一次性計數板直接按生物廢棄物處理;可重復計數板用 75% 酒精沖洗后晾干,避光保存。關閉儀器電源,清理臺面,染液回收至廢液桶。關鍵提示細胞均勻性:吹打細胞時動作輕柔,避免產生氣泡或損傷細胞。染色時間:臺盼藍染色超過 5 分鐘會導致活細胞著色,務必嚴格控制。濃度適配:若細胞濃度低于 1×10?個 /mL,建議離心濃縮后再計數(避免誤差過大)。如使用臺盼藍染色,可區分活細胞和死細胞,活細胞不著色,死細胞被染成藍色。蘇州高速自動化系統細胞計數儀微量檢測
干細胞分化監測:區分未分化干細胞(圓形、尺寸均一)與分化后細胞(形態多樣、尺寸差異大)。科研高靈敏多色熒光成像細胞計數儀功能
全自動細胞計數儀的檢測精度因儀器型號和技術原理而異,通常其變異系數(CV值)可低至5%左右,計數準確率能達到95%以上。具體如下:基于圖像分析技術的計數儀:如賽默飛Countess3FL全自動細胞計數儀,利用機器學習算法對細胞進行識別和計數,可清晰地識別成團細胞內的細胞邊界并忽略碎片,其計數結果的誤差范圍小于手動計數。莫納生物AutoCell全自動細胞計數儀采用智能圖像識別分析算法,每個樣品采樣5個視野并自動計算平均值,計數結果擬合R2值大于0.999。基于庫爾特原理的計數儀:如OrfloMoxiZ全自動細胞計數儀,結合庫爾特原理和**薄膜傳感器技術,可對多種細胞類型進行準確計數,計數準確率高于95%,并且能在8秒內完成計數。科研高靈敏多色熒光成像細胞計數儀功能