熒光定量 PCR 儀作為分子生物學設備，其原理是在 PCR 擴增過程中，通過光學系統實時捕獲熒光信號的動態變化。與傳統終點 PCR 能判斷靶標有無不同，該設備可記錄每個擴增循環的熒光強度，形成特征性擴增曲線，結合閾值設定與數據分析算法，實現對核酸靶標的精細定量。其精細性源于雙重保障：一是熒光信號與擴增產物量的線性關聯，確保信號強度真實反映靶標濃度；二是特異性引物與熒光探針的協同作用，避免非特異性擴增干擾。該功能廣泛應用于臨床病原體載量檢測（如、乙肝病毒）、基因表達量分析、轉基因作物定量檢測等場景，為疾病診斷、科研探索提供量化數據支撐，是分子診斷領域不可或缺的工具。熒光定量 PCR 儀重要功能包括準確溫控模塊、多通道熒光檢測系統及數據分析軟件。南京FAM熒光定量PCR儀功能

JOE 熒光定量 PCR 儀的動態范圍達 101-10?拷貝，覆蓋了大多數基因表達檢測的濃度范圍，其通過優化 PCR 反應的引物設計、酶濃度和反應緩沖液配方，確保在高拷貝（10?）和低拷貝（101）靶標同時存在時，均能實現高效擴增，避免了高拷貝樣本對低拷貝樣本的抑制效應。在基因表達相對定量中，該儀器適配的 JOE 標記管家基因探針（如 DH、β-actin）可作為內參，通過 JOE 通道的熒光信號標準化目的基因（如 FAM 標記的標志物基因）的表達水平，消除樣本處理、核酸提取效率差異帶來的誤差。例如在肺患者組織中 EGFR 基因表達定量中，該儀器可通過 JOE 通道檢測 DH 的表達，計算 EGFR 與 DH 的熒光信號比值，實現不同患者間 EGFR 表達水平的橫向對比。實驗表明，該儀器在動態范圍內的線性相關系數（R2）>0.999，擴增效率在 90%-110% 之間，滿足實時熒光定量 PCR 的 MIQE（Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments）指南要求。南京FAM熒光定量PCR儀功能熒光定量 PCR 儀具備熔解曲線分析功能，輔助判斷擴增產物特異性。

JOE 熒光定量 PCR 儀以 548nm 為特征發射波長，該波長可避開植物樣本中葉綠素（主要吸收 400-500nm 藍光）和類胡蘿卜素（吸收 450-550nm 綠光）的熒光干擾峰，解決了傳統 PCR 儀在植物樣本檢測中背景信號過高的問題。其適配的植物病毒檢測 JOE 探針，針對植物病毒基因組的保守區域設計，具有高特異性，可有效區分同源性高達 95% 的不同病毒株系。例如在番茄黃化曲葉病毒（TYLCV）檢測中，該儀器可通過檢測番茄葉片提取的核酸樣本，在含有大量葉綠素的情況下，仍能精細捕捉到 JOE 探針的熒光信號，檢測靈敏度可達 100 拷貝 /μL，且無假陽性結果。此外，該儀器針對植物樣本核酸提取中可能存在的 PCR 抑制劑（如多糖、酚類物質），優化了熱啟動酶的抗抑制能力，確保反應體系在抑制劑濃度 < 0.5mg/mL 時仍能正常擴增，擴大了其在植物分子檢測領域的應用范圍。

熒光熒光定量 PCR 儀的高靈敏度源于其優化的熒光檢測系統：采用高量子效率的 CCD 檢測器或光電倍增管，可捕捉單個熒光分子發出的信號；同時通過窄帶濾光片減少背景光干擾，基線噪聲控制在 0.1 熒光單位以下，確保微弱信號可被有效識別。該特性使其比較低檢測限可達 “單拷貝靶核酸”，能精細檢測低豐度樣本 —— 例如循環 DNA（ctDNA）檢測中，ctDNA 在血液中含量為 1-100 拷貝 /mL，傳統檢測方法易漏檢，而該儀器可通過多次循環擴增放大信號，準確捕捉 ctDNA 熒光信號，為早期診斷提供可能。在病原體早期檢測中也發揮關鍵作用，如病毒（HIV）窗口期，患者體內病毒載量極低，儀器可通過高靈敏度檢測提前 1-2 周檢出陽性，縮短窗口期漏檢風險。此外，儀器還通過 “陰性對照設置”“重復檢測驗證” 等機制，進一步確保低豐度樣本檢測結果的可靠性，避免假陰性誤判。可通過 FAM 熒光信號定量分析外源基因插入拷貝數，滿足農產品質量檢測標準。

熒光定量 PCR 儀的自動化功能是實驗室高效運轉的關鍵支撐，其重要在于整合全流程自動化模塊，覆蓋從樣本加載到結果輸出的全環節。硬件上，設備配備自動進樣器（可兼容 96 孔 / 384 孔反應板），支持批量樣本自動裝載，無需人工逐孔添加；樣本條碼識別系統可關聯樣本信息與檢測數據，避免樣本混淆；反應結束后，嵌入式軟件自動完成數據分析、結果判讀，并生成標準化報告，可直接導出至實驗室信息系統（LIS）。自動化設計的優勢明顯：一是減少人為操作誤差（如加樣偏差、數據記錄錯誤），提升結果重復性；二是解放人力，單臺設備可同時處理多批次樣本，在大規模核酸篩查、臨床批量檢測場景中，能將日均檢測量提升 3-5 倍；三是降低生物安全風險，通過密閉式樣本處理，減少操作人員與病原體的接觸。例如在大規模篩查中，自動化熒光定量 PCR 儀可實現 24 小時不間斷運行，為快速排查者提供關鍵保障。并且，TET 染料具有較高的熒光量子產率，即在受到激發后能夠高效地發出熒光。南京FAM熒光定量PCR儀功能

熒光熒光定量 PCR 儀的多通道設計可同時檢測多種熒光染料，實現單管多重檢測，提高實驗效率。南京FAM熒光定量PCR儀功能

FAM 熒光定量 PCR 儀是轉基因作物檢測的重要設備，其重要應用是通過 FAM 熒光信號定量分析外源基因插入拷貝數，滿足農產品質量監管需求。檢測原理為：針對轉基因作物中的外源基因（如抗除草劑基因 EPSPS、抗蟲基因 Cry1Ab）設計 FAM 標記探針，同時針對作物自身管家基因（如 Actin、UBQ）設計另一熒光標記探針（如 VIC）作為內參；PCR 擴增中，FAM 信號強度反映外源基因含量，內參信號用于校正樣本 DNA 提取量差異，通過兩者信號比值可計算外源基因的插入拷貝數。例如在轉基因大豆檢測中，若 FAM 與內參信號比值為 1:1，說明外源基因單拷貝插入；比值為 2:1 則為雙拷貝插入。該檢測符合國際通用標準（如 ISO 21572），可精細定量外源基因含量，例如中國規定轉基因作物中外源基因含量超過 0.9% 需強制標識，儀器可通過定量分析判斷是否達到標識閾值。在農產品進出口檢測中，該儀器可快速篩查轉基因成分，避免不符合進口國法規的產品流入市場，同時保障種子純度，防止轉基因種子混雜影響非轉基因作物種植。南京FAM熒光定量PCR儀功能