所有反應孔背景信號好、Ct值都在19～25之間，熒光擴增曲線呈典型的S型，說明本發(fā)明實例1提供的血液樣本快速提取法用于熒光PCR擴增的方法具有較好的可行性。將四份不同來源不同的人血液樣本進行熒光PCR擴增檢測，每份樣本平行三次，結果分別如圖2、圖3、圖4、圖5所示，由圖可見，每個樣本的平行實驗，其曲線的Ct值很接近且≤25。說明本發(fā)明實例提供的血液樣本快速提取法用于熒光PCR擴增的方法有可靠的重復性以及較好的均一性。實施例2與市場現有的血液基因組提取試劑盒產品對比。本發(fā)明的具體步驟如下：將**管顛倒混勻后，吸取100μL血液至，加入200μL的核酸釋放劑（20mM～80mM的氫氧化鈉溶液、～、～、～、～***鈉、～3%甲酰胺），渦旋混勻，然后5000g離心30s，棄上清，獲得細胞沉淀；然后再加入200μL核酸釋放劑，渦旋1min至沉淀完全散開，5000g離心30s，棄上清；向細胞沉淀中加入50μL核酸釋放劑，渦旋振蕩1min，室溫放置5min，12000g離心30s，取上清液即為提取的血液基因組DNA；取上清液3μL，加入到配制好的熒光PCR反應液，于ABI7500熒光PCR儀中進行擴增。選用某公司的血液基因組提取試劑盒作為方法比對，具體操作過程：將取血管顛倒混勻數次，吸取200μL血液于。口腔拭子如果在使用的過程中出現過敏現象，請立即停止使用，嚴重時請及時就醫(yī)。浙江口腔口腔拭子供應商

    深圳市華晨陽科技有限公司為中國香港晨陽國際集團旗下企業(yè),本工廠專業(yè)生產經營：醫(yī)療器械（TOC取樣拭子、***采樣試子、DNA采樣拭子、宮頸采樣試子、咽喉采樣試子、鼻腔采樣拭子、婦女***采樣刷、細胞保存液、細胞培養(yǎng)基、液基保存液、皮膚外用涂藥器、微生物取樣捧、陰道沖洗器.）工業(yè)凈化產品：（無塵布、擦拭布/紙、凈化棉簽等）；電子產品。通過ISO9001，ISO14001，ISO13485，CE，CFDA認證產品應用于：微生物，制藥，醫(yī)療器材，食品，微電子，光學，光電，磁盤，硬盤，半導體，晶圓，機電，實驗室，研究所，汽車造船工業(yè)，航空航天領域等各個行業(yè)，覆蓋范圍廣，主要產品有：無塵擦拭布、紙，無塵靜電防護手套，清潔凈化無塵棉簽各種型號，***粘塵滾筒粘塵墊，防靜電工作服套件，防靜電包裝袋，無紡布口罩、衣服、帽子、鞋套，清潔卡套件，除靜電設備及凈化設備工程等。代理日本WTR各種規(guī)格指套，美國Kimberly-ClarkKimtechPure各種擦拭布/紙，防護產品，日本東麗TORAYSEEMKMC 各種清潔抹布，savinaminimax無塵布，日本OZU&BEMCOT各種無塵擦拭紙，3M各種防護口罩，日本三洋HUBY-340系列無塵棉簽，RubyStick系列凈化棉簽，FOAMTEC系列無菌棉簽。江西泡沫口腔拭子批發(fā)廠這款口腔拭子還針對不同的標本類型選用了不同的培養(yǎng)基（細菌、BINGDU、支原體、衣原體）。

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    本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領域，涉及一種常溫下長時間口腔拭子DNA保存和提取方法。背景技術：近年來，采用口腔拭子進行DNA檢驗有逐漸增多的趨勢，由于國內沒有專門用于采集口腔脫落細胞的工具，而只是使用普通的醫(yī)用棉簽，而不同的人采集口腔脫落細胞在擦拭次數、力度、檢材剪取量及擴增用的模板量上都存在一定差異，導致了口腔拭子的DNA常溫下保存效果不大穩(wěn)定，影響了口腔拭子在DNA常溫下保存中的應用。

為規(guī)范口腔拭子DNA的采集，提高口腔拭子的DNA保存效率，亟需一種常溫下長時間口腔拭子DNA保存和提取方法。

口腔拭子的絨毛質地可采集更多目標分析物。

    加入20μteinaseK溶液，混勻。加入200μL緩沖液GB，充分顛倒混勻，在56℃放置14min（期間顛倒混合樣品數次），溶液應變清亮，若未完全變清亮，延長裂解時間至完全變清亮。加人200μL無水乙醇，充分振蕩混勻10s，此時可能會出現絮狀沉淀。將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm離心30s，倒掉廢液，將吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD（已加入無水乙醇），12,000rpm離心30s，棄廢液，將吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW（已加入無水乙醇），12,000rpm離心30s，棄廢液，將吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm（~13，400×g）離心2min。將吸附柱放置新的，以徹底晾干吸附柱中殘余的漂洗液。向吸附柱中懸空滴加50～200μL洗脫緩沖液，室溫放置2～5分鐘，12,000rpm（~13，400×g）離心2min，將溶液收集到離心管中，測定濃度及純度后，取3μL，加入到配制好的熒光PCR反應液，于ABI7500熒光PCR儀中進行擴增。用本發(fā)明和對照產品對8份樣本同時進行熒光PCR擴增。結果如圖6，本發(fā)明所有反應孔背景信號好、Ct值都在21～25之間，熒光擴增曲線呈典型的S型。口腔拭子是海綿口腔拭子。云南口腔口腔拭子供應商家

口腔拭子適用于采集任何年齡段人群的DNA樣本。浙江口腔口腔拭子供應商

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