RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國(guó)紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）開(kāi)發(fā)出來(lái)的，RPMI是該研究所開(kāi)發(fā)的一類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號(hào)。

我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營(yíng)養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會(huì)自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。Alanyl-glutamine，Ala-Glu），又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽，是一種高級(jí)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑，可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營(yíng)養(yǎng)素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對(duì)細(xì)胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定，不會(huì)自發(fā)的降解。細(xì)胞利用其機(jī)制是：在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞會(huì)逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細(xì)胞會(huì)將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用。 MCDB是為特定細(xì)胞設(shè)計(jì)的低蛋白和無(wú)血清培養(yǎng)的培養(yǎng)基。吉林DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠

    培養(yǎng)液的滲透壓是一個(gè)非常重要的因素,細(xì)胞通常可耐受260mOsm/kg～320mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動(dòng)。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會(huì)明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓，特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES時(shí)需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細(xì)胞所需pH在-。但是，細(xì)胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類(lèi)不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2體系進(jìn)行緩沖，因此，氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5％，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為；如果CO2濃度維持在10％，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液，在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下，細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色。吉林DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠高糖 DMEM 適合生長(zhǎng)快、粘附低的細(xì)胞，如腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng) 。

干細(xì)胞研究同樣與 DMEM 培養(yǎng)基緊密相連。DMEM 培養(yǎng)基能夠?yàn)楦杉?xì)胞群體的維持和擴(kuò)增提供適宜環(huán)境。以胚胎干細(xì)胞為例，高糖型 DMEM 培養(yǎng)基憑借充足的能量供應(yīng)，助力胚胎干細(xì)胞保持良好的生長(zhǎng)狀態(tài)，維持其多能性。在誘導(dǎo)干細(xì)胞分化為特定細(xì)胞類(lèi)型時(shí)，科研人員可根據(jù)需求對(duì) DMEM 培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化，添加特定的生長(zhǎng)因子等成分，引導(dǎo)干細(xì)胞向目標(biāo)細(xì)胞分化。比如，在神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元細(xì)胞分化的研究中，通過(guò)調(diào)整 DMEM 培養(yǎng)基成分，促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的分化進(jìn)程，為神經(jīng)再生醫(yī)學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。

DMEM 培養(yǎng)基在細(xì)胞毒性測(cè)試中發(fā)揮著重要作用。在評(píng)估藥物、化合物或化妝品對(duì)細(xì)胞的毒性影響時(shí)，將細(xì)胞置于 DMEM 培養(yǎng)基中，再加入待測(cè)試物質(zhì)。科研人員通過(guò)觀察細(xì)胞在含測(cè)試物質(zhì)的 DMEM 培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)狀態(tài)、形態(tài)變化、增殖能力以及細(xì)胞死亡情況等指標(biāo)，判斷測(cè)試物質(zhì)的細(xì)胞毒性強(qiáng)弱。比如，在新藥研發(fā)初期，利用 DMEM 培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞毒性測(cè)試，可初步篩選出細(xì)胞毒性較低的藥物候選物，減少后期研發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，為新藥研發(fā)的安全性提供重要保障。DMEM 培養(yǎng)基擁有多種配方，低葡萄糖濃度（1g/L）的配方，溫柔呵護(hù)對(duì)高糖敏感的細(xì)胞。

    1.細(xì)胞培養(yǎng)基的種類(lèi)按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類(lèi)。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份，參與細(xì)胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養(yǎng)；后者緩沖能力較強(qiáng)，適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來(lái)自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類(lèi)培養(yǎng)基，如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點(diǎn)是營(yíng)養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果良好，但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜，來(lái)源受限且制作過(guò)程復(fù)雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類(lèi)物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。即開(kāi)即用液體配方，DMEM/F12節(jié)省配制時(shí)間，提升實(shí)驗(yàn)效率。云南細(xì)胞培養(yǎng)基廠家

添加HEPES的培養(yǎng)基能較長(zhǎng)時(shí)間保持恒定的PH范圍，可有效的防止培養(yǎng)液PH波動(dòng)較大對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響。吉林DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠

    Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成，代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)，同時(shí)，用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成，有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定，適合用于非CO2平衡環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細(xì)胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代（如胚胎和成人組織）細(xì)胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營(yíng)養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會(huì)自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。 吉林DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠

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