技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用,采用該構(gòu)建方法可以得到視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,該模型可表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性性疾病特征,該模型可用于視網(wǎng)膜色素變性性疾病的研究,可以幫助闡明rp的發(fā)病過程及機(jī)制,并為該疾病的或預(yù)防提供新的靶標(biāo)。本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的:方面,本發(fā)明實施例提供了一種利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法,其包括:敲除目標(biāo)動物視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中的基因組中的gm20541基因。znf124是一種編碼鋅指蛋白的新基因。鋅指蛋白是一類具有手指狀結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子,對基因調(diào)控起重要的作用。znf124蛋白可穿過核孔進(jìn)入核內(nèi),作為轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控其他基因的表達(dá)。目前針對znf124蛋白功能的研究報道并不多,對其功能也知之甚少,znf124與一種先天性系統(tǒng)發(fā)育疾病dandy-walker復(fù)合征(dandy-walkercomplex,dwc)相關(guān)。此外,znf124被認(rèn)為參與了前體生長因子(vegf)對人造血細(xì)胞凋亡的抑制作用,表明znf124在人體生命活動中承擔(dān)有重要功能。發(fā)明人的另一研究表明,znf124基因突變與rp有關(guān),對探索rp的致病機(jī)制有極大幫助。因此,深入研究znf124對視網(wǎng)膜色素變性疾病的及病因探討潛力巨大。IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見的原發(fā)性腎小球疾病,約占原發(fā)性腎小球疾病的 1/3。湖南豚鼠動物模型建模

堿燒傷致角膜損傷大鼠模型一、服務(wù)信息1、動物模型名稱:堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環(huán)境:SPF級二、服務(wù)項目服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價錢DH2020堿燒傷致角膜損傷大鼠模型1周詢價1、實驗方法:氫氧化鈉致大鼠角膜化學(xué)性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去結(jié)膜囊多余液體,將統(tǒng)一規(guī)格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過多的堿液,將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜90s后移去,立即用滅菌水沖洗結(jié)膜囊及角膜2min。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。三、交付標(biāo)準(zhǔn):1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。湖南C57動物模型構(gòu)建由于卵巢早衰的病因多種多樣,如自身免疫功能異常、遺傳因素、代謝因素、化療、放療及等。

實驗樣本分類實驗一般采取樣本有:血液樣本、組織樣本和細(xì)胞樣本。通常,組織樣本采集后,應(yīng)立即用等滲溶液(PBS或生理鹽水)盡量把血液漂洗干凈(除非血液也是分析對象),用濾紙或紗布吸干,把樣本分切成幾分,每份的體積約2個黃豆大小,每份用一個管子裝。血液樣本的采集應(yīng)根據(jù)不同實驗的要求,將會采取不同策略。血清樣本:全血中不加抗凝劑,血液凝固后取出的不含凝血因子的淡黃色透明液體。(全血標(biāo)本室溫放置2小時3000rpm/min離心15min)血漿樣本:全血中加抗凝劑,血液凝固后取出的含凝血因子的淡黃色透明液體。(可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,3000rpm/min離心15min)如果是做生化\ELISA等檢測可以考慮血漿和血清,根據(jù)獲得的樣本量可考慮分裝成100-500μl/管,可避免反復(fù)凍融造成的檢測誤差。生化:建議優(yōu)先選擇血清,其次選擇肝素抗凝血漿;ELISA:建議優(yōu)先選擇血清,其次選擇肝素或EDTA抗凝血漿;凝血實驗:只能選擇枸櫞酸鈉抗凝血漿;血常規(guī):只能選擇EDTA抗凝全血;如果要收集其中的白細(xì)胞、血小板等建議用抗凝全血。如果要做流式建議用專門的流式用血液收集管,防止表面抗原的丟失,或者盡快安排就近檢測。樣本處理取樣完后。
然后再入固定液,但要注意防止組織損傷。要熟悉采集部位。要能準(zhǔn)確的按解剖部位采集,如胰腺,一般取胰島較多的胰腺尾部;肺應(yīng)取有細(xì)支氣管及帶有軟骨片的小支氣管部。如果實驗需進(jìn)行多組織樣本的采集,采集順序應(yīng)按照:消化,神經(jīng)系統(tǒng),皮膚,肌肉等的順序進(jìn)行。選好組織塊的切面。熟悉某些組織成分安排,然后決定其切面的走向;如一長管狀以橫切面較好。切除不需要的部分。特別是組織周圍的脂肪等,應(yīng)盡可能掉,否則給固定、脫水、浸蠟、切片等帶來一些不必要的問題。組織樣品的固定(1)固定的方法:①小塊組織固定法:從動物取下的小塊組織,立即置入液態(tài)固定劑(這是應(yīng)用經(jīng)常的方法)。②注射/灌注固定法:某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內(nèi)部或需要對整個臟器或整個動物進(jìn)行固定,這時宜采用注射固定法,將固定液注入血管,經(jīng)血管分支到達(dá)整個組織和全身,從而得到充分的固定。另,空腔組織比如肺,肺內(nèi)含有空氣,固定液難以滲入,建議先做肺灌注,使得肺充盈滿固定液以后再進(jìn)行保存,如果空腔中氣體沒有有效排出,后續(xù)可能影響固定效果(沒有灌注的肺組織會浮在液體表面不利于固定,切片以后也會看到很多的空泡)。③蒸汽固定法:比較細(xì)小而薄的標(biāo)本。APOE-/-鼠左頸動脈結(jié)扎糖尿病模型。

所用儀器為bio-rad的化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)。結(jié)果見圖1中c和d,可以看出,通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達(dá)。實施例2本實施例以小鼠為目標(biāo)動物,對本發(fā)明提供的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的構(gòu)建方法進(jìn)行說明,gm20541基因敲除的路線如圖2所示,具體操作如下:基因敲除小鼠獲取步驟:1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達(dá)框、有neo抗性基因的表達(dá)框、兩端有同向排列l(wèi)oxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子;2利用dna同源重組技術(shù)將gm20541基因中的第3個外顯子替換,得到gm20541基因條件性敲除的小鼠胚胎干細(xì)胞;3利用步驟2得到的胚胎干細(xì)胞制備得到含gm20541基因敲除細(xì)胞的嵌合體小鼠(圖2);4將步驟3得到的嵌合體小鼠和野生型小鼠交配繁育,在后代中篩選出gm20541基因敲除的雜合子小鼠(圖2)。鑒定:實施例2中長距離pcr鑒定陽性子一代鼠的實驗結(jié)果,擴(kuò)增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴(kuò)增產(chǎn)物為。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’;sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。結(jié)果見圖3中a。大鼠面癱模型的建立。寧夏乳鼠動物模型手術(shù)
通過博來霉素誘導(dǎo)的肺炎樣癥狀及肺纖維化癥狀模型為研究ALL的有效措施提供理想的動物模型。湖南豚鼠動物模型建模
動物疾病模型在人類重大疾病研究和新藥創(chuàng)制等方面具有不可替代的重要作用和價值。與自發(fā)性疾病動物模型和環(huán)境誘導(dǎo)、物理因素、藥物誘導(dǎo)的疾病動物模型相比,手術(shù)模型操作復(fù)雜、技術(shù)門檻高,因此也存在相應(yīng)的一些問題,如缺乏標(biāo)準(zhǔn)化流程、穩(wěn)定性差、實驗室之間數(shù)據(jù)可比性較差。即便是同一個實驗室,重復(fù)性也是一個很大的挑戰(zhàn)。所以實現(xiàn)手術(shù)疾病模型的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化和重復(fù)性仍然是該領(lǐng)域長期的目標(biāo)。針對這一現(xiàn)狀,賽業(yè)生物利用多年積累的的堅實經(jīng)驗、高效的團(tuán)隊組建及管理經(jīng)驗,歷經(jīng)兩年籌備,打造了一支技術(shù)過硬的小鼠手術(shù)模型服務(wù)團(tuán)隊,熟練掌握多種模型的制備,具備建立復(fù)雜及復(fù)合手術(shù)疾病模型的能力。我們以項目“可重復(fù)”作為金標(biāo)準(zhǔn),對于客戶復(fù)雜的項目需求或文獻(xiàn)未見、少見的疾病模型,我們會與客戶緊密協(xié)作,認(rèn)真理解和把握需求,制定科學(xué)合理的手術(shù)模型造模方案。希望我們提供的專業(yè)且穩(wěn)定的手術(shù)模型服務(wù)可以節(jié)省您的時間和精力,讓您可以聚焦到科學(xué)創(chuàng)新性的工作上來。服務(wù)優(yōu)勢1.以實驗“可重復(fù)”作為服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)我們以實驗“可重復(fù)”作為金標(biāo)準(zhǔn),對技術(shù)團(tuán)隊進(jìn)行大量的手術(shù)模型操作訓(xùn)練,確保疾病模型多個批次之間數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性。2.一站式服務(wù)。湖南豚鼠動物模型建模