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上海裸鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-12-07

導(dǎo)致集中消毒設(shè)計(jì)的紫外燈無法有效照射內(nèi)部空間,容易滋生細(xì)菌,影響細(xì)胞培養(yǎng)的存活率。因此,現(xiàn)有技術(shù)存在缺陷,需要改進(jìn)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問題是:提供一種可存放大量細(xì)胞培養(yǎng)皿、空間利用率高、存放方便,具有殺菌消毒作用的新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱。本實(shí)用新型的技術(shù)方案如下:一種新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱,包括若干個(gè)用于存放細(xì)胞培養(yǎng)皿的內(nèi)箱盒、及用于存放所述內(nèi)箱盒的外箱體,所述外箱體內(nèi)設(shè)有若干列中空的矩形槽,各所述矩形槽的兩側(cè)分別設(shè)有若干層對(duì)稱的滑槽,若干層所述滑槽由上至下等間距依次設(shè)置,每一層所述滑槽的正面及背面各存設(shè)有一內(nèi)箱盒,所述內(nèi)箱盒包括底盒、紫外燈及上蓋,所述紫外燈設(shè)于底盒內(nèi),所述底盒與上蓋的一側(cè)通過合頁鉸接,所述底盒與上蓋的另一側(cè)通過鎖扣扣合連接,所述底盒上設(shè)有推拉把手,所述底盒的兩側(cè)分別設(shè)有與滑槽適配的滑輪,所述底盒兩側(cè)的頭部分別設(shè)有與滑槽適配的滑塊。采用上述技術(shù)方案,所述的新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱中,所述滑槽的高度大于滑塊的高度,所述滑塊的高度大于滑輪的直徑。采用上述各個(gè)技術(shù)方案,所述的新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱中,所述鎖扣包括鎖環(huán)及鎖塊,所述鎖環(huán)與上蓋活動(dòng)連接,所述鎖塊設(shè)于底盒外部。骨骼肌的一般形態(tài)特征肌細(xì)胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方。上海裸鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室

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觀察的內(nèi)容包括細(xì)胞是否生長良好,形態(tài)是否正常,有無污染,培養(yǎng)基的PH是否太酸或太堿(由酚紅指示劑指示),此外對(duì)培養(yǎng)溫度和CO2濃度也要定時(shí)檢查。一般原代培養(yǎng)進(jìn)入培養(yǎng)后有一段潛伏期(數(shù)小時(shí)到數(shù)十天不等),在潛伏期細(xì)胞一般不分裂,但可貼壁和游走。過了潛伏期后細(xì)胞進(jìn)入旺盛的分裂生長期。細(xì)胞長滿瓶底后要進(jìn)行傳代培養(yǎng),將一瓶中的細(xì)胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續(xù)培養(yǎng)。每傳代一次稱為“一代”。二倍體細(xì)胞一般只能傳幾十代,而轉(zhuǎn)化細(xì)胞系或細(xì)胞株則可無限地傳代下去。轉(zhuǎn)化細(xì)胞可能具有惡性性質(zhì),也可能不死性(Immortality)而無惡性。培養(yǎng)正在生長中的細(xì)胞是進(jìn)行各種生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)的良好材料。四、凍存及復(fù)蘇為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度—-196℃,將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養(yǎng)基,以一定的冷卻速度凍存,終保存于液氮中。在極低的溫度下,細(xì)胞保存的時(shí)間幾乎是無限的。復(fù)蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。原代細(xì)胞干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化一方面是干細(xì)胞鑒定的主要方法。

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凍存過程中保護(hù)劑的選用、細(xì)胞密度、降溫速度及復(fù)蘇時(shí)溫度、融化速度等都對(duì)細(xì)胞活力有影響。[4]細(xì)胞培養(yǎng)具體步驟編輯一、細(xì)胞復(fù)蘇將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。移入15ml離心管中,加入10ml預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10mlDMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入10mlDMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。二、細(xì)胞傳代細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí).去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加人1mlDMEM完全培養(yǎng)基終止胰酶消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。加入10mlPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。再加入10mlPBS(經(jīng)高壓滅菌,保存于40C),吹勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),按照1×105/盤接種,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。三、細(xì)胞凍存細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加入lmlDMEM完全培養(yǎng)基終止胰酶消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。加入10mlPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。加入1ml凍存液(90%血清,10%DMSO),放入凍存盒內(nèi)。

原代細(xì)胞的優(yōu)勢與不足細(xì)胞培養(yǎng)很好的補(bǔ)充了體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的不足,它讓細(xì)胞功能和進(jìn)程的研究更具可操作性。細(xì)胞系的一個(gè)缺點(diǎn)是它們往往與原始的組織有不一樣的遺傳和表型。相比之下,原代細(xì)胞保持了細(xì)胞在體內(nèi)的許多重要標(biāo)志和功能。原代細(xì)胞的生長:雖然原代細(xì)胞有諸多優(yōu)點(diǎn),但是獲得高純度的原代細(xì)胞是一個(gè)非常艱巨的過程。比起細(xì)胞系,原代細(xì)胞可謂是極其敏感,需要額外添加經(jīng)典培養(yǎng)基所沒有的營養(yǎng)。原代細(xì)胞要在專為每種細(xì)胞定制的特殊培養(yǎng)液中存活和生長。例如內(nèi)皮細(xì)胞與上皮細(xì)胞或神經(jīng)元營養(yǎng)需求就大為不同。因此需要特殊培養(yǎng)基。傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)基靠血清提供生長因子、脂類和其他未知成分供細(xì)胞生長。但高血清會(huì)導(dǎo)致原代細(xì)胞分化或助長成纖維細(xì)胞等污染。此外,使用血清還會(huì)顧慮費(fèi)用增高和批次差異等問題。使用低血清或無血清的特殊成分培養(yǎng)基不僅可以避開這些問題,還能更好的促進(jìn)原代細(xì)胞的生長。另外,將原代細(xì)胞接種在生理親和性的基板上可以顯著提高細(xì)胞貼壁率、生長狀態(tài)和純度。基因表達(dá)分析:基因表達(dá)直接影響細(xì)胞功能,基因表達(dá)分析對(duì)研究原代細(xì)胞起重要作用。傳統(tǒng)的報(bào)告基因檢測和cDNA芯片方法往往需要轉(zhuǎn)染或大量高質(zhì)量RNA。但是原代細(xì)胞是出了名的難轉(zhuǎn)染。心臟中,心肌成纖維細(xì)胞約占正常心肌組織細(xì)胞總數(shù)的60%-70%。

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使得每個(gè)內(nèi)箱盒2都處于密封的狀態(tài),防止外部污染因素的干擾。如圖5所示,,為方便使用者鎖緊或打開內(nèi)箱盒2,所述鎖扣24包括鎖環(huán)241及鎖塊242,所述鎖環(huán)241與上蓋22活動(dòng)連接,所述鎖塊242設(shè)于底盒21外部,所述鎖環(huán)241套設(shè)于鎖塊242上。當(dāng)需要鎖緊內(nèi)箱盒2時(shí),只需將鎖環(huán)241活動(dòng)轉(zhuǎn)動(dòng),然后套設(shè)在鎖塊242上即可,簡單方便。如圖1所示,進(jìn)一步的,為方便使用者移動(dòng)外箱體1,所述外箱體1的底部還設(shè)有若干萬向腳輪12。本實(shí)施例中,外箱體1的底部設(shè)有4個(gè)萬向腳輪12,各萬向腳輪12分別設(shè)于外箱體1底部的四個(gè)角上。如圖1所示,更進(jìn)一步的,為方便推拉外移動(dòng)外箱體1,所述外箱體1的側(cè)部還設(shè)有方便推拉的扶手13。使用者手持扶手13,利用萬向腳輪12移動(dòng)外箱體1的位置,簡單方便。采用上述各個(gè)技術(shù)方案,本實(shí)用新型通過將細(xì)胞培養(yǎng)皿存放在內(nèi)箱盒內(nèi),在外箱體的矩形槽設(shè)置若干層對(duì)稱的滑槽,各內(nèi)箱盒可從滑槽的正面或背面存放于內(nèi),提高了細(xì)胞培養(yǎng)箱的空間利用率;在內(nèi)箱盒內(nèi)設(shè)有紫外燈,紫外燈單獨(dú)照射于內(nèi)箱盒,使得細(xì)胞培養(yǎng)皿處于無菌無毒的環(huán)境,提高細(xì)胞培養(yǎng)的存活率;在內(nèi)箱盒的兩側(cè)分別設(shè)有滑輪及滑塊,滑輪的設(shè)置使得用戶可方便存取內(nèi)箱盒內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)皿。名稱:人臍靜脈血管平滑肌細(xì)胞 Human umbilical vein vascular smooth muscle cell 貨號(hào):PC-H-18103。吉林C57原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

在進(jìn)行血管內(nèi)皮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí),通常選用的細(xì)胞模型為人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。上海裸鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室

在下面的描述中闡述了很多具體細(xì)節(jié)以便于充分理解本實(shí)用新型,但是本實(shí)用新型還可以采用其他不同于在此描述的其它方式來實(shí)施,本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在不違背本實(shí)用新型內(nèi)涵的情況下做類似推廣,因此本實(shí)用新型不受下面公開的具體實(shí)施方式的限制。其次,本實(shí)用新型結(jié)合示意圖進(jìn)行詳細(xì)描述,在詳述本實(shí)用新型實(shí)施方式時(shí),為便于說明,表示器件結(jié)構(gòu)的剖面圖會(huì)不依一般比例作局部放大,而且所述示意圖只是示例,其在此不應(yīng)限制本實(shí)用新型保護(hù)的范圍。此外,在實(shí)際制作中應(yīng)包含長度、寬度及深度的三維空間尺寸。為使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚,下面將結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型的實(shí)施方式作進(jìn)一步地詳細(xì)描述。本實(shí)用新型提供如下技術(shù)方案:一種可以分離的細(xì)胞培養(yǎng)板,在使用的過程,拆卸簡單且連接更加溫度,且方便標(biāo)號(hào)對(duì)比,請(qǐng)參閱圖1,包括底座100、一號(hào)培養(yǎng)板200、二號(hào)培養(yǎng)板300、培養(yǎng)皿槽400和縱向標(biāo)尺500;請(qǐng)?jiān)俅螀㈤唸D1,底座100底部固定安裝有支撐腳架110,具體的,支撐腳架110焊接在底座100的底部,底座100用于承載一號(hào)培養(yǎng)板200和二號(hào)培養(yǎng)板300,支撐腳架110用于支撐底座100;請(qǐng)?jiān)俅螀㈤唸D1,底座100頂部固定安裝有一號(hào)培養(yǎng)板200。上海裸鼠原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室

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