?4. 在電生理實驗中的關鍵作用?HEPES常用于膜片鉗實驗，其低離子強度特性可減少電流噪聲。建議與NaCl、KCl等電解質配合使用，終濃度不超過20 mM以避免膜電位干擾。?5. 蛋白質純化中的緩沖選擇?HEPES緩沖液（pH 7.5）適用于離子交換層析，因其不與His標簽蛋白競爭結合鎳柱。但需避免與EDTA聯用，以防金屬離子沉淀。光敏感性與儲存條件?HEPES溶液在光照下會生成過氧化物，需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌，并檢測過氧化物含量（如硫代硫酸鈉滴定法）。注射用HEPES緩沖液中美雙報實驗室集采。河南采購HEPES生產廠家

Tris-HCL與HEPES（供注射用）緩沖液應用對比

**常用的緩沖液有很多，如磷酸鹽緩沖液、Tris-HCl緩沖液、HEPES緩沖液、氨基酸緩沖液等。不同的緩沖液差別液很大，***主要來對比兩種**常用的緩沖液：Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液各自的應用對比。

1、Tris-HCl緩沖液的應用Tris常用于蛋白或者核酸的緩沖液，其在電泳緩沖液中與甘氨酸構成緩沖體系，穩定電泳過程中的pH，由于其具有弱堿性，水溶液的pH在10.5左右，可通過添加HCl或者NaOH制備不同pH的緩沖液，根據緩沖理論，Tris緩沖液的有效范圍通常是pH7.0-9.2之間。此外，Tris還可以制備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物（磷霉素等）的中間物，在化妝品、醫藥、涂料以及合成中均有應用。應用于體內時，Tris作為一種不含鈉的氨基緩沖堿，在體液中與H2CO3結合，生成碳酸氫鹽。因此它能緩沖酸，而且能降低CO2張力，有糾正急性呼吸性酸中毒和代謝性酸中毒雙重效果，其作用較碳酸氫鈉快而強。HEPES緩沖液對細胞無毒性作用，它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍。使用時濃度為10-50mmol/L，一般培養液內含20mmol/LHEPES即可達到緩沖能力。在體外診斷、DNA/RNA提取、脂質體藥物等方面均有應用。

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與溫度變化的穩定性?HEPES緩沖能力在4-37℃范圍內變化<10%，優于Tris緩沖液。但高溫（>50℃）會導致降解，需避免高壓滅菌。HEPES在低溫下仍保持良好緩沖能力，適合冷庫或冰上操作。在熱穩定性實驗中，HEPES緩沖液能有效維持反應體系的pH穩定。但需注意HEPES在高溫下的降解產物可能干擾實驗結果。在RNA研究中的注意事項?HEPES可能抑制某些RNA酶活性，但高濃度會干擾逆轉錄反應。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。HEPES在RNA電泳中常用作緩沖液，其低離子強度減少了對RNA遷移的干擾。在體外轉錄反應中，HEPES緩沖液能維持反應體系的pH穩定。但需注意HEPES可能結合某些金屬離子，影響依賴金屬離子的RNA酶活性。

二、藥用功能與應用緩沖作用：HEPES在pH值為6.8~8.2的范圍內具有良好的緩沖能力，能夠維持溶液pH的穩定。在藥用輔料中，HEPES常用于制備各種注射劑、口服液等制劑，以確保藥物在儲存和使用過程中pH值的穩定。細胞保護作用：HEPES對細胞無毒性作用，且能夠降低某些化學物質的細胞毒性。在細胞培養中，HEPES能夠維持細胞的正常形態和功能，提高細胞的生存率。促進藥物吸收：作為促透劑，HEPES能夠促進藥物分子通過皮膚或黏膜的吸收，提高藥物的生物利用度。其他應用：HEPES還用于制備各種生化試劑盒、診斷試劑等，為醫藥產品的質量和安全性提供保障。在某些特定的藥物制劑中，HEPES還起到穩定劑、增溶劑等作用。國產注射用HEPES緩沖液中美雙報。

伊立替康**早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液，在實際使用的過程中，該劑型逐漸暴露出一個問題：伊立替康的內酯環結構易水解，在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低，毒性更強。生理條件（pH 7.4）下，由于血清蛋白優先與羧酸鹽絡合而使平衡偏向活性低的羧酸型，造成有效的內酯型比例過低，達到平衡時，“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達90%。

q中包裹的伊立替康以有效的內酯型為主，這也意味著伊立替康脂質體內水相pH偏酸性（pH6左右）。而眾多文獻及Onivyde專利文件實施例均表明外水相pH在近中性時更有利于脂質的穩定，Onivyde專利文件的實施例表明外水相pH在7.25左右時脂質長期穩定性比較好。這需要伊立替康脂質體外水相和內水相存在pH差異，同時外水相偏堿性的緩沖對不能在長期儲存中進入內水相升高內水相pH，否則內水相中的伊立替康將會轉化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。四、不易穿過脂質膜的羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）更適用于伊立替康脂質體而羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作為一種不易穿過生物膜的緩沖對，可以在穩定脂質體外水相pH為弱堿性的同時，不改變內水相酸性pH，非常適用于伊立替康脂質體。 國產注射用HEPES緩沖液CDE已登記狀態為A采購。吉林登記號HEPES現貨

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緩沖溶液在酸堿度環境、組成、緩沖原理和應用領域上存在一定差異。酸堿度環境差異：硼酸鹽緩沖溶液和Tris-HCl緩沖溶液適用于堿性環境。磷酸鹽緩沖溶液和HEPES緩沖溶液適用于弱酸性、弱堿性或接近中性的環境。緩沖溶液組成差異：硼酸鹽緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液和磷酸鹽緩沖溶液通常由兩種物質配置而成。HEPES緩沖溶液則由一種物質配制。緩沖原理差異：硼酸鹽緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液和磷酸鹽緩沖溶液通過調節體系中緩沖對的電離或水解平衡移動來發揮緩沖作用。HEPES緩沖溶液通過平衡轉化關系來發揮緩沖作用。應用領域差異：磷酸鹽緩沖溶液在固體藥物釋放研究中應用較**。硼酸鹽緩沖溶液多用于液體藥物如滴眼液中。Tris-HCl緩沖溶液主要用于蛋白質、DNA等生物大分子的溶液體系中。HEPES緩沖溶液更多地應用于脂質體、細胞水平的相關生化實驗研究中。這些緩沖溶液各自具有特定的優勢和適用范圍，研究人員可以根據實驗需求選擇*適合的緩沖體系河南采購HEPES生產廠家