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南京正規無血清細胞凍存液直銷價

來源: 發布時間:2024-07-07

無血清細胞凍存液相對于含血清細胞凍存液的優勢有:1.即用型,無需現配,直接將細胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型,適用于凍存各種細胞系、原代細胞。3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單。4.不含血清,較大減少細胞污染。5.因不含血清,批次間差異小。6.無需液氮,-80℃冰箱長期凍存。7.可培養板整板凍存,例如雜交瘤細胞凍存時可節省篩選過程。無血清細胞凍存液是不含血清和動物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細胞凍存液。含血清,細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風險更高。南京正規無血清細胞凍存液直銷價

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無血清細胞凍存液:1.逐滴加入5-7mL的預熱的培養基到15mL的離心管中,加入的同時輕輕混勻。2.室溫(15-25°C)以300xg離心5分鐘。3.吸出培養基,使細胞沉淀完好無損。使用2mL血清移液管輕輕將細胞沉淀重懸于1mL的培養基中。小心保持細胞作為聚集體。4.將0.5mL的細胞混合物轉移到含有培養基的預包被的6孔板的培養孔中(例如,每個冷凍管可以鋪板兩個孔)。注意:鋪板多少孔可能需要根據凍存的細胞聚集體數量進行調整。通常在復蘇后,要比在常規的傳代鋪板更多的細胞聚集體數量。將培養板放入37°C培養箱。快速前后左右的搖晃培養板數次,將細胞聚集體分布均勻。24小時內不要移動培養板。正規無血清細胞凍存液廠家將要凍存的細胞懸液,進行細胞計數,計數后離心。

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細胞凍存液的操作步驟:1.配置含10%DMSO或凡士林、10~20%小牛血清的凍存細胞培養液;2.取對數成長期的體細胞,除去舊細胞培養液,用PBS清理。3.除去PBS,添加適量蛋白酶(遮蓋細胞培養皿表層)把單面生長發育的體細胞消化吸收出來;4.抽濾1000rpm,5min;5.除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細胞培養液,用塑料吸管輕輕地吹打使體細胞勻稱,記數,調整凍存液中體細胞的較后相對密度為5牙周106/ml~1牙周107/ml;6.將體細胞分裝進凍存管中,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標出體細胞的名字,凍存時間及作業者;8.凍存:標準的凍存程序流程為減溫速度-1~-2℃/min;當溫度達-25℃下列時,可升至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可快速滲入液態氮中。

無血清細胞凍存液,含多種保護劑成分。一些保護劑,易于穿透細胞,避免細胞內部水分子形成冰晶損傷細胞,同時另一些保護劑不能穿透細胞,但可以在冰晶形成之前,優先結合細胞外的水分子,降低細胞外溶液的電解質濃度,減少陽離子進入細胞的數量,為多種保護劑組合,在細胞內外進行雙重保護,較大提高了細胞復蘇存活率。無血清細胞凍存液不含牛血清,無動物源組份。2-8℃即可穩定保存,無需冷凍,即取即用。凍存細胞,無需程序降溫。凍存細胞復蘇率在90%以上。凍存液成分由原來血清變為無血清,無動物源成分。

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細胞凍存液的操作步驟:1.配置含10%DMSO或凡士林、10~20%小牛血清的凍存細胞培養液;2.取對數成長期的體細胞,除去舊細胞培養液,用PBS清理。3.除去PBS,添加適量蛋白酶(遮蓋細胞培養皿表層)把單面生長發育的體細胞消化吸收出來;4.抽濾1000rpm,5min;5.除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細胞培養液,用塑料吸管輕輕地吹打使體細胞勻稱,記數,調整凍存液中體細胞的較后相對密度為5牙周106/ml~1牙周107/ml;6.將體細胞分裝進凍存管中,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標出體細胞的名字,凍存時間及作業者;8.凍存:標準的凍存程序流程為減溫速度-1~-2℃/min;當溫度達-25℃下列時,可升至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可快速滲入液態氮中。也可將配有體細胞的凍存管放進-20℃電冰箱2h,隨后放進-70℃電冰箱中留宿,取下凍存管,移進液氮容器內。快速凍存即不需要經過梯度降溫,直接將細胞放入-80 ℃冰箱24h。南京正規無血清細胞凍存液直銷價

從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。南京正規無血清細胞凍存液直銷價

凍存細胞注意事項:凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得較佳結果。在細胞處于生長期密度達到70-90%的情況下進行培養細胞的凍存,并且細胞傳代盡可能靠前。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意較佳凍存條件取決于所用細胞系。細胞應緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器,使溫度每分鐘大約降低1°C。必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有DMSO或者甘油等冷凍保護劑。南京正規無血清細胞凍存液直銷價

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