研究人員發現，離體培養48小時的全層皮膚可保持屏障特性，且能對不同強度的屏障破壞做出反應，使用膠帶剝離或4小時十二烷基硫酸鈉(SLS)處理通過破壞皮膚結構、促進炎癥因子IL-6、IL-8的表達破壞皮膚屏障5]。使用1:1(v:v)乙mi:bing酮混合物對離體皮膚進行損傷造模，PPAR-α激動劑RFV3可通過增加神經酰胺、絲聚蛋白和轉谷氨酰胺酶1的表達來促進離體皮膚的屏障修護過程[”。離體皮膚模型還被用來評估清潔產品的功效，ZHOU等人通過對沐浴露A和沐浴露B處理的離體皮膚進行免疫熒光染色發現，與水對照和沐浴露A處理相比，經沐浴露B處理的離體皮膚在處理7天后，顆粒層和角質層中絲聚蛋白的表達明顯減少，證明沐浴露B對皮膚屏障具有破壞作用，此外，使用MTT檢測離體皮膚的組織活力也是用來評價皮膚屏障修護功效的重要指標。防曬指數測定：依據ISO 24444標準，檢測SPF/PA值并標注于證書主要位置。廣州化妝品測評中心

不同于新興的3D重組皮膚模型、皮膚類organ和器官芯片模型，離體皮膚雖然擁有較為久遠的發展歷史，但由于其具有倫理限制、獲取困難、個體差異等特殊的局限性，在化妝品領域的應用并不寬泛。與傳統的細胞模型相比，離體皮膚不僅可以在分子細胞水平實現對待測物的評估，更能在組織水平評估待測物的功效，具有良好的可視化和宣傳效果。已有大量的研究表明，離體皮膚是研究經皮給藥、化妝品及原材料功效、藥品和化妝品安全性、刺激性和毒性的有效替代模型，也逐漸被國內外藥品和化妝品的原料商、出品方、監管機構和消費者所認可。離體皮膚在化妝品領域的應用或將彌補化妝品安全性和功效評價體系的缺口。然而，目前國內外仍缺乏離體皮膚用于化妝品功效評價的行業標準和監督管理規范，未來可通過起草離體皮膚評價方法的技術指南、制定離體皮膚用于化妝品功效評價的標準規范、完善化妝品安全監管的法律法規文件，進一步提高離體皮膚模型在行業內的認可度、擴大離體皮膚模型在化妝品領域的應用范圍。化妝品毒理學安全評估實驗室設置單獨潔面區，確保受試者皮膚預處理標準化，提升測試結果可靠性。

斑馬魚胚胎因其透明性與體外受精特性，成為化妝品急性毒性檢測的關鍵工具。依據OECD TG 236標準，實驗通過將斑馬魚胚胎暴露于不同濃度受試物溶液中，觀察48小時內的發育異常（如卵凝結、體節異常、心包水腫等）并計算半數致死濃度（LC50）。例如，某美白精華液在濃度達31.5μg/mL時導致50%胚胎死亡，提示其潛在急性毒性風險。該方法較傳統哺乳動物實驗周期縮短90%，成本降低80%，且符合動物福利“3R”原則。目前，該方法已納入《化妝品安全評估技術導則》，被云南貝泰妮、廣州嬌蘭等企業用于原料篩選，并形成T/HPCIA 004-2022團體標準。然而，斑馬魚對不溶性粉體（如散粉）的檢測存在局限性，需結合細胞實驗完善評估體系。

斑馬魚作為模式生物，因其與人類基因同源性高達87%、皮膚結構相似度高等特點，被廣泛應用于化妝品功效評價領域。該技術符合國際3R原則（替代、減少、優化），尤其適用于出生5天內的胚胎檢測，可規避傳統動物實驗的倫理爭議。斑馬魚檢測具備高通量、可視化、高效率等優勢，單次實驗可處理數百條胚胎，通過顯微鏡或熒光標記實時觀測結果，實驗周期只需3-7天，成本只為傳統方法的1/10。目前，江蘇省特殊化妝品質量監督檢驗中心等機構已搭建斑馬魚檢測系統，覆蓋保濕、緊致、抗氧化等功效評價，成為化妝品功效宣稱的重要依據。抗氧化能力檢測：采用DPPH自由基處理法，量化產品抗自由基活性單位。

目前，化妝品原料過敏性檢測主要依賴動物實驗替代方法、細胞實驗和人體斑貼試驗。動物實驗替代方法：如局部淋巴結試驗（LLNA），通過檢測小鼠耳部淋巴結中增殖的淋巴細胞數量評估致敏性，靈敏度達80%以上，且減少動物痛苦。細胞實驗：基于角質形成細胞或樹突狀細胞的體外模型，如KeratinoSens?和h-CLAT試驗，通過檢測細胞因子分泌或表面標志物變化預測致敏潛力。人體斑貼試驗：將原料封閉貼敷于受試者背部皮膚，48小時后觀察反應，是驗證原料安全性的“金標準”，但耗時長、成本高。此外，新興的組學技術（如轉錄組學、代謝組學）正逐步應用于致敏機制研究，為精細檢測提供新思路。環特人體功效實驗室專注化妝品第三方檢測，以科學數據賦能產品功效驗證。化妝品新原料毒性實驗公司

科學依據：檢測報告需包含體外實驗、人體試驗等多元數據，支撐產品功效宣稱。廣州化妝品測評中心

什么是拉曼光譜？1928年，印度物理學家C.V.Raman他們在用汞燈的單色光來照射CCl4液體時，在液體的散射光中觀測到了頻率低于入射光頻率的新譜線。光照射到物質上時會發生彈性散射和非彈性散射。彈性散射的散射光是與激發光波長相同的成分。非彈性散射的散射光有比激發光波長長的和短的成分，統稱為拉曼（Raman）效應。由于拉曼譜線的數目，位移的大小，譜線的長度直接與試樣分子振動或轉動能級有關。因此，對拉曼光譜的研究，也可以得到有關分子振動或轉動的信息。目前拉曼光譜分析技術已廣泛應用于物質的鑒定，分子結構的研究譜線特征。廣州化妝品測評中心