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蘇州熒光PCR技術在動物疫病檢測的應用

來源: 發布時間:2024-10-25

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩定DNA聚合酶)的作用下,由一對特異性引物經熱變性-退火-延伸反應,三個不同溫度的循環處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術。在反應體系內,以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物,第一步,模板DNA變性,以構成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應原料半保留復制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環,2-4分鐘即可完成一個循環,2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復制到幾百萬倍,從而實現對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復制,因此PCR反應具有高度特異性。傳統的免疫學檢測(如:熒光和膠體金)存在靈敏性和特異性的局限性。蘇州熒光PCR技術在動物疫病檢測的應用

市面上現有PCR儀器都有以下幾個弊端:1.由于PCR靈敏度極高,實際應用中污染較嚴重,一旦有少量外源性污染就可出現假陽性結果。2.條件控制不當會造成各種產物突變,從而降低特異性和靈敏度。3.PCR技術需要以已知DNA模板作為擴充模板,必須知道引物的結合部位序列才能合成特異性引物,局限性較大。巧亦捷核酸一體機采用薄膜微流控技術,檢測過程為全封閉且自動進行核酸提取及PCR擴增,無需高標準的檢測環境,可很大程度上降低污染。結果快速、準確且穩定。江蘇貓PCR儀器哪家好PCR是可以做到病原體準確診斷的技術,與膠體金試紙及熒光定量試紙的應用場景相同。

PCR在傳染病診斷中有靈敏度高的優勢,可以做到早期診斷,實現及時診療,減少患病動物痛苦,獲得更好的療效。預后評估,監控診療效果。且適用范圍廣不同傳染病的檢測效果相同。不存在諸如免疫學方法中出現的貓類檢測試紙卡效果不佳的情況。PCR是目前大多數犬貓傳染病的診斷方法。也是寵物醫院必備的儀器之一,但市面上大多數都是PCR擴增儀,即需要人工進行核酸提取和純化。而巧亦捷核酸一體機則囊括了核酸提取和PCR擴增部分,儀器自動操作,極大減少了寵物醫院的儀器預算,真正做到全自動一體化檢測。

如犬瘟熱、貓瘟、細小、貓杯狀病毒等,能夠快速準確地確定病原體的存在。遺傳性疾病篩查:PCR可以用于檢測寵物遺傳性疾病的基因突變,如遺傳性眼疾、遺傳性肌肉疾病等,幫助寵物主人了解寵物的遺傳疾病風險。免疫性疾病診斷:PCR可用于檢測寵物免疫性疾病相關的免疫標記物或基因表達水平的變化,幫助診斷和診療免疫相關疾病。何時考慮進行PCR檢查在以下情況下,應考慮進行PCR檢查:寵物出現不明原因的癥狀:當寵物出現不明原因的發熱、嘔吐、腹瀉、咳嗽等癥狀時,應考慮進行PCR檢查以排除感*性疾病。如可以使用巧亦捷犬/貓消化道五聯檢、呼吸道五聯檢、貧血五聯檢等試劑,可快速篩查致病因。遺傳性疾病篩查:對于某些易患遺傳性疾病的品種,如柯基、金毛等,可以考慮在寵物出生后進行遺傳性疾病的基因篩查。免疫性疾病診斷:當寵物出現免疫相關的疾病癥狀,如食欲不振、關節腫脹等時,可考慮進行PCR檢查以輔助診斷。綜上所述,PCR檢查作為一種高效、準確的分子生物學技術,在寵物醫療診斷中發揮著重要作用。在適當的情況下,及時進行PCR檢查可以幫助寵物主人更好地了解寵物的健康狀況,并及時采取相應的診療和預防措施,保障寵物的健康和幸福。傳染病是由某些具有致病性的微生物,如細菌、病毒等引起的,能夠在某種動物或多種動物之間傳播的一些疾病。

巧亦捷核酸一體機采用的TaqMan探針法介紹:TaqMan探針法是具有高度特異性的定量PCR技術。它的工作原理是在PCR反應體系中存在一對PCR引物和一條探針,探針的5′端標記有報告基團,3′端標記有熒光淬滅基團,探針只與模板特異結合,其結合位點在兩條引物之間。當探針完整的時候,報告基團的熒光能量被淬滅基團吸收,所以儀器搜集不到信號,隨著反應的進展,Taq酶遇到探針,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷,導致報告基團的熒光能量不能被淬滅基團吸收,產生了熒光信號,因此信號的強度就代、表了模板DNA的拷貝數。巧亦捷能夠快速準確地識別病原體,為寵物的健康問題提供關鍵信息。巧亦捷PCR熒光探針法

巧亦捷核酸一體機針對不同傳染病的檢測效果相同。不存在免疫學方法中出現的貓類檢測試紙卡效果不佳的情況。蘇州熒光PCR技術在動物疫病檢測的應用

經過多年的科研,PCR技術應用于動物疫病的檢測和診斷中,具有特異性高和便于操作等特點,得到了寬泛的臨床應用。該技術能夠在比較短的時間內使基因進行快速的擴增,從而使微量的基因檢測在臨床中得到應用實踐。在PCR技術實際應用的過程中,其優點主要包括以下幾方面。首先,操作性較強,技術能夠簡單的應用于實際的工作中。其次,高效的擴增結果,能夠實現成果的轉化。***,特異性較高,技術性較強。現階段,該技術能夠在很短的時間內實現快速擴張的形勢使微量基因得到快速的檢測。蘇州熒光PCR技術在動物疫病檢測的應用

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