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江蘇PCR擴增

來源: 發布時間:2024-11-09

樣本處理、核酸提取、PCR擴增和數據處理是PCR的四個步驟。其中核酸提取可以幫助研究人員準確地快速地分離細胞或分子材料中的有效核酸,并獲得足夠的樣本為后續實驗提供依據。無論是病毒、細菌還是體細胞,遺傳物質都不是裸露在細胞外,都是在細胞內。需要有一個核酸提取試劑將遺傳物質釋放到外界,保證PCR反應效率。將核酸釋放出來后,提取與純化過程中同樣需要將樣本中的一些PCR抑制物去除掉,獲得純度比較高的核酸,比較大限度的保證PCR反應中抑制物的濃度降低,提高核酸檢測的準確性。因此核酸提取與純化這一步,也是保證PCR反應結果的關鍵一步。巧亦捷核酸檢測一體機采用磁珠法提取,效率高且可確保結果更準確。PCR技術又可以分為定量PCR和常規PCR,定量PCR分為實時熒光定量PCR(RT-PCR)和數字PCR。江蘇PCR擴增

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩定DNA聚合酶)的作用下,由一對特異性引物經熱變性-退火-延伸反應,三個不同溫度的循環處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術。在反應體系內,以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物,第一步,模板DNA變性,以構成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應原料半保留復制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環,2-4分鐘即可完成一個循環,2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復制到幾百萬倍,從而實現對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復制,因此PCR反應具有高度特異性。江蘇寵物用PCR儀器生產企業常用的qPCR方法有熒光染料法(SYBR Green I)和探針法(TaqMan)。

巧亦捷在今年上半年推出的全自動薄膜微流控快速核酸檢測一體機是收益診斷領域市面上為數不多的全自動核酸檢測儀器,它可以自動完成繁瑣的核酸提取和PCR擴增部分。且檢測全程為全封閉,避免人為干擾,消除人和實驗室的污染,降低對實驗室環境的高要求。真正做到了“樣本經,結果出”,巧亦捷希望憑借薄膜微流控平臺,進一步促進動物檢測和診斷的水平,提升系統完善的寵物疾病檢測綜合解決方案,在推動全自動分子診斷平臺在寵物醫院應用的同時,不斷研發更多更好的動物創新診斷技術和產品,為動物健康提供堅實保障。

在現代畜牧業和寵物醫療中,確保動物的健康已成為一項至關重要的任務。隨著動物養殖規模的擴大和寵物數量的增加,疾病預防和早期診斷顯得尤為重要。巧亦捷全自動核酸檢測系統的問世,為動物健康管理樹立了新的標準,為獸醫和養殖戶提供了強有力的技術支持。巧亦捷全自動核酸檢測系統采用先進的薄膜微流控技術,通過集成化的微流控芯片,實現了樣本處理、核酸提取、PCR擴增和檢測分析的全自動化。這一突破性的技術革新,不僅提高了檢測的精確性和靈敏度,還明顯縮短了檢測時間,使得快速診斷成為可能。在寵物醫療方面,巧亦捷核酸檢測系統可以快速、準確地檢測寵物體內的病原體核酸,幫助獸醫在早期階段識別疾病。這對于一些傳染性強、危害大的疾病尤為重要,如犬瘟熱病毒、貓免疫缺陷病毒等。早期發現意味著可以及時采取措施,防止疾病擴散,減少寵物的痛苦和診療費用。對于畜牧養殖業,巧亦捷系統同樣具有重大意義。畜禽養殖過程中,**的爆發往往會造成嚴重的經濟損失。巧亦捷核酸檢測系統能夠對常見的養殖動物病原體進行高效篩查,如豬瘟、禽流感等。通過定期檢測,養殖戶可以及時發現潛在的健康威脅,采取相應的防控措施,確保養殖場的健康和安全。PCR技術可以為動物健康和生命科學研究提供更加強大的工具和技術支持。

大多數寵物醫院運用的診斷方法為:PCR和試紙條。其區別是:試紙條原理是基于抗體抗原的免疫學方法,通過顏色或熒光標記來判讀,和PCR檢測是基于不同方法學的檢測方式。PCR通過檢測樣本中有無病毒DNA(RNA)來確診,靈敏度高、特異性強、支持檢測項目多,是人醫醫學界公認的診斷金標準,兩者區別可以理解為滴血認親(免疫學方法)與親子鑒定(分子診斷)的區別。目前專業的的寵物疾病機構就是使用PCR檢測。巧亦捷核酸檢測一體機采用國際**的薄膜微流控技術,實現了從核酸提取、PCR擴增、熒光檢測全流程自動化芯片內完成,可以實現專業實驗室級別的核酸檢測,且檢測時間短,全程無需專業技術人員參與,可實現基于病癥的多項目聯檢,更適合寵物醫院、獸醫站、養殖場等現場快檢應用場景。國外已將PCR技術廣泛應用于犬瘟、犬細小、弓形蟲等致病菌的檢測,從根本上突破了免疫學間接檢測的局限。江蘇薄膜微流控PCR動物檢疫

巧亦捷的品牌主張為:用心關愛每一個生命健康。江蘇PCR擴增

巧亦捷核酸一體機采用的TaqMan探針法介紹:TaqMan探針法是具有高度特異性的定量PCR技術。它的工作原理是在PCR反應體系中存在一對PCR引物和一條探針,探針的5′端標記有報告基團,3′端標記有熒光淬滅基團,探針只與模板特異結合,其結合位點在兩條引物之間。當探針完整的時候,報告基團的熒光能量被淬滅基團吸收,所以儀器搜集不到信號,隨著反應的進展,Taq酶遇到探針,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷,導致報告基團的熒光能量不能被淬滅基團吸收,產生了熒光信號,因此信號的強度就代、表了模板DNA的拷貝數。江蘇PCR擴增

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