接種細胞：轉染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。更多關于Polysciences PEI轉染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物！也可關注公眾號：Mine-bio，私信“PEI申請”，申請PEI 試用裝！PEI轉染試劑能用于體內轉染么？高質量PEI轉染試劑試用裝效果怎么樣

材料：質粒DNA指數生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm濾膜過濾，儲存于4℃備用。1×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES，調pH值到7.4，定容至1L，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃備用。方法：1．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當的完全培養基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養皿上（根據實驗需要選擇培養皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養皿面積的70-90％）。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養基。歡迎關注：Mine-bio，回復“申請PEI”即可申領試用裝！湖北慢病毒（LV）包裝PEI轉染試劑試用裝用PEI轉染試劑時出現沉淀什么原因?

PEI在于可以應用于體內試驗。當初試驗經費很有限，被逼無奈只能放棄脂質體2000，選擇PEI，以至于相當長的時間內，轉染試驗都不順利。下面是幾點關于PEI轉染的注意要點：1.PEI的使用量可以參照脂質體2000的說明書，所用質粒盡量去內2.轉染時，一定要把PEI+DMEM加入到質粒+DMEM中，順序不可錯，輕微混勻，靜止20min3.轉染后4小時，一定要換液！換含有FBS的完全培養液！因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續試驗涉及到穩定篩選，建議把血清濃度適當提高。PS：事實證明，PEI是可行的，已經做出穩定細胞系了。更多關于PEI轉染試劑相關的信息，可咨詢上海曼博生物醫藥科技有限公司！可申請PEI試用裝，曼博生物公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！

PEIMAX——高產工業化轉染試劑-高度濃縮，可制備大量轉染試劑Polysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產品，因其較高的轉染效果，已廣泛應用于工業化生產。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑，大量科學家選擇PEIMAX，在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來，經過眾多業內人士評審的公開研究和出版文獻表明，在HEK293、CHO和Sf9系統中可獲得很高的轉染效率，在重組抗體和病毒載體生產中穩定性高，可靠性強。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應器持續的高基因表達細胞體系，實現從新藥研發到工業化生產的輕松過度。而且與大多數細胞轉染方案相比，使用PEIMAX至少可降低40%轉染成本（部分案例可降低90%轉染成本）。歡迎關注：Mine-bio，回復“申請PEI”，即可申領試用裝！MAXgene GMP是一種cGMP級PEI轉染試劑。

產品簡介：Polysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產品，因其較高的轉染效果，已廣泛應用于工業化生產。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”體(protonsponge)。PEI可用作轉染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明，分子量為25000的線性PEI即Polysciences23966（PEI25K）轉染效率表現優良。產品特點：適用于生產mABs、rAbs、bsABs和病毒載體(AVV、LV、BEV)；在HEK293、CHO和Sf9細胞系中高度有效；適用于從研發到工業化生產的各個階段；可預測，可大規模生產；兩周內即可生成大量目標蛋白或病毒；高轉染效率；大量已發表的文獻支持。Polysciences轉染與遞送相關產品已正式移交Kyfora Bio，相關產品標簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences，后續購買請認準備新品牌。有誰用過Polysciences的PEI轉染試劑？低成本PEI轉染試劑試用裝歷史悠久

用PEI轉染試劑時，一般和DNA的比例是多少？高質量PEI轉染試劑試用裝效果怎么樣

產品簡介：Transporter 5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉染試劑）溶液，由PEI MAX配置而成，采用0.1um PES無菌過濾器，完全消除支原體污染風險。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物，這些復合物很容易通過內吞作用進入細胞，并且Transporter 5-DNA 復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉染效率。適用于工藝開發、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業化生產。Transporter 5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲（SF9、SF21） 等真核細胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質粒，所以較大的質粒也可以成功地轉染。 Transporter 5可節省試劑準備時間，加快項目進度。經過嚴格的性能檢測，確保品質，在新藥研發過程中是一款快速、重復性好、可用于批量產的轉染試劑。產品特點：非GMP，研究級PEI轉染試劑溶液；高轉染效率；無縫過渡到MAXgene GMP；易放大，可預測產量；用于工藝開發，臨床前和早期臨床研究。可申請PEI試用裝，曼博生物公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！高質量PEI轉染試劑試用裝效果怎么樣