研究蛋白-蛋白相互作用（PPI）對于理解細胞信號網(wǎng)絡至關重要。傳統(tǒng)的酵母雙雜交、免疫共沉淀等方法操作復雜、通量低。以Alpha技術為表示的均相發(fā)光方法徹底改變了這一局面。將靶蛋白A與供體珠偶聯(lián)，互作蛋白B與受體珠偶聯(lián)。當A和B在溶液中相互作用時，拉近兩珠產(chǎn)生信號。該方法可在純化蛋白、細胞裂解液甚至活細胞培養(yǎng)基中進行，不只能驗證已知互作，更能用于高通量篩選破壞或促進特定PPI的小分子化合物。其均相特性使得可以實時監(jiān)測互作動力學，研究互作強度，為藥物發(fā)現(xiàn)和基礎生物學提供了強大工具。均相化學發(fā)光對檢測環(huán)境有什么特殊要求？浙江CRET技術均相發(fā)光解決方案

在傳染病診斷領域，均相發(fā)光技術主要用于抗原或抗體的高靈敏檢測。例如，利用TR-FRET原理，可以設計檢測病毒抗原的均相免疫分析。將針對病毒抗原不同表位的兩種抗體分別標記供體和受體，樣本中若存在病毒抗原，則形成免疫復合物并產(chǎn)生FRET信號。該方法快速，可用于病原體篩查。在病毒學研究中，均相發(fā)光可用于評估病毒進入（如基于熒光素酶的報告病毒）、病毒復制或抗病毒藥物的效果。其高通量特性有助于快速篩選廣譜抗病毒化合物。江蘇CRET技術均相發(fā)光應用領域均相化學發(fā)光在全球體外診斷市場的競爭態(tài)勢如何？

除了基于熒光的能量轉(zhuǎn)移，均相檢測也可利用化學發(fā)光能量轉(zhuǎn)移（CRET）。在CRET中，供體是化學發(fā)光反應（如魯米諾-過氧化物酶反應）產(chǎn)生的激發(fā)態(tài)分子，其發(fā)出的光能直接激發(fā)鄰近的熒光受體發(fā)出更長波長的光。通過設計使受體標記在結(jié)合事件的另一方，即可實現(xiàn)均相檢測。電化學發(fā)光（ECL）也可用于均相模式。例如，將三聯(lián)吡啶釕標記在一方，另一方標記上能夠在其電極氧化還原循環(huán)中起共反應物作用的物質(zhì)（如三丙胺）。當兩者因生物識別事件靠近時，電化學觸發(fā)的高效ECL反應得以發(fā)生，產(chǎn)生強信號。這些方法進一步拓展了均相發(fā)光的技術邊界，提供了更多樣化的信號輸出選擇。

均相化學發(fā)光技術因其超高的通量、靈敏度和易于自動化的特性，已成為現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)高通量篩選（HTS）的支柱技術。在靶點導向的篩選中，它廣泛應用于：激酶/磷酸酶抑制劑篩選（通過檢測磷酸化底物的量）、GPCR功能分析（檢測cAMP、IP3或β-arrestin招募）、核受體轉(zhuǎn)錄活性篩選（報告基因檢測）、蛋白-蛋白相互作用抑制劑篩選（如使用Alpha技術）、以及酶活性分析（蛋白酶、去乙酰化酶等）。其“混合-讀數(shù)”的模式允許在1536孔甚至更高密度板中進行超大規(guī)模化合物庫（數(shù)十萬至上百萬）的篩選，每天可產(chǎn)生海量數(shù)據(jù)，極大加速了先導化合物的發(fā)現(xiàn)進程。臨床檢測新利器！肝素結(jié)合蛋白（HBP）檢測試劑盒（均相化學發(fā)光法），為醫(yī)療保駕護航！

組蛋白修飾酶（如甲基轉(zhuǎn)移酶、去甲基酶、乙酰轉(zhuǎn)移酶、去乙酰化酶）是**、神經(jīng)疾病等領域的熱門靶點。均相化學發(fā)光技術為這些酶活性的檢測和抑制劑篩選建立了成熟平臺。以組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶為例，通常使用生物素標記的S-腺苷甲硫氨酸（SAM）類似物作為甲基供體。酶反應后，生物素標記的甲基被轉(zhuǎn)移到組蛋白底物上。然后，使用針對甲基化位點的抗體（偶聯(lián)供體珠）和鏈霉親和素（偶聯(lián)受體珠）通過Alpha技術檢測，信號強度與酶活性成正比。這種方法靈敏度高，抗干擾能力強，可直接在含有化合物和輔因子的混合體系中進行篩選。均相化學發(fā)光技術在臨床檢驗中的普及程度。湖南干式化學發(fā)光均相發(fā)光生產(chǎn)廠家

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熱遷移分析（CETSA）用于研究藥物在細胞或組織水平與靶蛋白的結(jié)合，傳統(tǒng)方法依賴Western Blot，通量低。與均相化學發(fā)光免疫檢測（特別是Alpha技術）結(jié)合形成的CETSA HT，實現(xiàn)了高通量化。細胞經(jīng)藥物處理和不同溫度加熱后裂解，針對目標蛋白的特異性抗體對（分別偶聯(lián)Alpha供體珠和受體珠）被加入裂解液。只有未因熱變性而沉淀的、保持天然構(gòu)象的蛋白才能被兩個抗體同時識別并拉近微珠產(chǎn)生信號。通過繪制藥物處理組與對照組的熱穩(wěn)定性曲線，可以直觀看到藥物結(jié)合引起的蛋白熱穩(wěn)定性偏移（Tm變化），從而確認靶點結(jié)合并評估結(jié)合強度，廣泛應用于早期藥物發(fā)現(xiàn)中的靶點確證。浙江CRET技術均相發(fā)光解決方案