Alpha(Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay)技術(shù)是均相化學(xué)發(fā)光的典范。其供體珠中裝載光敏劑,在680nm激光激發(fā)下,將周圍環(huán)境中的氧分子轉(zhuǎn)化為高能量、短壽命(約4微秒)的單線態(tài)氧。單線態(tài)氧在溶液中的擴散半徑只約200納米。受體珠中則裝載了化學(xué)發(fā)光劑(通常是噻吩衍生物)和熒光接收體。當(dāng)單線態(tài)氧擴散進入鄰近的受體珠,會觸發(fā)一系列級聯(lián)反應(yīng):化學(xué)發(fā)光劑被氧化并發(fā)光,該能量隨即傳遞給熒光接收體,比較終發(fā)射出波長更長(520-620nm)、特征更明顯的熒光。這個能量轉(zhuǎn)移和放大的過程,使得一個單線態(tài)氧分子能引發(fā)大量發(fā)光分子的發(fā)射,實現(xiàn)了信號的有效放大,因此靈敏度極高。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)怎樣提高檢測的靈敏度和特異性?江西浦光生物均相發(fā)光臨床檢驗醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用研究

均相發(fā)光技術(shù)正逐步應(yīng)用于食品安全和環(huán)境監(jiān)測等多應(yīng)用領(lǐng)域。例如,檢測食品中的毒(如黃曲霉素)、抵抗細菌藥物殘留或病原菌等。通過設(shè)計針對這些污染物的抗體或適配體,并將其與均相化學(xué)發(fā)光信號系統(tǒng)偶聯(lián),就可以開發(fā)出快速、高通量的篩查方法。相較于傳統(tǒng)的色譜或微生物學(xué)方法,均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)具有檢測更快捷,適合大批量樣本的初篩的特點。在環(huán)境監(jiān)測中,常??捎糜跈z測水中的重金屬離子、有機污染物等,具有現(xiàn)場快速分析的潛力。遼寧體外診斷均相發(fā)光臨床檢驗醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用研究均相化學(xué)發(fā)光的檢測速度如何,能否滿足快速診斷需求?

均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)的實現(xiàn),主要依賴于兩種設(shè)計哲學(xué)。第一種是直接能量轉(zhuǎn)移路徑,表示技術(shù)為AlphaLISA/AlphaScreen。其關(guān)鍵是使用能產(chǎn)生單線態(tài)氧的供體微珠和含有化學(xué)發(fā)光劑的受體微珠。只有當(dāng)生物識別事件將兩者拉近至200納米以內(nèi)時,供體產(chǎn)生的單線態(tài)氧才能有效觸發(fā)受體珠內(nèi)的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。未結(jié)合的微珠因距離過遠,單線態(tài)氧在擴散途中淬滅,不產(chǎn)生信號。第二種是活性調(diào)控路徑,即生物識別事件直接調(diào)控化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的效率或速率。例如,將化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的催化劑(如酶)或其抑制劑/共反應(yīng)物與生物分子偶聯(lián),當(dāng)目標分子存在導(dǎo)致它們接近或分離時,化學(xué)發(fā)光信號被開啟或關(guān)閉。這兩種路徑均巧妙地利用“臨近”或“調(diào)控”將特異性識別與信號產(chǎn)生直接耦合。
微流控技術(shù)通過縱微尺度流體,能夠?qū)崿F(xiàn)多種試劑的精確混合、反應(yīng)和檢測的集成。將均相發(fā)光檢測整合到微流控芯片中,有望進一步實現(xiàn)“芯片實驗室”(Lab-on-a-Chip)的愿景。例如,在芯片微通道內(nèi)完成細胞的裂解、目標蛋白的免疫識別和均相發(fā)光反應(yīng),并通過集成的微型光學(xué)元件檢測信號。這種結(jié)合可以極大減少試劑用量(降至納升級)、縮短反應(yīng)時間、提高分析速度,并實現(xiàn)便攜化,為床邊診斷(POCT)和現(xiàn)場檢測提供新的解決方案。Duo'z浦光均相發(fā)光檢測試劑盒,操作簡便,快速獲得可靠結(jié)果!

熱遷移分析(Cellular Thermal Shift Assay, CETSA)是一種研究靶點與藥物在細胞水平結(jié)合情況的技術(shù)。其原理是藥物結(jié)合會改變靶蛋白的熱穩(wěn)定性。傳統(tǒng)的CETSA依賴蛋白質(zhì)印跡法檢測,通量低?,F(xiàn)在,通過與均相發(fā)光免疫檢測(如Alpha)結(jié)合,開發(fā)出了均相CETSA(簡稱CETSA® HT)。該方法將細胞在不同溫度下加熱后裂解,使用針對目標蛋白的抗體對(偶聯(lián)Alpha供體/受體珠)檢測溶液中剩余的未聚集的天然蛋白量。通過比較藥物處理組與對照組的蛋白熱穩(wěn)定性曲線偏移,即可高通量地確認化合物是否與細胞內(nèi)靶點結(jié)合,并評估結(jié)合強度。臨床檢測新利器!肝素結(jié)合蛋白(HBP)檢測試劑盒(均相化學(xué)發(fā)光法),為醫(yī)療保駕護航!河南干式化學(xué)發(fā)光均相發(fā)光解決方案
降本增效新方案,為您節(jié)省實驗成本!江西浦光生物均相發(fā)光臨床檢驗醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用研究
組蛋白修飾酶(如甲基轉(zhuǎn)移酶、去甲基酶、乙酰轉(zhuǎn)移酶、去乙酰化酶)是**、神經(jīng)疾病等領(lǐng)域的熱門靶點。均相化學(xué)發(fā)光技術(shù)為這些酶活性的檢測和抑制劑篩選建立了成熟平臺。以組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶為例,通常使用生物素標記的S-腺苷甲硫氨酸(SAM)類似物作為甲基供體。酶反應(yīng)后,生物素標記的甲基被轉(zhuǎn)移到組蛋白底物上。然后,使用針對甲基化位點的抗體(偶聯(lián)供體珠)和鏈霉親和素(偶聯(lián)受體珠)通過Alpha技術(shù)檢測,信號強度與酶活性成正比。這種方法靈敏度高,抗干擾能力強,可直接在含有化合物和輔因子的混合體系中進行篩選。江西浦光生物均相發(fā)光臨床檢驗醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用研究