人體內(nèi)多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體，包括干細(xì)胞、免疫細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、血小板及平滑肌細(xì)胞等。外泌體被包裹在堅(jiān)硬的雙層膜中。雙層膜保護(hù)外泌體的內(nèi)容物，使外泌體能夠在組織中長(zhǎng)距離移動(dòng)。干細(xì)胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用，有望成為“無(wú)細(xì)胞的細(xì)胞治理”工具。干細(xì)胞來(lái)源的外泌體可通過(guò)囊泡，將干細(xì)胞的精華部分——mRNA、miRNA、IncRNA及蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì)，打包運(yùn)出干細(xì)胞體外。通過(guò)“細(xì)胞間高速公路”來(lái)“快遞”到人體各個(gè)組織內(nèi)。外泌體可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化等方方面面。成都腹水外泌體

由于特殊的結(jié)構(gòu)和循環(huán)方式，外泌體作為藥物運(yùn)輸?shù)妮d體具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。例如外泌體的尺寸分布能夠增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng)，從而有選擇性地深入中流組織;其外層磷脂雙分子層可以保護(hù)內(nèi)容物不受各種生物酶的影響，維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中，其體積小，結(jié)構(gòu)、組成與細(xì)胞膜類似，導(dǎo)致外泌體可以在避開(kāi)免疫系統(tǒng)監(jiān)督的同時(shí)深入組織內(nèi)部，有較好的生物相容性;當(dāng)采用內(nèi)源外泌體時(shí)，能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應(yīng);除此之外，某些細(xì)胞來(lái)源或經(jīng)特殊修飾過(guò)的外泌體具有良好的特異性，可以與特定的qi官或組織結(jié)合。山東干細(xì)胞外泌體有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻(xiàn)。

通過(guò)改變外泌體的溶解性或者分散性,可以將它們從體液或細(xì)胞培養(yǎng)液中沉淀出來(lái)。常見(jiàn)的方法是使用聚乙二醇或凝集素來(lái)沉淀樣品中的外泌體。聚乙二醇是一種水溶性非離子化合物,不含水的聚乙二醇可以通過(guò)“劫持”水分子增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力,從而迫使其脫離溶液,進(jìn)而在低速離心條件下發(fā)生沉降。凝集素是一種具有高度特異性的碳水化合物結(jié)合蛋白,可通過(guò)與外泌體質(zhì)膜糖蛋白上的糖鏈結(jié)合來(lái)改變外泌體的溶解性。此外,還可使用魚精蛋白、醋酸鈉、有機(jī)溶劑沉淀等方法進(jìn)行沉淀分離。

結(jié)果表明，PS親和法可以檢測(cè)到許多目前為止都無(wú)法檢測(cè)的外泌體蛋白質(zhì)和RNA。應(yīng)用Tim4的外泌體強(qiáng)結(jié)合能力，可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測(cè)、定量分析外泌體。以前無(wú)法用超速離心法提取的微囊泡，也通過(guò)運(yùn)用PS親和法實(shí)現(xiàn)高純度提取。本指導(dǎo)書中對(duì)該技術(shù)進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，這項(xiàng)技術(shù)的有用性今后將受到世界各方評(píng)價(jià)，有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻(xiàn)。外泌體的檢測(cè)和提取還遇到一個(gè)困難即：對(duì)各種外泌體的分類。研究人員尚未統(tǒng)一定義以何種方法提取的細(xì)胞外囊泡可以稱之為外泌體，給實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析和重復(fù)性確認(rèn)帶來(lái)困難。近年，隨著國(guó)際細(xì)胞外囊泡協(xié)會(huì)的成立、世界性研究者研討會(huì)的舉辦，提案MISEV指南作為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)劃或已經(jīng)開(kāi)始進(jìn)行EV研究的科學(xué)家請(qǐng)務(wù)必閱讀這些方針。有關(guān)外泌體分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究。

外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞，調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng)。同時(shí)，外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化、促進(jìn)種瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用；此外，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來(lái)進(jìn)行藥物遞送。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)有哪些？lexoRBase數(shù)據(jù)庫(kù)收集和描述人類血液外泌體中所有長(zhǎng)的RNA，包括circRNA、lncRNA和mRNA。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫(kù)匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。lExoCarta數(shù)據(jù)庫(kù)主要收錄了包括人、大鼠、小鼠、綿羊等幾個(gè)物種的286個(gè)研究結(jié)果，涉及蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。外泌體是各種細(xì)胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。外泌體作為細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標(biāo)記話題比較熱門。外泌體體外診斷

外泌體是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡。成都腹水外泌體

基于免疫細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠介導(dǎo)和調(diào)節(jié)機(jī)體對(duì)中流的免疫反應(yīng)，外泌體在中流免疫zhiliao方面的潛力受到廣fan關(guān)注。其中樹(shù)枝狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體包含大量的MHC-多肽復(fù)合物和免疫刺激相關(guān)的分子，能夠激huo相關(guān)的T細(xì)胞，介導(dǎo)體內(nèi)抗中流應(yīng)答，在多個(gè)臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的抗中流療效。Morse等考察了樹(shù)枝狀細(xì)胞外泌體對(duì)非小細(xì)胞肺ai患者的療效。結(jié)果表明，患者對(duì)樹(shù)枝狀細(xì)胞外泌體耐受性良好，1/3患者表現(xiàn)出了對(duì)樹(shù)枝狀細(xì)胞外泌體的T細(xì)胞響應(yīng)，2/4患者自然殺傷細(xì)胞活性得以激huo。成都腹水外泌體