(5)緩沖溶液在穩定性方面各顯利弊:①Tris-HCl緩沖溶液pH值受外界影響較大,一般現用現配。同時需要注意Tris是一級脂肪胺,分子結構中的氨基易與醛類化合物發生縮合反應,是一些生化實驗的抑制劑。②硼酸鹽緩沖液有一定毒性,不宜用做注射液或者口服液的緩沖液。③雖然磷酸鹽緩沖溶液穩定性很好,但磷酸根具有一定的絡合能力會抑制一些與金屬離子有關的生化反應。④HEPES緩沖溶液是較理想的生物緩沖劑,但其有多種生物學效應,如:縮短血液凝固時間、減緩平滑肌收縮頻率以及阻斷細胞膜上的陰離子通道等,在一定程度上會影響患者身體狀態,使用時應需注意。注射用HEPES緩沖液中美雙報;湖南藥用輔料HEPES現貨

對細胞的保護作用降低細胞毒性:某些化學物質在培養基中容易產生細胞毒性,影響細胞的生長和繁殖。HEPES能夠降低這些化學物質的細胞毒性,從而保護細胞免受損傷。形成保護層:HEPES分子還可以通過吸附在細胞表面,形成一層保護層,減少細胞間的摩擦和碰撞,降低細胞的損傷風險。這有助于提高細胞的生存率和實驗結果的可靠性。綜上所述,HEPES在細胞培養中發揮作用的主要原理是通過其兩性離子特性增加溶液離子濃度和滲透壓,以及通過其穩定的緩沖能力維持細胞生長所需的pH環境。此外,HEPES還能降低細胞毒性、形成保護層等,對細胞具有保護作用。這些特性使得HEPES成為細胞培養中不可或缺的緩沖劑之一。北京藥用HEPES生產廠家注射用HEPES國產緩沖液CDE已登記企業詢價;

用途細胞培養:HEPES在細胞培養中發揮著重要作用,能夠維持培養液的pH穩定,提高細胞存活率。特別適用于長時間培養、開放環境培養以及對pH變化敏感的細胞系。生物和生化研究:由于HEPES具有穩定的pH控制能力和廣泛的應用范圍,它還被用于大多數金屬離子的研究、環境和生物學研究、陽離子交換色譜中的緩沖液和洗脫液、植物研究、凝膠電泳中的緩沖液、電穿孔的緩沖液等。其他應用:此外,HEPES還用于哺乳動物細胞培養、體外受精和胚胎培養的緩沖液、二辛可寧酸(BCA)分析以及一些軟骨兩棲動物的研究等。
?4. 在電生理實驗中的關鍵作用?HEPES常用于膜片鉗實驗,其低離子強度特性可減少電流噪聲。建議與NaCl、KCl等電解質配合使用,終濃度不超過20 mM以避免膜電位干擾。?5. 蛋白質純化中的緩沖選擇?HEPES緩沖液(pH 7.5)適用于離子交換層析,因其不與His標簽蛋白競爭結合鎳柱。但需避免與EDTA聯用,以防金屬離子沉淀。光敏感性與儲存條件?HEPES溶液在光照下會生成過氧化物,需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌,并檢測過氧化物含量(如硫代硫酸鈉滴定法)。注射用CDE已登記HEPES。

HEPES緩沖體系的應用
2022年4月15日,施維雅公司(SERVIER)宣布,其胰腺****藥物易安達(通用名:鹽酸伊立替康脂質體注射液)獲得中國國家藥品監督管理局(NMPA)正式批準上市。
伊立替康**早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液,在實際使用的過程中,該劑型逐漸暴露出一個問題:伊立替康的內酯環結構易水解,在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低,毒性更強。生理條件(pH 7.4)下,由于血清蛋白優先與羧酸鹽絡合而使平衡偏向活性低的羧酸型,造成有效的內酯型比例過低,達到平衡時,“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達90%。
q中包裹的伊立替康以有效的內酯型為主,這也意味著伊立替康脂質體內水相pH偏酸性(pH6左右)。而眾多文獻及Onivyde專利文件實施例均表明外水相pH在近中性時更有利于脂質的穩定,Onivyde專利文件的實施例表明外水相pH在7.25左右時脂質長期穩定性比較好。這需要伊立替康脂質體外水相和內水相存在pH差異,同時外水相偏堿性的緩沖對不能在長期儲存中進入內水相升高內水相pH,否則內水相中的伊立替康將會轉化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。四、不易穿過脂質膜的羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)更適用于伊立替康脂質體
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HEPES的化學結構與基本特性?HEPES是一種兩性離子緩沖劑,化學式為C8H18N2O4S,分子量238.3 g/mol。其結構由哌嗪環和乙磺酸基團組成,pKa值為7.5(25℃),在pH 6.8-8.2范圍內具有優異的緩沖能力。作為Good's緩沖液家族成員,HEPES對細胞無毒性,且不與金屬離子螯合,適合含金屬離子的實驗體系。其水溶性(>1 M)和低滲透壓特性使其成為細胞培養的理想選擇。HEPES的緩沖能力在4-37℃范圍內變化<10%,優于Tris緩沖液。但高溫(>50℃)會導致降解,需避免高壓滅菌。HEPES溶液在光照下會生成過氧化物,需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌,并檢測過氧化物含量(如硫代硫酸鈉滴定法)。湖南藥用輔料HEPES現貨