羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)是一種不能輕易穿過生物膜的緩沖。 它適用于伊立替康脂質(zhì)體,因為它可以在穩(wěn)定脂質(zhì)體外水相酸堿度為弱堿性的情況下,不改變內(nèi)水相酸性酸堿度。HEPES 的用量應(yīng)該在10-25mM 之間,10mM以下的用量會導(dǎo)致緩沖能力較弱, 25mM以上可能對一些細胞造成不良反應(yīng)。HEPES的使用以及操作應(yīng)盡量在避光的情況下進行。這是因為在燈光下,HEPES會產(chǎn)生H2O2,而H2O2對活性的物體來說是有害的,這對培養(yǎng)的細胞會造成一定的傷害。
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注意事項濃度控制:根據(jù)實驗需求和細胞類型,嚴格控制HEPES的濃度。一般來說,培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/L HEPES即可達到良好的緩沖效果。pH調(diào)節(jié):在配制含有HEPES的培養(yǎng)基時,需要準確調(diào)節(jié)pH值至適合細胞生長的范圍內(nèi)。儲存條件:配制好的含有HEPES的培養(yǎng)基應(yīng)存放在適當?shù)臏囟认拢苊忾L時間暴露于空氣中或受到污染。綜上所述,HEPES緩沖體系具有***的緩沖范圍、CO2無關(guān)性、低毒性、穩(wěn)定性強和膜不透性等優(yōu)勢,在細胞培養(yǎng)和其他生物化學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。通過合理控制HEPES的濃度和配制方法,可以維持細胞培養(yǎng)環(huán)境的pH穩(wěn)定,提高細胞的生長和代謝效率。四川備案登記號HEPES生產(chǎn)廠家注射用HEPES緩沖液中美雙報實驗室采購;

HEPES緩沖體系在生物化學(xué)和細胞生物學(xué)研究中扮演著至關(guān)重要的角色。以下是對HEPES緩沖體系的詳細介紹:一、定義與組成HEPES,全稱為N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸,是一種非離子兩性緩沖劑。它能夠在不同的pH條件下平衡氫離子濃度,從而維持溶液pH的穩(wěn)定。二、特性與優(yōu)勢***的緩沖范圍:HEPES的有效緩沖范圍在pH6.8~8.2之間,覆蓋了大多數(shù)生物實驗和細胞培養(yǎng)所需的pH環(huán)境。CO2無關(guān)性:與許多其他緩沖液不同,HEPES的緩沖能力不受CO2濃度的影響,這使得它在開放式培養(yǎng)或細胞觀察等實驗中具有獨特的優(yōu)勢。低毒性:在適當濃度下,HEPES對細胞無毒性作用,能夠為細胞提供一個安全的生長環(huán)境。穩(wěn)定性強:HEPES不易受溫度、光照和化學(xué)物質(zhì)的影響,適合長期實驗和儲存。膜不透性:HEPES具有膜不透性,不會***改變細胞的滲透壓,避免了對細胞形態(tài)和功能的不良影響。
HEPES是一種兩性離子緩沖劑。HEPES分子中的磺酸基(-SO3H)和叔胺氮共同構(gòu)成了緩沖對。磺酸基具有較強的酸性,可以釋放出H+;而叔胺氮則具有堿性,可以接受H+生成季銨鹽。這兩個部分之間可以相互轉(zhuǎn)移H+或OH-,從而建立起平衡的緩沖體系。在HEPES緩沖溶液中,當有外來酸或堿添加進來時,磺酸基和叔胺之間的轉(zhuǎn)移平衡會發(fā)生變化,從而抵消外界酸堿物質(zhì)的影響,使溶液的pH保持相對穩(wěn)定。這種平衡轉(zhuǎn)化關(guān)系可以通過下圖來表示:HEPES?HEPESH++OH-HEPES?HEPES-+H+HEPES?HEPESH2++OH-HEPES?HEPES2-+2H+這些平衡反應(yīng)使得HEPES能夠在一定范圍內(nèi)調(diào)節(jié)溶液的pH值,一般在6.8到8.2之間。此外,HEPES緩沖溶液的濃度以及環(huán)境溫度對其pH值的影響較小,因此能夠保持較長時間的穩(wěn)定pH值。總的來說,由于HEPES分子中的磺酸基和叔胺氮之間的平衡轉(zhuǎn)化關(guān)系,HEPES可以作為一種有效的兩性離子緩沖劑,在生化實驗和生產(chǎn)過程中穩(wěn)定溶液的酸堿度。注射用HEPESCDE已登記登記狀態(tài)為A;

HEPES在細胞培養(yǎng)中的應(yīng)用?HEPES***用于哺乳動物細胞培養(yǎng),尤其在CO2培養(yǎng)箱外操作時(如顯微鏡觀察),可替代碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。推薦濃度為10-25 mM,過高濃度可能抑制細胞生長。需注意HEPES對光敏感,需避光保存。HEPES緩沖液能有效維持細胞外pH穩(wěn)定,防止因CO2逸出導(dǎo)致的培養(yǎng)基堿化。在胚胎培養(yǎng)中,HEPES需嚴格過濾除菌,且濃度不超過15 mM,以避免影響囊胚發(fā)育。建議與**酸鈉聯(lián)用增強緩沖能力。HEPES還可用于原代細胞培養(yǎng),其低離子強度特性減少了對細胞的機械損傷。注射用HEPES CDE已登記登記狀態(tài)為A。黑龍江現(xiàn)貨HEPES需求
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HEPES在細胞培養(yǎng)中發(fā)揮作用的主要原理是基于其兩性離子特性和穩(wěn)定的緩沖能力。以下是具體解釋:對細胞的保護作用降低細胞毒性:某些化學(xué)物質(zhì)在培養(yǎng)基中容易產(chǎn)生細胞毒性,影響細胞的生長和繁殖。HEPES能夠降低這些化學(xué)物質(zhì)的細胞毒性,從而保護細胞免受損傷。形成保護層:HEPES分子還可以通過吸附在細胞表面,形成一層保護層,減少細胞間的摩擦和碰撞,降低細胞的損傷風(fēng)險。這有助于提高細胞的生存率和實驗結(jié)果的可靠性。
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