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HEPES,全稱為4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸,又名N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸或N-2-Hydroxyethylpiperazine-N-2-EthaneSulfonicAcid,是一種在生物化學和分子生物學領域中廣泛應用的化學物質。以下是對HEPES的詳細介紹:配制方法單一HEPES溶液:可以配制單純的HEPES+NaOH溶液。例如,要配制500ml 1M HEPES,pH=7.0的溶液,可以將119.15g HEPES溶解在400ml蒸餾水中,加0.51M的NaOH水溶液調節至所需pH(HEPES的有效pH范圍是6.88.2),然后用蒸餾水定容至500ml,于4攝氏度保存。HEPES+鹽溶液:也可以配制含有其他成分的HEPES溶液。例如,將HEPES、NaCl、Na2HPO4·7H2O等按一定比例溶解在蒸餾水中,用NaOH調節pH值后定容。廣西備案登記號HEPES生產廠家注射用HEPESCDE已登記登記狀態為A;

HEPES的化學結構與基本特性?HEPES是一種兩性離子緩沖劑,化學式為C8H18N2O4S,分子量238.3 g/mol。其pKa值為7.5(25℃),在pH 6.8-8.2范圍內具有優異的緩沖能力。作為Good's緩沖液家族成員,HEPES對細胞無毒性,且不與金屬離子螯合,適合含金屬離子的實驗體系。其水溶性(>1 M)和低滲透壓特性使其成為細胞培養的理想選擇。艾偉拓HEPES現已登記且狀態為A,歡迎采購!HEPES在細胞培養中的應用?HEPES***用于哺乳動物細胞培養,尤其在CO2培養箱外操作時(如顯微鏡觀察),可替代碳酸氫鹽緩沖系統。推薦濃度為10-25 mM,過高濃度可能抑制細胞生長。需注意HEPES對光敏感,需避光保存。
HEPES在細胞培養中發揮作用的主要原理是基于其兩性離子特性和穩定的緩沖能力。以下是具體解釋:對細胞的保護作用降低細胞毒性:某些化學物質在培養基中容易產生細胞毒性,影響細胞的生長和繁殖。HEPES能夠降低這些化學物質的細胞毒性,從而保護細胞免受損傷。形成保護層:HEPES分子還可以通過吸附在細胞表面,形成一層保護層,減少細胞間的摩擦和碰撞,降低細胞的損傷風險。這有助于提高細胞的生存率和實驗結果的可靠性。
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用途細胞培養:HEPES在細胞培養中發揮著重要作用,能夠維持培養液的pH穩定,提高細胞存活率。特別適用于長時間培養、開放環境培養以及對pH變化敏感的細胞系。生物和生化研究:由于HEPES具有穩定的pH控制能力和廣泛的應用范圍,它還被用于大多數金屬離子的研究、環境和生物學研究、陽離子交換色譜中的緩沖液和洗脫液、植物研究、凝膠電泳中的緩沖液、電穿孔的緩沖液等。其他應用:此外,HEPES還用于哺乳動物細胞培養、體外受精和胚胎培養的緩沖液、二辛可寧酸(BCA)分析以及一些軟骨兩棲動物的研究等。注射用HEPES國產緩沖液CDE已登記。湖南備案登記號HEPES
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HEPES緩沖體系的應用
2022年4月15日,施維雅公司(SERVIER)宣布,其胰腺****藥物易安達(通用名:鹽酸伊立替康脂質體注射液)獲得中國國家藥品監督管理局(NMPA)正式批準上市。
伊立替康**早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液,在實際使用的過程中,該劑型逐漸暴露出一個問題:伊立替康的內酯環結構易水解,在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低,毒性更強。生理條件(pH 7.4)下,由于血清蛋白優先與羧酸鹽絡合而使平衡偏向活性低的羧酸型,造成有效的內酯型比例過低,達到平衡時,“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達90%。
q中包裹的伊立替康以有效的內酯型為主,這也意味著伊立替康脂質體內水相pH偏酸性(pH6左右)。而眾多文獻及Onivyde專利文件實施例均表明外水相pH在近中性時更有利于脂質的穩定,Onivyde專利文件的實施例表明外水相pH在7.25左右時脂質長期穩定性比較好。這需要伊立替康脂質體外水相和內水相存在pH差異,同時外水相偏堿性的緩沖對不能在長期儲存中進入內水相升高內水相pH,否則內水相中的伊立替康將會轉化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。四、不易穿過脂質膜的羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)更適用于伊立替康脂質體
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