HEPES在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮作用的主要原理是基于其兩性離子特性和穩(wěn)定的緩沖能力。以下是具體解釋：一、兩性離子特性HEPES是一種兩性離子緩沖劑，其分子結(jié)構(gòu)中的磺酸基團(tuán)和哌嗪基團(tuán)能夠分別與水分子結(jié)合形成氫鍵。這種結(jié)構(gòu)使得HEPES能夠在溶液中增加離子濃度，從而調(diào)節(jié)滲透壓。隨著HEPES濃度的增加，溶液中的離子濃度相應(yīng)提高，導(dǎo)致滲透壓的增大。這種滲透壓的增加有助于維持細(xì)胞的正常水分平衡，保持細(xì)胞的正常形態(tài)和功能。HEPES供注射用 藥用輔料國(guó)產(chǎn)注射用HEPES緩沖液中美雙報(bào)高性價(jià)比；江蘇現(xiàn)貨HEPES生產(chǎn)廠家

緩沖溶液在生物化學(xué)方面的應(yīng)用非常重要。磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液、HEPES緩沖溶液等都是常見的緩沖體系，并且在生化實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)過程中使用。磷酸鹽緩沖溶液由二氫磷酸鹽和一氫磷酸鹽組成，其緩沖范圍可在pH5.8至pH8.0之間工作，適合于大多數(shù)蛋白質(zhì)的研究。硼酸鹽緩沖溶液由硼酸和其相應(yīng)的鹽（如Na2B4O7）組成，適合細(xì)胞外液pH范圍內(nèi)的緩沖作用。Tris-HCl緩沖溶液以Tris（三羥甲基氨基甲烷）為主要成分，緩沖范圍在pH7.0至pH9.0之間，適合于許多生化實(shí)驗(yàn)。HEPES緩沖溶液是一種弱堿性的緩沖溶液，具有良好的緩沖性能和生物相容性，適用于在pH7.2至pH8.5范圍內(nèi)的實(shí)驗(yàn)。總之，緩沖溶液在確保生物化學(xué)反應(yīng)的可重復(fù)性、準(zhǔn)確性和有效性方面發(fā)揮著重要作用。通過選擇適當(dāng)?shù)木彌_體系及其濃度可以調(diào)整溶液的pH值，從而確保生化反應(yīng)在所需的酸堿環(huán)境下進(jìn)行。在生物制劑的生產(chǎn)和質(zhì)量控制中，緩沖溶液同樣起著至關(guān)重要的作用。江蘇現(xiàn)貨HEPES生產(chǎn)廠家注射用HEPES 中美雙報(bào)。

在流式細(xì)胞術(shù)中的優(yōu)化?HEPES（10 mM）可維持細(xì)胞懸液pH穩(wěn)定，減少熒光染料淬滅。但需與FBS或BSA聯(lián)用以防止非特異性結(jié)合。HEPES緩沖液能減少細(xì)胞聚集，提高流式分析的準(zhǔn)確性。在長(zhǎng)時(shí)間流式實(shí)驗(yàn)中，HEPES可替代碳酸氫鹽緩沖液，避免因CO2逸出導(dǎo)致的pH漂移。HEPES的低離子強(qiáng)度特性減少了對(duì)細(xì)胞膜的損傷。HEPES緩沖能力在4-37℃范圍內(nèi)變化<10%，優(yōu)于Tris緩沖液。但高溫（>50℃）會(huì)導(dǎo)致降解，需避免高壓滅菌。HEPES在低溫下仍保持良好緩沖能力，適合冷庫或冰上操作。在熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)中，HEPES緩沖液能有效維持反應(yīng)體系的pH穩(wěn)定。但需注意HEPES在高溫下的降解產(chǎn)物可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

伊立替康**早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液，在實(shí)際使用的過程中，該劑型逐漸暴露出一個(gè)問題：伊立替康的內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)易水解，在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉(zhuǎn)化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低，毒性更強(qiáng)。生理?xiàng)l件（pH 7.4）下，由于血清蛋白優(yōu)先與羧酸鹽絡(luò)合而使平衡偏向活性低的羧酸型，造成有效的內(nèi)酯型比例過低，達(dá)到平衡時(shí)，“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達(dá)90%。

q中包裹的伊立替康以有效的內(nèi)酯型為主，這也意味著伊立替康脂質(zhì)體內(nèi)水相pH偏酸性（pH6左右）。而眾多文獻(xiàn)及Onivyde專利文件實(shí)施例均表明外水相pH在近中性時(shí)更有利于脂質(zhì)的穩(wěn)定，Onivyde專利文件的實(shí)施例表明外水相pH在7.25左右時(shí)脂質(zhì)長(zhǎng)期穩(wěn)定性比較好。這需要伊立替康脂質(zhì)體外水相和內(nèi)水相存在pH差異，同時(shí)外水相偏堿性的緩沖對(duì)不能在長(zhǎng)期儲(chǔ)存中進(jìn)入內(nèi)水相升高內(nèi)水相pH，否則內(nèi)水相中的伊立替康將會(huì)轉(zhuǎn)化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。四、不易穿過脂質(zhì)膜的羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）更適用于伊立替康脂質(zhì)體而羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作為一種不易穿過生物膜的緩沖對(duì)，可以在穩(wěn)定脂質(zhì)體外水相pH為弱堿性的同時(shí)，不改變內(nèi)水相酸性pH，非常適用于伊立替康脂質(zhì)體。 注射用HEPES國(guó)產(chǎn)緩沖液CDE已登記企業(yè)詢價(jià)。

HEPES緩沖體系的應(yīng)用

2022年4月15日，施維雅公司（SERVIER）宣布，其胰腺****藥物易安達(dá)（通用名：鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液）獲得中國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）正式批準(zhǔn)上市。

伊立替康**早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液，在實(shí)際使用的過程中，該劑型逐漸暴露出一個(gè)問題：伊立替康的內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)易水解，在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉(zhuǎn)化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低，毒性更強(qiáng)。生理?xiàng)l件（pH 7.4）下，由于血清蛋白優(yōu)先與羧酸鹽絡(luò)合而使平衡偏向活性低的羧酸型，造成有效的內(nèi)酯型比例過低，達(dá)到平衡時(shí)，“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達(dá)90%。

q中包裹的伊立替康以有效的內(nèi)酯型為主，這也意味著伊立替康脂質(zhì)體內(nèi)水相pH偏酸性（pH6左右）。而眾多文獻(xiàn)及Onivyde專利文件實(shí)施例均表明外水相pH在近中性時(shí)更有利于脂質(zhì)的穩(wěn)定，Onivyde專利文件的實(shí)施例表明外水相pH在7.25左右時(shí)脂質(zhì)長(zhǎng)期穩(wěn)定性比較好。這需要伊立替康脂質(zhì)體外水相和內(nèi)水相存在pH差異，同時(shí)外水相偏堿性的緩沖對(duì)不能在長(zhǎng)期儲(chǔ)存中進(jìn)入內(nèi)水相升高內(nèi)水相pH，否則內(nèi)水相中的伊立替康將會(huì)轉(zhuǎn)化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。四、不易穿過脂質(zhì)膜的羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）更適用于伊立替康脂質(zhì)體

注射用HEPES CDE已登記登記狀態(tài)為A；江蘇現(xiàn)貨HEPES生產(chǎn)廠家

注射用HEPES國(guó)產(chǎn)緩沖液CDE已登記；江蘇現(xiàn)貨HEPES生產(chǎn)廠家

使用羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）緩沖體系時(shí)的注意事項(xiàng)由于哌嗪基團(tuán)的存在，當(dāng)羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）暴露于光線中時(shí)，會(huì)產(chǎn)生H2O2，這對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞或其它有生物活性的物體產(chǎn)生毒性，同時(shí)對(duì)氧化還原敏感的物質(zhì)不宜共同使用，因此羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作為緩沖液的操作應(yīng)盡量在避光條件下進(jìn)行。羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）在生化領(lǐng)域常見的使用濃度為10-25mM，當(dāng)濃度低于10mM時(shí)緩沖能力較弱，不能起到較好的緩沖效果，當(dāng)濃度較高時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能具有毒害作用。艾偉拓長(zhǎng)期穩(wěn)定供應(yīng)注射級(jí)海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）等生物保護(hù)劑與緩沖鹽，GMP條件生產(chǎn)，中美雙報(bào)，供注射用，**內(nèi)***，DNase&RNasefree，符合國(guó)際主流藥典標(biāo)準(zhǔn)，助力重組蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒載體疫苗、脂質(zhì)體、單雙抗、抗體偶聯(lián)藥物等生物制劑生產(chǎn)與中外申報(bào)！江蘇現(xiàn)貨HEPES生產(chǎn)廠家