HEPES的化學(xué)結(jié)構(gòu)與基本特性?HEPES是一種兩性離子緩沖劑，化學(xué)式為C8H18N2O4S，分子量238.3 g/mol。其pKa值為7.5（25℃），在pH 6.8-8.2范圍內(nèi)具有優(yōu)異的緩沖能力。作為Good's緩沖液家族成員，HEPES對細(xì)胞無毒性，且不與金屬離子螯合，適合含金屬離子的實(shí)驗(yàn)體系。其水溶性（>1 M）和低滲透壓特性使其成為細(xì)胞培養(yǎng)的理想選擇。艾偉拓HEPES現(xiàn)已登記且狀態(tài)為A，歡迎采購！HEPES在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用?HEPES***用于哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)，尤其在CO2培養(yǎng)箱外操作時(shí)（如顯微鏡觀察），可替代碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。推薦濃度為10-25 mM，過高濃度可能抑制細(xì)胞生長。需注意HEPES對光敏感，需避光保存。國產(chǎn)注射用HEPES緩沖液CDE已登記狀態(tài)為A。廣西備案登記號HEPES實(shí)驗(yàn)室采購

使用注意事項(xiàng)pH調(diào)節(jié)：在配制HEPES溶液時(shí)，需要準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH值至適合細(xì)胞生長的范圍內(nèi)。濃度控制：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和細(xì)胞類型，嚴(yán)格控制HEPES的濃度，避免過高或過低。一般來說，HEPES的使用終濃度為10~50mmol/L，其中20mmol/L HEPES足以滿足大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)的緩沖需求。避光操作：由于HEPES暴露于光線中時(shí)會產(chǎn)生過氧化氫，對培養(yǎng)的細(xì)胞或其他有生物活性的物體產(chǎn)生毒性，因此HEPES作為緩沖液的操作應(yīng)盡量在避光條件下進(jìn)行。與其他成分的兼容性：在配制細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)，需要注意HEPES與其他成分的兼容性。長期穩(wěn)定性：配制好的HEPES溶液需要存放在適當(dāng)?shù)臏囟认拢_保其長期穩(wěn)定性。綜上所述，HEPES作為一種高效、穩(wěn)定的緩沖液，在細(xì)胞培養(yǎng)和其他生物化學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。通過合理控制HEPES的濃度和配制方法，可以維持細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的pH穩(wěn)定，提高細(xì)胞的生長和代謝效率。浙江供注射用HEPES如何購買注射用HEPES 中美雙報(bào)；

在流式細(xì)胞術(shù)中的優(yōu)化?HEPES（10 mM）可維持細(xì)胞懸液pH穩(wěn)定，減少熒光染料淬滅。但需與FBS或BSA聯(lián)用以防止非特異性結(jié)合。HEPES緩沖液能減少細(xì)胞聚集，提高流式分析的準(zhǔn)確性。在長時(shí)間流式實(shí)驗(yàn)中，HEPES可替代碳酸氫鹽緩沖液，避免因CO2逸出導(dǎo)致的pH漂移。HEPES的低離子強(qiáng)度特性減少了對細(xì)胞膜的損傷。HEPES緩沖能力在4-37℃范圍內(nèi)變化<10%，優(yōu)于Tris緩沖液。但高溫（>50℃）會導(dǎo)致降解，需避免高壓滅菌。HEPES在低溫下仍保持良好緩沖能力，適合冷庫或冰上操作。在熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)中，HEPES緩沖液能有效維持反應(yīng)體系的pH穩(wěn)定。但需注意HEPES在高溫下的降解產(chǎn)物可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

血漿的酸堿平衡是維持人體正常生理功能的重要因素之一。pH值指示了溶液的酸堿性，正常人血漿的pH值通常在7.35-7.45之間。當(dāng)血漿的pH值低于7.35時(shí)，我們稱之為酸中毒。血漿pH值的異常變化可能會對身體的正常功能產(chǎn)生不利影響。在人體血漿中，存在多種緩沖體系來維持酸堿平衡，其中包括NaHCO3-H2CO3、蛋白質(zhì)鈉鹽-蛋白質(zhì)、氧合血紅蛋白鉀鹽-氧合血紅蛋白等。這些緩沖體系通過吸收或釋放氫離子來調(diào)節(jié)血漿的pH值，維持其在正常范圍內(nèi)。當(dāng)血漿pH值低于7.35時(shí)，我們稱之為酸中毒。酸中毒可能由于多種原因引起，包括肺部呼吸功能障礙導(dǎo)致二氧化碳潴留、腎臟功能異常導(dǎo)致酸性物質(zhì)排泄減少等。為了糾正酸中毒，醫(yī)生可能會采取一些措施，如調(diào)整呼吸、給予堿藥物等，以恢復(fù)血漿pH值到正常范圍。總之，血漿的酸堿平衡對維持人體正常生理功能非常重要。緩沖體系在血漿中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，通過吸收或釋放氫離子來調(diào)節(jié)血漿的pH值，確保其保持在正常范圍內(nèi)。酸中毒時(shí)，醫(yī)生會采取相應(yīng)措施糾正異常的血漿pH值，以維持身體的正常功能。注射用HEPES國產(chǎn)緩沖液CDE已登記企業(yè)詢價(jià)；

HEPES緩沖體系的應(yīng)用

2022年4月15日，施維雅公司（SERVIER）宣布，其胰腺****藥物易安達(dá)（通用名：鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液）獲得中國國家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）正式批準(zhǔn)上市。

伊立替康**早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液，在實(shí)際使用的過程中，該劑型逐漸暴露出一個(gè)問題：伊立替康的內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)易水解，在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉(zhuǎn)化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低，毒性更強(qiáng)。生理?xiàng)l件（pH 7.4）下，由于血清蛋白優(yōu)先與羧酸鹽絡(luò)合而使平衡偏向活性低的羧酸型，造成有效的內(nèi)酯型比例過低，達(dá)到平衡時(shí)，“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達(dá)90%。

q中包裹的伊立替康以有效的內(nèi)酯型為主，這也意味著伊立替康脂質(zhì)體內(nèi)水相pH偏酸性（pH6左右）。而眾多文獻(xiàn)及Onivyde專利文件實(shí)施例均表明外水相pH在近中性時(shí)更有利于脂質(zhì)的穩(wěn)定，Onivyde專利文件的實(shí)施例表明外水相pH在7.25左右時(shí)脂質(zhì)長期穩(wěn)定性比較好。這需要伊立替康脂質(zhì)體外水相和內(nèi)水相存在pH差異，同時(shí)外水相偏堿性的緩沖對不能在長期儲存中進(jìn)入內(nèi)水相升高內(nèi)水相pH，否則內(nèi)水相中的伊立替康將會轉(zhuǎn)化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。四、不易穿過脂質(zhì)膜的羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）更適用于伊立替康脂質(zhì)體

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在RNA研究中的注意事項(xiàng)?HEPES可能抑制某些RNA酶活性，但高濃度會干擾逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。HEPES在RNA電泳中常用作緩沖液，其低離子強(qiáng)度減少了對RNA遷移的干擾。在體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中，HEPES緩沖液能維持反應(yīng)體系的pH穩(wěn)定。但需注意HEPES可能結(jié)合某些金屬離子，影響依賴金屬離子的RNA酶活性。HEPES溶液在光照下會生成過氧化物，需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌，并檢測過氧化物含量（如硫代硫酸鈉滴定法）。過氧化物會氧化敏感的生物分子，如硫醇基團(tuán)和某些熒光染料。長期儲存的HEPES溶液應(yīng)分裝并避免反復(fù)凍融。商業(yè)化的HEPES粉末也應(yīng)避光保存，因其在光照下會逐漸降解。HEPES溶液的pH會隨時(shí)間緩慢變化，建議使用前重新校準(zhǔn)。廣西備案登記號HEPES實(shí)驗(yàn)室采購