植物、動物、人類都存在RNA干擾現象,這對于基因表達的管理、參與對病菌傳染的防護、控制活躍基因具有重要意義。RNA干擾是一個生物過程,在這個過程中雙鏈RNA以一種非常明確的方式壓制了基因表達。自1998年發現以來,RNA干擾已經作為一種強大的“基因沉默”技術而出現。RNA干擾作為研究基因運行的一種研究方法已被普遍應用于基礎科學,它可能在將來產生更多更新的醫治方法。科學家認為,RNA干擾技術不僅是研究基因功能的一種強大工具,不久的未來,這種技術也許能用來直接從源頭上讓致病基因“沉默”,以醫治病癥甚至一些病,在農業上也將大有可為。細菌總RNA提取試劑盒:提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質污染...
RNA是核糖核酸,DNA是脫氧核酸。區別:紫外吸收:核酸的λm=260nm,堿基展開程度越大,紫外吸收就越厲害。當A=1時,DNA:50ug/ml,RNA和單鏈DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml。用A260/A280還可來表示核酸的純度。沉降速度:對于拓撲異構體(核苷酸數目相同的核酸),其沉降速度從達到小依次為:RNA;超螺旋DNA>解鏈環狀DNA;松弛環狀DNA;線形DNA也就是在離心管中較上層是線形DNA,較下面是RNA。電泳:核苷酸、核酸均可以進行電泳,泳動速度主要由分子大小來決定,因此,電泳是測定核酸分子量的好方法。DNA分子量測定較直接的方法:用適當濃度的EB(溴嘧啶)...
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡介。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。二、試劑盒特點:1、離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。2、結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩定性好,純度高和離心柱方便快捷的優點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免...
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡介。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。二、試劑盒特點:1、離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。2、結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩定性好,純度高和離心柱方便快捷的優點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免...
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發的,利用吸附柱法從血清、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質量的miRNA。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質膜材料,對RNA尤其是smallRNA(107)均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時處理多個樣品,所有的操作可以在一小時內完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染,故而能夠作RNA印跡分析、斑點雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護分析和分子克隆等。和進口品牌實驗對照顯示,公司的產品...
總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實驗操作快速方便,顏色鮮明,便于分層。本試劑適用范圍普遍,可以從動物組織、植物材料、各種微生物及培養細胞等樣品中提取總RNA。該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。樣品在總RNA提取試劑中被充分裂解的同時能夠較大限度地保證RNA的完整性。在加入氯仿離心后,溶液會分成三層:上層無色水相、中間層和下層紅色有機相,RNA分布在上清層中。收集上清層后,經異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA。提取的總RNA完整性好,無蛋白和DNA污染,可用于各種分子生物學常規實驗,如RT-PCR、Re...
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發生產,博取眾家之長,根據多年來市場反饋不斷進行技術升級和改良得來。具有操作步驟少,實驗快捷,RNA產量純度高,充分滿足后續實驗要求的需要,適用提取樣品普遍等特點。產量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度:OD值一般在1.9以上。得到的RNA無DNA污染,可直接用于反轉錄,實時熒光定量PCR(尤其對RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續實驗。1、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個實驗操作步驟簡化快捷從時間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取...
總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實驗操作快速方便,顏色鮮明,便于分層。本試劑適用范圍普遍,可以從動物組織、植物材料、各種微生物及培養細胞等樣品中提取總RNA。該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。樣品在總RNA提取試劑中被充分裂解的同時能夠較大限度地保證RNA的完整性。在加入氯仿離心后,溶液會分成三層:上層無色水相、中間層和下層紅色有機相,RNA分布在上清層中。收集上清層后,經異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA。提取的總RNA完整性好,無蛋白和DNA污染,可用于各種分子生物學常規實驗,如RT-PCR、Re...
眾所周知,RNA提取是一項困難的工作。常見的挑戰包括RNA降解、低產率和/或純度以及DNA污染。此外,不同的樣品類型有自己獨特的特性,需要特別注意。例如,微生物(如革蘭氏陽性/陰性細菌、菌類、古生菌等)的細胞壁堅硬,不易被化學和酶解。其他樣本類型,如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等),可與RNA共沉淀,并可壓制下游分析,如RT-qPCR。RNA是不穩定的,極易降解。許多樣品含有高水平的RNase,會快速降解RNA。為了使之較小化,較好在采集時穩定樣本中的RNA。常用的樣品穩定方法包括液氮快速冷凍、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室。然而,這些方法也有缺點,如核酸的凍融損傷,并...
RNA充當遺傳物質:其實RNA并不是只能干這些臟活累活,實際上,它也是可以充當遺傳物質的。病菌的遺傳物質大多都是RNA,比如,這次的病菌的遺傳物質就是RNA。不過,如今具有細胞結構的生物,它們的遺傳物質基本上都是DNA。而科學家認為,其實較早的生物,其實都是以RNA作為遺傳物質的。這個假說也被叫做RNA世界假說。其實這個也很好理解,我們都知道RNA和DNA都有堿基,而且就是利用的堿基互補原則來完成任務的。DNA要完成生命活動就指導RNA。因此,只要RNA能夠完成類似于DNA的自我復制,那么就可以作為遺傳物質。拭子RNA提取試劑的選擇?洗脫液洗脫能力好,核酸的提取得率就高。南京正規RNA提取試劑...
細胞RNA提取的方法:異丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以見到側壁沉淀,輕輕吸棄上清。向EP管中加入75%酒精洗滌沉淀,幫助分離剩余的有機試劑(剩余有機試劑過多會影響OD值和PCR反應),輕彈沉淀,使其浮在酒精,靜置1-2min,讓酒精充分接觸沉淀,充分溶解有機試劑,然后4度離心5min。輕輕吸棄上清。將EP管再次放于離心機中瞬時離心,棄掉管壁殘余液體。然后將EP管置于超凈臺中干燥5-10min.。注意RNA樣品不要過于干燥,否則很難溶解。加入50ulDEPC處理水,震蕩充分溶解沉淀。測量RNA濃度。將RNA保存于-80度。異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質變性劑,可溶解蛋白質。唐...
石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒(離心柱型):原理簡介:改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA(RNA)從硅基質膜上洗脫。試劑盒特點:1、離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。2、結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩定性好,純度高和離心柱方便快捷的優點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了...
RNA提取試劑盒原理:該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速,簡單,經濟有效的方法,可從全血,哺乳動物細胞,細菌細胞和菌類細胞中分離總RNA。優化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統允許RNA物質基團結合到旋轉柱的玻璃纖維基質上,同時使污染物通過柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫,不用酚提取或醇沉淀。RNA提取試劑盒特點:1、快速程序在25-40分鐘內提供高質量的總RNA。2、即用型RNA,可在絕大多數下游應用,例如RT-PCR,cDNA合成,NorthernBlotting,Differentialdisplay,PrimerExtension...
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑,內含異硫氰酸胍等物質,能迅速裂解細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。RNA存在于水相中。水相轉移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質。mRNA是依據DNA序列轉錄而成的蛋白質合成模板。金華鄭州RNA提取試劑RNA提取濃度不高或質量不佳原因及解決辦法:...
RNA的提取:眾所周知,Trizol是一種RNA提取試劑,內含異硫氰酸胍和酚等物質,能迅速破碎細胞和溶解細胞中的其他成分,壓制細胞釋放出核酸酶,維持細胞中RNA的穩定性,我們可以在反應物中加入Trizol后搖勻,在加入氯仿離心,這樣的話我們的RNA就進入了水相中,再用異丙醇沉淀水相中的RNA,即可達到提取總RNA的目的了。首先我們需要稱取一定量的預處理好的廢酵母配10%左右的酵母溶液,在一定溫度下,加入一定濃度的氯化鈉,之后加入NaOH溶液調節反應的pH,攪拌抽提一定時間后,離心分離上清液,調節pH至等電點,經酒精沉淀獲得核糖核酸,用水定容至100mL取1m適當稀釋,調pH7.0,這樣的話RN...
RNA指的是核糖核酸。真核生物體的遺傳物質存在于細胞核內,多數的真核生物使用DNA也就是脫氧核糖核酸來作為遺傳的中心物質,但是少量的病菌遺傳物質可以是RNA。正因為病菌的遺傳物質是RNA,所以可以通過檢測病菌的RNA是否存在,或者其濃度和含量來判斷是否存在相應的病菌傳染,傳染的程度及病菌是否仍在大量復制。一個核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種,即A腺嘌呤、G鳥嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。RNA是核糖核酸的縮寫。存在于生物細胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。專門的高鹽緩沖系統允許...
石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒(離心柱型):原理簡介:改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA(RNA)從硅基質膜上洗脫。試劑盒特點:1、離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。2、結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩定性好,純度高和離心柱方便快捷的優點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了...
RNA提取試劑的選擇:對于富含多糖多酚的植物類組織提取是個難點,Takara精心研發的柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以輕松解決這個問題。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地從各種簡單的植物組織材料(葉片、莖、幼苗等)、富含多糖多酚的植物組織材料(果實、種子等)、菌類提取高純度的TotalRNA,適用范圍普遍。按照標準流程,本試劑盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可選步驟提取得到包含SmallRNA(
細胞質和細胞核RNA提取試劑盒特點:1.有效分離和提取細胞質RNA,與細胞核RNA。2.方便快捷的離心柱操作方式。3.提取的RNA,品質高,產量多。4.試劑盒不含苯酚,可提取所有RNA(含RNA)。5.純化的RNA可用于任何應用,包括RT-PCR,qRT-PCR,RNA-Seq,陣列等。6.細胞質RNA不含DNA,可直接用于RT-PCR/qRT-PCR。7.試劑盒可用于哺乳動物細胞或者組織樣品的提取。在某些情況下,研究者們更希望能夠提取特定分餾的RNA,而不是總RNA。例如,在一些表達譜研究中,較好能夠提取成熟的細胞質(Cytoplasmic)RNA。或者,在研究分析未剪接的RNA前體時,提取...
常用總RNA提取試劑:異硫氰酸胍法和Trizol法是動物組織及動物細胞總RNA提取較常用的方法,異硫氰酸胍法操作簡單快捷,適用于樣本足夠大的常規動物組織;Trizol法裂解能力較強,尤其適合小樣本及特別難提取的組織,如兔子皮膚,動物結締組織等總RNA的提取;另外Trizol作為一種通用型的裂解試劑,還可以用于植物組織、細菌、菌類等組織的提取。對于含多糖多酚的植物組織如油茶、茶葉、油菜等還可以使用CTAB法進行總RNA的提取。提取RNA時我們經常遇到的問題是:(1)RNA產量較低;(2)RNA有嚴重的鹽類污染;(3)RNA有嚴重的有機溶劑污染;(4)樣品降解等問題。提取的RNA樣品中不應存在對酶...
ScRNA存在于細胞質中,與蛋白質結合成復合體后發揮生物學功能。ScRNA-seq技術應用普遍,于2017年就有科學家利用scRNA繪制出首張小腸細胞圖譜,這不僅增強了我們對腸道細胞產生物體和其他信號的理解,還為腸道如何對不同入侵病原菌做出應答提供了新的線索。科學家還通過scRNA-seq技術揭示了之前位置的細胞亞型,并詳細說明了病菌和病原體入侵傳染時小腸上皮的變化。ScRNA-seq技術為更詳細地研究細胞和組織及疾病提供了新的途徑。siRNA即小干擾RNA,約20-25個核苷酸,由兩條互補的核酸鏈組成,在RNA干擾過程中通過互補的核苷酸序列來干擾特定基因的表達。siRNA與載體結合已應用于基...
總RNA提取試劑,適用于動植物細胞或組織及細菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。獲得的RNA可直接用于Northern雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase保護實驗,RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。該試劑可用于100次總RNA提取(10平方厘米細胞或100mg組織)。總RNA提取試劑注意事項:1,RNA提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應保證無污染無RNA酶。操作中應小心,防止外源性RNA酶污染樣品導致RNA樣品降解。2,試劑中含有酚等有害物質,注意個人防護。自備新開封或專門氯仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。常用RNA提取方法有:1TRIzol法;2TRI...
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發生產,博取眾家之長,根據多年來市場反饋不斷進行技術升級和改良得來。具有操作步驟少,實驗快捷,RNA產量純度高,充分滿足后續實驗要求的需要,適用提取樣品普遍等特點。產量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度:OD值一般在1.9以上。得到的RNA無DNA污染,可直接用于反轉錄,實時熒光定量PCR(尤其對RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續實驗。1、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個實驗操作步驟簡化快捷從時間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取...
總RNA的定義:總RNA=mRNA+tRNA+rRNA,即:總RNA就是指mRNA、tRNA、rRNA的總和。這是在還沒有發現lncRNA等microRNA的時候的概念。但是卻被各大公司默認的概念,一直延續至今。所以各位可以去各大公司的網站,看一看總RNA提取試劑盒案例提供的RNA電泳圖,只有表示總RNA的2條帶——28s和18s;表示microRNA的5s帶,要不沒有,要不很弱。那么mRNA在哪里呢?從RNA電泳圖上能不能看到呢?真正成熟的mRNA,主要集中在28s和18s之間和上下的熒光背景(一般每條基因mRNA量很少,所以,整體一般看不到明顯帶,只表現為28s和18s中間和上下的連續的涂...
動物細胞RNA提取:1、懸浮細胞:可直接離心后棄掉培養基,用無菌PBS清洗1~2遍后,再用適量PBS懸浮起來,然后再加入裂解液進行裂解。千萬不要完全棄掉液體后,往沉淀細胞里直接加入裂解液,這樣會使外表層的細胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細胞外側,從而限制沉淀內部的細胞與裂解液的接觸,從而導致細胞裂解不徹底,降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細胞:棄掉培養基后,用PBS洗1~2次,然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養皿,把細胞吹下來,轉移到無RNA酶的EP管中,加裂解液進行提取。3、貼壁細胞:需要先用胰酶消化,然后收集到無RNA酶的EP管中,離心去其上清,用PBS洗1~2次,去除多...
總RNA提取試劑,適用于動植物細胞或組織及細菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。獲得的RNA可直接用于Northern雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase保護實驗,RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。該試劑可用于100次總RNA提取(10平方厘米細胞或100mg組織)。總RNA提取試劑注意事項:1,RNA提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應保證無污染無RNA酶。操作中應小心,防止外源性RNA酶污染樣品導致RNA樣品降解。2,試劑中含有酚等有害物質,注意個人防護。自備新開封或專門氯仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。能迅速破碎細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶。鄭州RN...
RNA的提取:眾所周知,Trizol是一種RNA提取試劑,內含異硫氰酸胍和酚等物質,能迅速破碎細胞和溶解細胞中的其他成分,壓制細胞釋放出核酸酶,維持細胞中RNA的穩定性,我們可以在反應物中加入Trizol后搖勻,在加入氯仿離心,這樣的話我們的RNA就進入了水相中,再用異丙醇沉淀水相中的RNA,即可達到提取總RNA的目的了。首先我們需要稱取一定量的預處理好的廢酵母配10%左右的酵母溶液,在一定溫度下,加入一定濃度的氯化鈉,之后加入NaOH溶液調節反應的pH,攪拌抽提一定時間后,離心分離上清液,調節pH至等電點,經酒精沉淀獲得核糖核酸,用水定容至100mL取1m適當稀釋,調pH7.0,這樣的話RN...
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒1、高純度:試劑盒的進口吸附柱具有的專一吸附特性和強吸附力。三管齊下保證所提取RNA的產量和純度,前期得到的高質量RNA才能保證后續實驗成功,尤其是對熒光定量PCR實驗等。2、無DNA污染可直接用于熒光定量PCR:目前市面上的試劑盒大多提出的RNA會出現DNA污染其結果嚴重影響后續實驗,特別是非常靈敏的熒光定量PCR的實驗。一些市面上單獨賣的去DNA污染的試劑,效果不穩定,去除DNA污染不徹底。本產品操作簡單,去除DNA徹底,得到的RNA樣品可直接用于熒光定量PCR,反轉錄等各種后續實驗。拭子RNA提取試劑的選擇?對離心柱法而言,拭子核酸得率的高低。廈門成都RN...
總RNA提取試劑,適用于動植物細胞或組織及細菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。獲得的RNA可直接用于Northern雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase保護實驗,RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。該試劑可用于100次總RNA提取(10平方厘米細胞或100mg組織)。總RNA提取試劑注意事項:1,RNA提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應保證無污染無RNA酶。操作中應小心,防止外源性RNA酶污染樣品導致RNA樣品降解。2,試劑中含有酚等有害物質,注意個人防護。自備新開封或專門氯仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采用變性...