斑馬魚敲除品系成功案例1、基因分析分析目的基因的保守結構域；2、靶點篩選設計4個gRNA靶點，PCR檢測包含靶點的區域真實序列，顯微注射驗證靶點效率；3、大規模注射養殖F0Cas9pro+gRNA共注射，共養殖F0約80條用于后期Founder篩選；4、Founder篩選F0代斑馬魚與野生型外交，收集48hpf的F1胚胎抽取基因組，PCR鑒定，測序結果在靶點位置出現雙峰的認為產生突變，然后TAclone驗證其可能產生的突變方式；5、F1代篩選F1代斑馬魚剪尾篩選，TAclone驗證突變方式：斑馬魚實驗環境毒理學評價。斑馬魚服務標準

斑馬魚模型現已在歐美國家廣泛應用于人類疾病模型研究、新藥篩選、藥物毒性與安全性評價。目前國際上已有19個基于斑馬魚模型研發的藥物（包括老藥新用）已獲得美國FDA的臨床實驗許可或上市許可，如PGE2、Lenaldekar、Thalidomide和Rosuvastatin等。諾華、輝瑞、羅氏、默克和阿斯利康等跨國醫藥巨頭公司均通過自建或合作方式用斑馬魚進行藥物早期研發，極大地推動了斑馬魚模型在藥物研發應用中的標準化和規范化進度。由多個不同實驗室進行的實驗結果表明，斑馬魚模型對藥物心血管毒性、發育毒性和胃腸道毒性等的評價結果與人體實驗結果的一致性平均達到了80%以上（表2），按照歐洲選擇性分析方法評價中心（ECVAM）的評價標準，大部分的預測準確率已達到了良好（75-85%）或***（85%）的水平。斑馬魚飼養技術斑馬魚試驗都需求哪些設備？

身體透明，斑馬魚在發育的前7天身體透明，可直接觀察內部***。結合***染料、抗體、核酸探針等方法能夠觀察自由活動的或者固定后的斑馬魚***樣本，這種直接的觀察為自動化藥物篩選和藥物靶***鑒別奠定了堅實有利的基礎。斑馬魚和人類的疾病信號轉導通路高度保守。斑馬魚體內存在的人類同源基因比例高達87%，某些疾病相關基因與人類基因保守性高達99%,這意味著在其身上做藥物實驗所得到的結果在多數情況下也適用于人體。在已知生物中，魚類是**早具備獲得性免疫系統的綱。這就使得對斑馬魚免疫系統的研究成為人們了解非特異性免疫系統和獲得性免疫系統進化與功能相互關系的重要工具。這個獨特的免疫系統進化地位還賦予了斑馬魚作為免疫學研究模式生物的另一重要優勢，即其成體可以在沒有胸腺、淋巴細胞生成的情況下存活傳代。

中國的斑馬魚技術發展從2010年之后進入了快車道，全國首屆斑馬魚學術研討會該年在杭州召開，同年，中國**斑馬魚技術服務公司環特生物在杭州成立。2011年，斑馬魚模型和技術研究被列入中國科技部“重大新藥創制”專項十二五實施計劃。2012年，中國國家斑馬魚資源中心（CZRC）成立，***本系統闡述斑馬魚模型評價藥物安全性技術方法的專著也在同一年由Willey出版社出版。2013年，較早基于斑馬魚研究獲得的候選藥物進入美國臨床Ⅱ期研究，中國國內***將斑馬魚臨床前藥理學評價資料用于CFDA創新藥物臨床試驗申報。斑馬魚模型和技術研究。

作為一個良好的模式生物，斑馬魚為人類生理學的發展做出了貢獻。同樣，人類不能忘記斑馬魚的付出。希望我們每個人能夠給予斑馬魚應得的尊重，也同樣祈禱人類能夠利用斑馬魚開展更多有價值的實驗。環特生物，依托斑馬魚實驗生物檢測技術，為客戶提供產品和質控解決方案。主要應用：臨床前研究、產品功效及安全性評價、藥物高通量篩選、毒性試驗、水質測定、斑馬魚技術授權培訓、斑馬魚實驗室建設及斑馬魚養殖系統等。環特生物已通過國家CNAS、CMA資質認證及AAALAC國際認證，并建立生物評價研究中心標準GLP實驗室。先后榮獲德國紐倫堡,俄羅斯,英國,中國四大國際發明展金獎、國家高新技術企業等榮譽，并與中國農科院質標所聯合成立"農業農村部農產品標準研究中心生物評價實驗室"。斑馬魚的轉化毒理學。斑馬魚行為實驗平臺

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