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人血小板裂解液過濾

來源: 發布時間:2022-09-15

ELAREMPrime血小板裂解液在標簽上的有效期內都是穩定的。ELAREMPrime在使用前儲存在-20°C或更低溫度調節下時穩定性比較好的。解凍后,建議分裝并重新冷凍未使用的ELAREMPrime在-20°C下。應避免反復凍融。無菌ELAREMPrime為無菌加工工藝,微生物培養為陰性。質量控制測試由經過認證的第三方測試實驗室完成。可追溯性和預防措施ELAREMPrime是從經過EMA授權的**中心的健康捐獻者來源的血小板單位生產而來的。獻血者均通過歐盟現行的獻血者資格準則的資格審核。  血小板裂解液中的沉淀是怎樣形成的?人血小板裂解液過濾

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MSCs在添加10%血小板裂解液和不同濃度肝素的培養基中培養7天,隨后使用MTT法評估增殖。脂肪組織源性間充質干細胞(AT-MSC)和骨髓源性間充質干細胞(BM-MSC)培養的過程中,如果使用的UFH濃度低于0.61IU/mL或者使用Enoxaparin(LMWH)濃度低于0.024mg/mL(2.4IU/mL)時培養液均呈現凝膠狀態(灰色背景),而肝素濃度過高則對細胞增殖的負面影響明顯且以劑量依賴的方式提高。備注肝素濃度單位換算:肝素濃度國際單位(IU)衡量,1IU國際單位是指在規定的條件下,將1ml全血延長凝血3分鐘所需的量:1mg大約相當于100IU的肝素。 制備血小板裂解液授權代理商GMP等級的血小板裂解液不含動物源成分的。

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FBS已經成為細胞培養領域的金標準--我們的行業持續地嚴重依賴FBS。但是FBS價格的上漲和波動依賴于外部的因素。**預計,供需很快就會出現不匹配。因此,對無動物源細胞培養產品的需求正在逐年增加。為此,我們開發了ELAREMPrime血小板裂解液這款兼具優良性能和穩定價格的無動物源細胞生長添加劑。ELAREMPrime血小板裂解液提供了穩定的數據,無需進行批次間驗證。細胞生長性能可以媲美FBS細胞培養添加劑。因此,ELAREMPrime血小板裂解液可以確保以一種簡單且據有價格吸引力的方式將細胞培養切換到無動物血清的條件。 

細胞培養基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎培養基(即MEMα、GlutaMAX補充劑、無核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細胞培養基。3.應在完全細胞培養基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號PL-SUP-500-XF).4.完整細胞培養基可在4°C下儲存,并穩定約4周儲存和穩定性ELAREMPrime在標簽上注明的失效日期之前是穩定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進行長期儲存)冷凍儲存時穩定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應避免ELAREMPrime的重復凍融循環,因為這會導不溶性顆粒形成的增加。使用時,只需預熱一份完整的細胞培養基,并將剩余的培養基冷藏在4-8°C。  血小板裂解液進口是不是很難。

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血小板裂解液主要成分為人血小板裂解液,含有較高濃度的生長因子等細胞培養必須物質,在體外細胞培養中可代替胎牛血清和自體血清。人源血小板裂解液就是直接將人類來源血小板細胞經過連續的反復凍融裂解后,進一步提純這些血小板脫顆粒的商品。血小板裂解液(platelet lysate,PL)是自體或異體血小板富集物經細胞裂解后的產物,已經被諸多研究推薦作為胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的替代品,應用于間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSC)的大規模擴增培養。GMP等級的血小板裂解液是不含動物源成分的。Merck血小板裂解液的方法

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為了排除肝素對于細胞增長的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關。我們對不添加防腐劑的肝素進行了相同實驗,結果對AT-MSC和BM-MSC細胞增殖抑制趨勢相同。在隨后的傳代培養到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時累積細胞群體倍增指數(cPD)較高。CFU-F的塑料粘附生長性能是MSCs培養的先決條件,在96孔板中通過有限稀釋的方法結合泊松統計進行CFU-F試驗,顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時明顯降低。這些結果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報道的其他研究結論一致。 人血小板裂解液過濾

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