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重慶高鹽核酸酶

來源: 發布時間:2024-03-01

SAN HQ高鹽核酸酶發揮酶活性的條件比較廣。例如,該酶適宜的鹽濃度(NaCl)范圍是400mM-600mM,能耐受高達1M NaCl濃度。適宜反應溫度為25℃-37℃,能耐受4℃-38℃。Mg2+濃度大于1mM即可,在5-20mM范圍即可表現更高活性。跟全能核酸酶類似,SAN HQ高鹽核酸酶也是一款堿性核酸酶,其適宜pH為8.0-8.9,能耐受6.8-9.5。為了達到更高酶活性,可以通過調節pH實現。鑒于SAN HQ的耐受性,可以用于很多應用,如大規模生產、蛋白純化、蛋白組學等。在如抗體、病毒載體藥物等的生產工藝流程中,核酸雜質的去除至關重要。重慶高鹽核酸酶

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ArcticZymes Technologies提供獨特特性的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases,SANs)系列產品,主要包含SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶。這兩款酶都是非特異核酸內切酶,跟Benzonase一樣能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈、線狀、環狀)的DNA和RNA;都來自于深海microbes,通過Pichia pastoris發酵生產得到。這兩款酶的區別在于發揮酶活的適宜鹽濃度不同,——M-SAN HQ中鹽核酸酶的適宜鹽濃度在175mM-250mM,而SAN HQ高鹽核酸酶的適宜鹽濃度在400mM-600mM。廣東SAN HQ TF高鹽核酸酶70921-160US FDA指南要求:重組生物制品終產品中,核酸雜質含量低于10ng/dose。

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ArcticZymes Technologies致力于提供高質量產品,具有良好的批間一致性、穩定可靠的質量、及時的文件及技術支持。ArcticZymes所有產品的開發、生產及銷售等都符合ISO13485:2016質量管理體系標準;鑒于生物制品更嚴格的質控要求,廠家對鹽活性核酸酶系列產品(Salt Active Nucleases,SANs)的生產及質控,在符合ISO13485:2016體系基礎上,增加了cGMP相應要求,如生產用原輔料是Non-animal和Non-plant來源的,終產品經過0.22μm過濾sterilization,放行檢測包括microbes、fungus及內毒檢測等,所有標準符合USP-EP要求。

有研究發現,桿狀病毒表達載體體系BEV生產的rAAV發生了與293生產體系不同的衣殼蛋白翻譯后修飾(post-translationalmodifications,PTMs)。這一差異是否會影響載體趨向性和轉導效率還需要進一步驗證。除此之外,桿狀病毒多重infection會導致載體蛋白VP1、VP2和VP3比例不一致。盡管如此,BEV/Sf9系統仍然是一種頗有吸引力的大規模臨床級載體生產策略。隨著以后對基因藥物需求的增加,AAV載體的需求量也會與日俱增,而BEV系統能夠降低AAV的成本,未來還是很有發展潛力的。ArcticZymes Technologies成立于20世紀80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)。

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已有文獻表明,高鹽濃度能夠破壞染色質結構,讓核小體解聚。在能耐受高鹽條件的病毒載體(如AdV/AAV等)生產中,高鹽濃度使宿主細胞DNA(HCD)解聚,讓核酸片段暴露,提高了核酸片段的可及性。而ArcticZymes的SAN HQ高鹽核酸酶能夠在高鹽條件下更好發揮酶切活性,作為高鹽條件下去除HCD的更好選擇。SAN HQ高鹽核酸酶的出現,讓一些通過常規方法很難解決的工藝問題得到高效解決,不僅提高了生產效率,降低了藥物生產成本,更拓寬了生物工藝生產的邊界。SAN HQ應用于生產工藝流程中,有效去除核酸污染;截止目前,已用于全球20+臨床項目中。河北500mM鹽濃度條件高鹽核酸酶70921

SAN HQ提高核酸污染去除效率,同時提高目標產物產量。重慶高鹽核酸酶

經典的慢病毒載體(LV)的生產工藝如下,——三質粒系統瞬時轉染HEK293細胞系,轉染24小時后LV由轉染陽性細胞生產并排出到培養上清液中;收獲上清培養液后,加入核酸酶去除HCD污染,通過澄清步驟去除大的細胞碎片等雜質;下游純化步驟分離LV載體,純化方法包括切向流過濾TFF、色譜純化及超速離心;純化后的LV病毒顆粒經過無菌過濾,更換到優化后的配方中,灌裝并冷凍保存。每批Car-T生產時取對應量的LV病毒,切忌反復凍融,否則LV病毒會失活。重慶高鹽核酸酶

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