外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。現在外泌體特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。外泌體被認為是疾病的生物標志物和預后因子，具有重要的臨床診斷和治理意義。腹膜透析液外泌體miRNA測序

已經有許多關于外泌體作用的報導，根據這些現象實驗中，從體液和培養上清中高純度提取的高純度外泌體，在活內是否真的能發生作用尚未能確定。確認外泌體生理作用的單獨方法就是明確外泌體的釋放機制，通過促進或壓制釋放機制，分析會引起何種生理作用，這是進一步研究的發展方向。甚至活內的外泌體動態（哪個外泌體遷移至何處）也會成為今后需要努力研究的重要課題。實際上，用PS親和法提取的人白血病細胞釋放的外泌體，其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較，PS親和法提取的外泌體，其蛋白特異性檢測可高出10~100倍以上，幾乎沒有混入外泌體以外的蛋白，回收量高，操作重復性好。腹膜透析液外泌體miRNA測序隨著外泌體的功能逐漸被發現，近年來，應用這些功能的醫治法也在被開發出來。

外泌體是具有雙層脂膜的囊泡結構,其穩定性較好,可保護內部生物分子免受體液中各種酶的影響,從而保持其完整性和生物活性。外泌體被提取后一般懸浮于磷酸鹽緩沖液。目前,常用的儲存方法為冷凍保存,但是冷凍保存可能會導致外泌體形狀與物理性質的改變,也可能導致多層囊泡的形成和聚集,反復凍融會導致外泌體表面分子的生物特性、含量和標志物組成發生變化。血清中包含外泌體在內的細胞外囊泡DNA在不同儲存環境可保持穩定,血漿存放于4°C時其RNA會明顯降解,在–20°C下長期保存也會導致血漿中外泌體總RNA降解,但miRNA卻十分穩定,這也提示了外泌體miRNA作為生物標志物的潛力。

細胞分泌外泌體的過程一般分為三個階段:(1)質膜內陷,形成早期內吞小泡;(2)內吞小泡向內萌發成熟,形成多囊泡體;(3)多囊泡體與質膜融合,并釋放出囊泡內容物,形成外泌體。外泌體具有獨特的理化性質,其密度為1.13~1.19g/mL,由平均厚度小于5nm的雙層脂膜所包裹,具有典型杯狀形態,呈現為扁平球形。外泌體表面富含多糖鏈,其質膜主要由溶血磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、膽固醇、神經酰胺和鞘磷脂構成,另有與細胞來源相關的部分特殊脂類。外泌體可攜帶蛋白質、核酸和脂質等生物活性大分子,其中主要為蛋白質,且大部分蛋白為所有來源外泌體所共有,只有小部分與其來源有關,為其分泌細胞的特有蛋白,能夠反映分泌細胞的類型和生理病理狀態。除此之外,外泌體可攜帶大量mRNA和miRNA等核酸,并將其運輸到靶細胞,發揮相應的生物學功能。在過去幾年中，有幾個實驗室報道了各種細胞類型的外泌體分泌，并討論了其潛在的生物學功能。

利用蛋白質免疫印跡和酶聯免疫吸附分析技術可以對外泌體標志性蛋白質進行定性定量分析。其中蛋白免疫印跡是外泌體的經典表征手段之一，操作時往往需要細胞裂解液作為陰性對照。常用的外泌體標志性蛋白質包括四跨膜蛋白質CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2，尿液中)和凋亡誘導因子6相互作用蛋白(Alix)等，內參蛋白質可以是肌動蛋白(βActin)或甘油醛－3-磷酸脫氫酶，陰性對照蛋白可以是阻抑素(PHB，線粒體標志蛋白)或鈣聯結蛋白Calnexin。在酶聯免疫吸附析法中，外泌體裂解液通過固載有抗體的固相基質，隨后與檢測抗體共孵育。兩種方法均存在操作繁瑣、耗時長的問題，相比較而言，酶聯免疫吸附分析法比蛋白質免疫印跡法更加快速，適用于高通量分析。外泌體本身的惰性相當高，但它們與細胞膜融合可將所攜帶的物質和信號傳遞到受體細胞并改變其生物學功能。細胞外泌體提取試劑盒公司

有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻。腹膜透析液外泌體miRNA測序

一類外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調節外泌體膜與受體細胞的融合，有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現于早期以及回收的核內體中，RAB7和RAB9主要出現于晚期的核內體。現有大量的研究發現外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯蛋白（包括膜聯蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運輸的四跨膜蛋白家族、熱休克蛋白家族。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶、核糖體蛋白（RPS3）、信號轉導因子（黑色素瘤分化相關因子,ARF1,CDC42,人類紅細胞膜整合蛋白,SLC9A3R1）、粘附因子、細胞骨架蛋白以及泛素等。腹膜透析液外泌體miRNA測序