痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型【目的】痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型建立【動(dòng)物】SPF級(jí)SD大鼠，雄性，周齡6~8W，體重：200~250g【方法】1、大鼠麻醉，顱頂脫毛備皮；2、大鼠腦定位儀固定大鼠，顱頂正中切口，長(zhǎng)度約2cm開口暴露前囟及矢狀縫；3、縫線將皮膚左右分開固定，前囟后10mm、矢狀縫左側(cè)；4、微量注射器移至開孔處修正骨孔，注射器垂直向顱內(nèi)插入，緩慢注射無水乙醇15ul，注射完移除注射器，棉球壓迫止血；5、縫合創(chuàng)口后維持25°體溫，等待蘇醒，觀察大鼠狀態(tài)。【觀察】術(shù)后3天模型大鼠攝食減少、右側(cè)肢體跛行、右前肢不負(fù)重、右前肢及右前爪屈曲痙攣明顯，順時(shí)針繞圈前行，2周后癥狀減輕，大鼠于術(shù)后4周開始給予動(dòng)物行為學(xué)觀察【檢測(cè)】HE檢測(cè)對(duì)比觀察腦組織是否出現(xiàn)細(xì)胞水腫,排列不規(guī)則,結(jié)構(gòu)紊亂,核固縮,染色體分布不均勻,變性壞死,核糖體消失,白質(zhì)軟化灶和空囊形成,小膠質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn),星形膠質(zhì)細(xì)胞肥大、增生等病理表現(xiàn)。曠場(chǎng)測(cè)試（OpenFieldTest）：實(shí)驗(yàn)用于評(píng)估大小鼠的活動(dòng)性和探索性行為。動(dòng)物被放置在一個(gè)較大的開放性場(chǎng)地內(nèi)，然后記錄它們的運(yùn)動(dòng)軌跡和停留時(shí)間。用來評(píng)估動(dòng)物的活動(dòng)性、焦慮程度、壓力反應(yīng)等。水迷宮測(cè)試。博來霉素誘導(dǎo)急性肺損傷小鼠模型。云南腦定位動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)室

動(dòng)物模型常用的HBV小鼠模型：可簡(jiǎn)單分為5類：（1）轉(zhuǎn)基因小鼠，將HBV基因組片段直接轉(zhuǎn)入小鼠胚胎中，小鼠模型可終生表達(dá)HBV；（2）水動(dòng)力注射模型，將HBV質(zhì)粒DNA高壓注射到小鼠體內(nèi)；（3）AAV載體轉(zhuǎn)染模型，通過腺相關(guān)病毒攜帶HBV基因組進(jìn)入小鼠的細(xì)胞中；（4）人鼠嵌合肝臟小鼠模型，是目前完備的HBV模型，可以完全再現(xiàn)HB、復(fù)制、包裝和釋放及再的整個(gè)生命周期，可以產(chǎn)生關(guān)鍵的cccDNA；（5）肝臟和免疫系統(tǒng)雙人源化小鼠模型，理想的肝病研究模型。這5類模型各有優(yōu)缺點(diǎn)裸鼠動(dòng)物模型臨床上平時(shí)不易見到的疾病可用動(dòng)物隨時(shí)復(fù)制出來。

模型研究：研究發(fā)現(xiàn)，小鼠肝臟特異性過表達(dá)尿激酶型纖溶酶原蛋白（urokinase-typeplasminogenactivator，uPA）可引起肝細(xì)胞壞死，即uPA轉(zhuǎn)基因小鼠可以作為肝損傷模型。但是uPA轉(zhuǎn)基因鼠的缺點(diǎn)是死亡率高，難于繁殖。基于此，北京維通達(dá)利用基因工程方法開發(fā)了可調(diào)控的更接近生理性條件的肝損傷模型Tet-uPA轉(zhuǎn)基因小鼠。這種小鼠轉(zhuǎn)入了兩個(gè)基因片段，Alb-rtTA和TRE-uPA，構(gòu)成在肝細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)的Tet-On系統(tǒng)調(diào)控的uPA轉(zhuǎn)基因結(jié)構(gòu)。Tet-uPA小鼠在不誘導(dǎo)的情況下是完全健康狀態(tài)，可以正常繁殖；當(dāng)用四環(huán)素類藥物Dox誘導(dǎo)時(shí)，uPA在肝細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，引起肝損傷。既可以用高劑量Dox誘導(dǎo)產(chǎn)生急性肝損傷甚至肝衰竭的表型，也可以用較低劑量持續(xù)誘導(dǎo)成為慢

驗(yàn)動(dòng)物本模型可用大、小鼠、兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模，本文小蟲主要介紹在小鼠上的造模過程。8周齡，24g體重的C57BL/6小鼠（二）試劑耗材1、實(shí)驗(yàn)試劑TNBS、橄欖油、無水乙醇、、1mL注射器、軟管（可用膽汁插管的軟管）、渦旋儀2、試劑配制首先將TNBS溶于水，配制成5%TNBS（w:v）水溶液，然后配制橄欖油與比例為1:4（v:v）的均勻混合溶液，使用該混合液將5%的TNBS稀釋為1%的TNBS溶液（或首先將TNBS溶于水，配制成5%TNBS（w:v）水溶液，然后使用無水乙醇將5%的TNBS稀釋為1%的TNBS溶液）。3、造模采用復(fù)合改良法造模,是目前 IgA 腎病中較為可靠、穩(wěn)定、成功率高,且病理、臨床指標(biāo)近人類 IgA 腎病的動(dòng)物模型。

轉(zhuǎn)基因小鼠對(duì)黑色素瘤發(fā)生的分子途徑的理解有重要意義。此外，轉(zhuǎn)基因小鼠是可靠且可重現(xiàn)的模型，用來評(píng)估受損基因?qū)谏亓錾飳W(xué)的影響。應(yīng)用：基因工程小鼠模型可用于研究特定基因組改變?cè)诤谏亓龅陌l(fā)生和發(fā)展的重要性及藥物的靶向。1Lum－/－基因敲除小鼠Lumican是一種富含亮氨酸的小蛋白聚糖(smallleucine-richproteoglycan，SLRP)，為膠原原纖維形成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。黑色素瘤中Lumican表達(dá)降低與浸潤(rùn)相關(guān)。方法：有研究者利用BamHI建立的克隆衍生物導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，建立Lum－/－轉(zhuǎn)基因小鼠。該模型可提供與發(fā)生和轉(zhuǎn)移相關(guān)機(jī)制及可見變的進(jìn)展，以及確定負(fù)責(zé)的黑色素瘤進(jìn)展的基因。2Tyr::N-RasQ61K轉(zhuǎn)基因小鼠方法：有研究者使用突變的人N-ＲasQ61K和SV40剪接以及聚腺苷酸化序列生成Tyr::N-ＲasQ61K構(gòu)建體，并注射到卵母細(xì)胞中，建立Tyr::N-ＲasQ61K轉(zhuǎn)基因小鼠。3BrafV600E轉(zhuǎn)基因小鼠模型有研究者使用LoxP-stop-LoxP(LSL)/Cre重組酶技術(shù)從內(nèi)源性Braf基因中誘導(dǎo)BrafV600E表達(dá)，建立BrafV600E轉(zhuǎn)基因黑色素瘤小鼠模型。總結(jié)目前已有三種不同的黑色素瘤小鼠模型，但由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人類基因組、基因調(diào)控、細(xì)胞類型、結(jié)構(gòu)與組成等方面是有一定差別。合理建立周圍性面癱動(dòng)物模型對(duì)進(jìn)一步深入研究具有重要意義。裸鼠動(dòng)物模型

動(dòng)物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面。云南腦定位動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)室

糖尿病足大鼠模型【目的】構(gòu)建糖尿病足大鼠模型；【材料】1、材料：STZ藥物、注射器、檸檬酸、檸檬酸三鈉；2、試劑配制：1）檸檬酸納緩沖液配制：A液十B液=1:，PH=；A液:檸檬酸mL；B液:朽檬酸三納2）STZ液配制:55mg/kg（避光，現(xiàn)配現(xiàn)用10min內(nèi)注射)；3、糖尿病模型構(gòu)建方法：1）大鼠術(shù)前禁食12h；2）按55ug/g注射.連續(xù)3天注射，對(duì)照組注射檸檬酸緩沖液，造模組注射STZ液，注射后不禁水、禁食2-4h；3）STZ注射結(jié)束5天后空腹測(cè)血糖，血糖值高于12mmol/L選入實(shí)驗(yàn)組；【方法】方法一：細(xì)菌懸浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周時(shí)，后足背側(cè)注射l0ul金黃色葡萄球菌懸浮液，造成糖尿病肢端的動(dòng)物模型；2、后續(xù)觀察傷口情況；方法二：皮膚劃傷造模1、三周后糖尿病大鼠后足足背手術(shù)剪做一個(gè)圓形皮膚創(chuàng)口，直徑5mm；2、后續(xù)每日觀察傷口情況，作好記錄。云南腦定位動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)室