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來源: 發(fā)布時間:2023-09-09

生物緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時防止PH值改變的溶液,PH緩沖系統(tǒng)主要用來維持生物的正常PH值,在生理環(huán)境中起到重要的作用。在生化研究實驗中,也常常使用緩沖液來維持實驗體系的酸堿度。由于不同實驗中所需PH值范圍不同,也有很多生物緩沖液的種類可供選擇,并且在不同的領域都各有優(yōu)缺點。TRIS-HCL(氨丁三醇)緩沖液TRIS-HCL緩沖液在生物化學研究中使用比較***,本身為弱堿性,有效PH值范圍在7.5-8.5。優(yōu)點:堿性較強,可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的范圍PH緩沖溶液。對生物化學過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。缺點:PH受濃度影響較大,稀釋10倍PH變化大于0.1;溫度效應大,如4℃時PH=8.4,37℃時PH=7.4。(氨丁三醇)注射用TRIS-HCl中美雙報。北京登記號TRIS現(xiàn)貨

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Tris-HCl緩沖液的緩沖原理為:Tris中的-NH2與HCl結合生成Tris·HCl鹽。季銨基團Tris·H+與Tris形成緩沖對,溶液中存在Tris·H++H2O←→Tris+H3O+平衡關系,憑借該平衡移動來發(fā)揮緩沖作用。其緩沖范圍一般為7.0~9.0。由于Tris對生化過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀,所以在DNA、蛋白質等生物大分子實驗中經常應用,Tris-HCl緩沖溶液可以做DNA、蛋白質的溶解液或提取液,也是DNA相關研究實驗中的重要緩沖液,如DNA的捕獲與釋放、染色體的特異性標記等方面。具體應用方面,目前已上市的**mRNA疫苗其中一款(mRNA-1273®,Moderna,2020)選用Tris作為緩沖體系。已上市抗體藥物中也有Tris的應用,如全球較早全人源的腫瘤壞死因子拮抗劑注射用依那西普(Enbrel,恩利)。四川輔料TRIS批量大家想要了解更多tris相關資訊,敬請關注AVT。

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Tris緩沖體系廣泛應用生物制劑研發(fā)與生產過程中,例如目前已上市的兩款mRNA**疫苗均選用Tris/Tris-HCl作為其制劑緩沖體系,此外該緩沖體系還***用于抗體蛋白純化等生物制劑生產環(huán)節(jié)。艾偉拓產品團隊在此向您推薦一種操作簡便且復現(xiàn)性較好的緩沖液配制方法:使用氨丁三醇(Tris)及鹽酸氨丁三醇(Tris-HCl)固體粉末進行配制。使用時,可根據目標濃度及pH,計算并直接稱取兩種固體粉末混合,溶解定容,至于兩種固體粉末的用量如何確認,您可以參考以下實驗步驟以及艾偉拓實驗室實測值,通過一個簡單的預實驗進行確認:

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該公司的研究指出,在攜帶mRNA的LNP生產過程中,需要使用不同手段降低加合物的生成,這可能帶來多種益處,包括改善產品保質期,讓產品能夠在更高的溫度下儲存,并且維持產品的活性和制造批次之間的一致性。比如,Moderna指出使用Tris緩沖液可以減少加合物的生成,允許mRNA產品在2-8℃環(huán)境下的長期儲存。相關反應機理概括如下:①已知核酸堿基可以與醛類物質發(fā)生反應②LNP組分中,可電離脂質的叔胺氮被氧化,形成大量N-氧化物③在酸性緩沖液中,N-氧化物降解生成二級胺和醛④醛類物質與mRNA分子的堿基發(fā)生反應(反應機理詳見①),影響mRNA分子的穩(wěn)定性及蛋白翻譯水平。⑤TRIS作為一種醛類清除劑,可以與生成的醛類物質反應,降低mRNA堿基與醛類物質發(fā)生反應值得一提的是,TRIS作為甲醛清除劑,已有較為***的應用,且不限于生物醫(yī)藥領域。了解更多氨丁三醇相關資訊,敬請關注艾偉拓AVT!廣西TRIS現(xiàn)貨

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這兩種緩沖液常用于核酸電泳實驗中。磷酸鹽緩沖溶液一般的有活性的生物制劑都要用磷酸鹽緩沖溶液來稀釋。我們知道使用領域Tris緩沖溶液在電泳緩沖液中同甘氨酸構成緩沖體系穩(wěn)定pH值;在凝膠中使用Tris-HCl緩沖體系穩(wěn)定pH值;Tris緩沖液的低離子強度特點還可用于線蟲的中間纖維的形成;在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”,可用于DNA的穩(wěn)定和存儲;將調節(jié)pH值的酸溶液換成乙酸,獲得“TAE緩沖液”,換成硼酸可獲得TBE緩沖液。北京登記號TRIS現(xiàn)貨

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