HEPES緩沖體系在生物化學和細胞生物學研究中扮演著至關重要的角色。以下是對HEPES緩沖體系的詳細介紹：一、定義與組成HEPES，全稱為N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸，是一種非離子兩性緩沖劑。它能夠在不同的pH條件下平衡氫離子濃度，從而維持溶液pH的穩定。二、特性與優勢***的緩沖范圍：HEPES的有效緩沖范圍在pH6.8~8.2之間，覆蓋了大多數生物實驗和細胞培養所需的pH環境。CO2無關性：與許多其他緩沖液不同，HEPES的緩沖能力不受CO2濃度的影響，這使得它在開放式培養或細胞觀察等實驗中具有獨特的優勢。低毒性：在適當濃度下，HEPES對細胞無毒性作用，能夠為細胞提供一個安全的生長環境。穩定性強：HEPES不易受溫度、光照和化學物質的影響，適合長期實驗和儲存。膜不透性：HEPES具有膜不透性，不會***改變細胞的滲透壓，避免了對細胞形態和功能的不良影響。國產注射用HEPES緩沖液CDE已登記狀態為A采購。四川HEPES使用注意事項

使用注射級氨丁三醇緩沖劑的注意事項：1.Tris緩沖液的pH值受溫度影響大，△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃時緩沖液的pH＝8.4，則37℃時的pH＝7.4，所以一定要在使用溫度下進行配制，室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃～4℃。2.Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大，緩沖液稀釋十倍，pH值的變化大于0.13.Tris在一定程度上與各種分子反應，包括RNA酶抑制劑，醛，酶，DNA以及常見金屬如Cr3+，Fe3+，Ni2+，Co2+和Cu2+等，在有些系統中會起抑制作用，在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用；4.Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2，配制的緩沖液要注意蓋嚴密封；5.Tris緩沖液對某些pH電極發生一定的干擾作用，需使用與注射級氨丁三醇溶液具有兼容性的電極；6.Tris緩沖液不適用于二喹啉甲酸（BCA）測定；7.吸入，攝入，皮膚吸收注射級氨丁三醇可造成傷害，操作時需戴好手套和護目鏡；8.作為蛋白緩沖液時，若后續工作需要質譜，則不適宜用注射級氨丁三醇，比較好換成其他質譜儀可耐受的緩沖液。重慶采購HEPES批量注射用HEPES緩沖液中美雙報實驗室大批量采購；

使用羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）緩沖體系時的注意事項由于哌嗪基團的存在，當羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）暴露于光線中時，會產生H2O2，這對培養的細胞或其它有生物活性的物體產生毒性，同時對氧化還原敏感的物質不宜共同使用，因此羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作為緩沖液的操作應盡量在避光條件下進行。羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）在生化領域常見的使用濃度為10-25mM，當濃度低于10mM時緩沖能力較弱，不能起到較好的緩沖效果，當濃度較高時對一些細胞可能具有毒害作用。艾偉拓長期穩定供應注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）等生物保護劑與緩沖鹽，GMP條件生產，中美雙報，供注射用，**內***，DNase&RNasefree，符合國際主流藥典標準，助力重組蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒載體疫苗、脂質體、單雙抗、抗體偶聯藥物等生物制劑生產與中外申報！

在電生理實驗中的關鍵作用?HEPES常用于膜片鉗實驗，其低離子強度特性可減少電流噪聲。建議與NaCl、KCl等電解質配合使用，終濃度不超過20 mM以避免膜電位干擾。HEPES緩沖液能穩定膜電位，減少因pH波動導致的通道活性變化。在神經元電生理記錄中，HEPES可替代碳酸氫鹽緩沖液，避免CO2逸出對記錄信號的干擾。HEPES的低金屬離子結合特性使其適合研究金屬離子敏感的通道蛋白。蛋白質純化中的緩沖選擇?HEPES緩沖液（pH 7.5）適用于離子交換層析，因其不與His標簽蛋白競爭結合鎳柱。但需避免與EDTA聯用，以防金屬離子沉淀。HEPES在蛋白質結晶中也常用作緩沖液，其低離子強度減少了對晶體生長的干擾。在蛋白質穩定性研究中，HEPES緩沖液能有效維持蛋白質的天然構象。HEPES還可用于蛋白質的等電點測定，因其緩沖范圍覆蓋了多數蛋白質的等電點區域。注射用CDE已登記HEPES。

注意事項濃度控制：根據實驗需求和細胞類型，嚴格控制HEPES的濃度。一般來說，培養液內含20mmol/L HEPES即可達到良好的緩沖效果。pH調節：在配制含有HEPES的培養基時，需要準確調節pH值至適合細胞生長的范圍內。儲存條件：配制好的含有HEPES的培養基應存放在適當的溫度下，避免長時間暴露于空氣中或受到污染。綜上所述，HEPES緩沖體系具有***的緩沖范圍、CO2無關性、低毒性、穩定性強和膜不透性等優勢，在細胞培養和其他生物化學研究中發揮著重要作用。通過合理控制HEPES的濃度和配制方法，可以維持細胞培養環境的pH穩定，提高細胞的生長和代謝效率。國內AVT穩定供貨注射級HEPES！四川HEPES使用注意事項

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Tris-HCL與HEPES（供注射用）緩沖液應用對比

**常用的緩沖液有很多，如磷酸鹽緩沖液、Tris-HCl緩沖液、HEPES緩沖液、氨基酸緩沖液等。不同的緩沖液差別液很大，***主要來對比兩種**常用的緩沖液：Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液各自的應用對比。

1、Tris-HCl緩沖液的應用Tris常用于蛋白或者核酸的緩沖液，其在電泳緩沖液中與甘氨酸構成緩沖體系，穩定電泳過程中的pH，由于其具有弱堿性，水溶液的pH在10.5左右，可通過添加HCl或者NaOH制備不同pH的緩沖液，根據緩沖理論，Tris緩沖液的有效范圍通常是pH7.0-9.2之間。此外，Tris還可以制備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物（磷霉素等）的中間物，在化妝品、醫藥、涂料以及合成中均有應用。應用于體內時，Tris作為一種不含鈉的氨基緩沖堿，在體液中與H2CO3結合，生成碳酸氫鹽。因此它能緩沖酸，而且能降低CO2張力，有糾正急性呼吸性酸中毒和代謝性酸中毒雙重效果，其作用較碳酸氫鈉快而強。HEPES緩沖液對細胞無毒性作用，它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍。使用時濃度為10-50mmol/L，一般培養液內含20mmol/LHEPES即可達到緩沖能力。在體外診斷、DNA/RNA提取、脂質體藥物等方面均有應用。

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