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四川羥乙基哌嗪乙磺酸HEPES使用注意事項(xiàng)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-09-24

HEPES(4-2-羥乙基醇-1-哌秦基-乙磺酸) 分子量為238.31,化學(xué)名:4-羥乙基哌口秦乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。HEPES是制備緩沖液的有機(jī)物質(zhì),為非離子兩性緩沖液,在pH 7.2 - 7.4范圍內(nèi)具有很好的緩沖能力。 ***用于細(xì)胞培養(yǎng),為了維持穩(wěn)定的生理pH值,20下的pKa為7.55。 HEPES用于保護(hù)冷凍酶溶液免受冷凍誘導(dǎo)的pH變化的影響。 考慮到HEPES的光毒性(暴露于環(huán)境光會(huì)產(chǎn)生過氧化氫),該緩沖劑配置溶液后,保存在黑暗的環(huán)境中,以便在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中正常工作。GMP條件下生產(chǎn)注射級(jí)HEPES。四川羥乙基哌嗪乙磺酸HEPES使用注意事項(xiàng)

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在RNA研究中的注意事項(xiàng)?HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高濃度會(huì)干擾逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。HEPES在RNA電泳中常用作緩沖液,其低離子強(qiáng)度減少了對(duì)RNA遷移的干擾。在體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中,HEPES緩沖液能維持反應(yīng)體系的pH穩(wěn)定。但需注意HEPES可能結(jié)合某些金屬離子,影響依賴金屬離子的RNA酶活性。HEPES溶液在光照下會(huì)生成過氧化物,需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌,并檢測(cè)過氧化物含量(如硫代硫酸鈉滴定法)。過氧化物會(huì)氧化敏感的生物分子,如硫醇基團(tuán)和某些熒光染料。長(zhǎng)期儲(chǔ)存的HEPES溶液應(yīng)分裝并避免反復(fù)凍融。商業(yè)化的HEPES粉末也應(yīng)避光保存,因其在光照下會(huì)逐漸降解。HEPES溶液的pH會(huì)隨時(shí)間緩慢變化,建議使用前重新校準(zhǔn)。黑龍江現(xiàn)貨HEPES批量注射用HEPES緩沖液中美雙報(bào)企業(yè)采購;

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?4. 在電生理實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵作用?HEPES常用于膜片鉗實(shí)驗(yàn),其低離子強(qiáng)度特性可減少電流噪聲。建議與NaCl、KCl等電解質(zhì)配合使用,終濃度不超過20 mM以避免膜電位干擾。?5. 蛋白質(zhì)純化中的緩沖選擇?HEPES緩沖液(pH 7.5)適用于離子交換層析,因其不與His標(biāo)簽蛋白競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合鎳柱。但需避免與EDTA聯(lián)用,以防金屬離子沉淀。光敏感性與儲(chǔ)存條件?HEPES溶液在光照下會(huì)生成過氧化物,需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌,并檢測(cè)過氧化物含量(如硫代硫酸鈉滴定法)。

羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)是一種不能輕易穿過生物膜的緩沖。 它適用于伊立替康脂質(zhì)體,因?yàn)樗梢栽诜€(wěn)定脂質(zhì)體外水相酸堿度為弱堿性的情況下,不改變內(nèi)水相酸性酸堿度。HEPES 的用量應(yīng)該在10-25mM 之間,10mM以下的用量會(huì)導(dǎo)致緩沖能力較弱, 25mM以上可能對(duì)一些細(xì)胞造成不良反應(yīng)。HEPES的使用以及操作應(yīng)盡量在避光的情況下進(jìn)行。這是因?yàn)樵跓艄庀?,HEPES會(huì)產(chǎn)生H2O2,而H2O2對(duì)活性的物體來說是有害的,這對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)造成一定的傷害。



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特性與優(yōu)勢(shì)***的緩沖范圍:HEPES的有效緩沖范圍在pH6.8~8.2之間,覆蓋了大多數(shù)生物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞培養(yǎng)所需的pH環(huán)境。CO2無關(guān)性:與許多其他緩沖液不同,HEPES的緩沖能力不受CO2濃度的影響,這使得它在開放式培養(yǎng)或細(xì)胞觀察等實(shí)驗(yàn)中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。低毒性:在適當(dāng)濃度下,HEPES對(duì)細(xì)胞無毒性作用,能夠?yàn)榧?xì)胞提供一個(gè)安全的生長(zhǎng)環(huán)境。穩(wěn)定性強(qiáng):HEPES不易受溫度、光照和化學(xué)物質(zhì)的影響,適合長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)和儲(chǔ)存。膜不透性:HEPES具有膜不透性,不會(huì)***改變細(xì)胞的滲透壓,避免了對(duì)細(xì)胞形態(tài)和功能的不良影響。艾偉拓HEPES的cas號(hào)是什么?天津試劑級(jí)HEPES批量

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使用注意事項(xiàng)pH調(diào)節(jié):在配制HEPES溶液時(shí),需要準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH值至適合細(xì)胞生長(zhǎng)的范圍內(nèi)。濃度控制:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和細(xì)胞類型,嚴(yán)格控制HEPES的濃度,避免過高或過低。一般來說,HEPES的使用終濃度為10~50mmol/L,其中20mmol/L HEPES足以滿足大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)的緩沖需求。避光操作:由于HEPES暴露于光線中時(shí)會(huì)產(chǎn)生過氧化氫,對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞或其他有生物活性的物體產(chǎn)生毒性,因此HEPES作為緩沖液的操作應(yīng)盡量在避光條件下進(jìn)行。與其他成分的兼容性:在配制細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí),需要注意HEPES與其他成分的兼容性。長(zhǎng)期穩(wěn)定性:配制好的HEPES溶液需要存放在適當(dāng)?shù)臏囟认?,確保其長(zhǎng)期穩(wěn)定性。綜上所述,HEPES作為一種高效、穩(wěn)定的緩沖液,在細(xì)胞培養(yǎng)和其他生物化學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。通過合理控制HEPES的濃度和配制方法,可以維持細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的pH穩(wěn)定,提高細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝效率。四川羥乙基哌嗪乙磺酸HEPES使用注意事項(xiàng)

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