對細胞的保護作用降低細胞毒性：某些化學物質在培養基中容易產生細胞毒性，影響細胞的生長和繁殖。HEPES能夠降低這些化學物質的細胞毒性，從而保護細胞免受損傷。形成保護層：HEPES分子還可以通過吸附在細胞表面，形成一層保護層，減少細胞間的摩擦和碰撞，降低細胞的損傷風險。這有助于提高細胞的生存率和實驗結果的可靠性。綜上所述，HEPES在細胞培養中發揮作用的主要原理是通過其兩性離子特性增加溶液離子濃度和滲透壓，以及通過其穩定的緩沖能力維持細胞生長所需的pH環境。此外，HEPES還能降低細胞毒性、形成保護層等，對細胞具有保護作用。這些特性使得HEPES成為細胞培養中不可或缺的緩沖劑之一。注射用HEPES國產緩沖液CDE已登記實驗室采購；湖南藥用HEPES批量

羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作為一種不易穿過生物膜的緩沖對，可以在穩定脂質體外水相pH為弱堿性的同時，不改變內水相酸性pH，非常適用于伊立替康脂質體。上述內外水相pH差異的問題，在EMA審評報告討論部分也有體現。EMA審評報告中提到，伊立替康脂質體藥物開發的重點是：選擇用于活***物負載的比較好抗衡離子選擇DSPC與脂質膜的膽固醇成分的比較好比例，這會影響其物理性質和保留活性物質的能力在脂質體中選擇脂質體雙層的MPEG-2000-DSPE組分，其存在于表面提供空間屏障以避免脂質體聚集選擇能夠保持比較好pH范圍的適當緩沖液輸液用濃縮液將緩沖液的選擇單列一條，可見其對伊立替康脂質體制劑的重要程度。江蘇高純HEPES批量注射用HEPES 中美雙報。

緩沖溶液在酸堿度環境、組成、緩沖原理和應用領域上存在一定差異。酸堿度環境差異：硼酸鹽緩沖溶液和Tris-HCl緩沖溶液適用于堿性環境。磷酸鹽緩沖溶液和HEPES緩沖溶液適用于弱酸性、弱堿性或接近中性的環境。緩沖溶液組成差異：硼酸鹽緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液和磷酸鹽緩沖溶液通常由兩種物質配置而成。HEPES緩沖溶液則由一種物質配制。緩沖原理差異：硼酸鹽緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液和磷酸鹽緩沖溶液通過調節體系中緩沖對的電離或水解平衡移動來發揮緩沖作用。HEPES緩沖溶液通過平衡轉化關系來發揮緩沖作用。應用領域差異：磷酸鹽緩沖溶液在固體藥物釋放研究中應用較**。硼酸鹽緩沖溶液多用于液體藥物如滴眼液中。Tris-HCl緩沖溶液主要用于蛋白質、DNA等生物大分子的溶液體系中。HEPES緩沖溶液更多地應用于脂質體、細胞水平的相關生化實驗研究中。這些緩沖溶液各自具有特定的優勢和適用范圍，研究人員可以根據實驗需求選擇*適合的緩沖體系

二、藥用功能與應用緩沖作用：HEPES在pH值為6.8~8.2的范圍內具有良好的緩沖能力，能夠維持溶液pH的穩定。在藥用輔料中，HEPES常用于制備各種注射劑、口服液等制劑，以確保藥物在儲存和使用過程中pH值的穩定。細胞保護作用：HEPES對細胞無毒性作用，且能夠降低某些化學物質的細胞毒性。在細胞培養中，HEPES能夠維持細胞的正常形態和功能，提高細胞的生存率。促進藥物吸收：作為促透劑，HEPES能夠促進藥物分子通過皮膚或黏膜的吸收，提高藥物的生物利用度。其他應用：HEPES還用于制備各種生化試劑盒、診斷試劑等，為醫藥產品的質量和安全性提供保障。在某些特定的藥物制劑中，HEPES還起到穩定劑、增溶劑等作用。國產注射用HEPES緩沖液CDE已登記狀態為A。

特性與優勢***的緩沖范圍：HEPES的有效緩沖范圍在pH6.8~8.2之間，覆蓋了大多數生物實驗和細胞培養所需的pH環境。CO2無關性：與許多其他緩沖液不同，HEPES的緩沖能力不受CO2濃度的影響，這使得它在開放式培養或細胞觀察等實驗中具有獨特的優勢。低毒性：在適當濃度下，HEPES對細胞無毒性作用，能夠為細胞提供一個安全的生長環境。穩定性強：HEPES不易受溫度、光照和化學物質的影響，適合長期實驗和儲存。膜不透性：HEPES具有膜不透性，不會***改變細胞的滲透壓，避免了對細胞形態和功能的不良影響。注射用HEPES緩沖液中美雙報實驗室集采；江蘇試劑級HEPES藥用采購

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在RNA研究中的注意事項?HEPES可能抑制某些RNA酶活性，但高濃度會干擾逆轉錄反應。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。HEPES在RNA電泳中常用作緩沖液，其低離子強度減少了對RNA遷移的干擾。在體外轉錄反應中，HEPES緩沖液能維持反應體系的pH穩定。但需注意HEPES可能結合某些金屬離子，影響依賴金屬離子的RNA酶活性。HEPES溶液在光照下會生成過氧化物，需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌，并檢測過氧化物含量（如硫代硫酸鈉滴定法）。過氧化物會氧化敏感的生物分子，如硫醇基團和某些熒光染料。長期儲存的HEPES溶液應分裝并避免反復凍融。商業化的HEPES粉末也應避光保存，因其在光照下會逐漸降解。HEPES溶液的pH會隨時間緩慢變化，建議使用前重新校準。湖南藥用HEPES批量