對細胞的保護作用降低細胞毒性：某些化學物質在培養基中容易產生細胞毒性，影響細胞的生長和繁殖。HEPES能夠降低這些化學物質的細胞毒性，從而保護細胞免受損傷。形成保護層：HEPES分子還可以通過吸附在細胞表面，形成一層保護層，減少細胞間的摩擦和碰撞，降低細胞的損傷風險。這有助于提高細胞的生存率和實驗結果的可靠性。綜上所述，HEPES在細胞培養中發揮作用的主要原理是通過其兩性離子特性增加溶液離子濃度和滲透壓，以及通過其穩定的緩沖能力維持細胞生長所需的pH環境。此外，HEPES還能降低細胞毒性、形成保護層等，對細胞具有保護作用。這些特性使得HEPES成為細胞培養中不可或缺的緩沖劑之一。國產注射用HEPES緩沖液CDE已登記。四川有登記號HEPES價格

?4. 在電生理實驗中的關鍵作用?HEPES常用于膜片鉗實驗，其低離子強度特性可減少電流噪聲。建議與NaCl、KCl等電解質配合使用，終濃度不超過20 mM以避免膜電位干擾。?5. 蛋白質純化中的緩沖選擇?HEPES緩沖液（pH 7.5）適用于離子交換層析，因其不與His標簽蛋白競爭結合鎳柱。但需避免與EDTA聯用，以防金屬離子沉淀。光敏感性與儲存條件?HEPES溶液在光照下會生成過氧化物，需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌，并檢測過氧化物含量（如硫代硫酸鈉滴定法）。廣西7365-45-9HEPES批發艾偉拓注射用HEPES已登記！

HEPES緩沖體系的應用

2022年4月15日，施維雅公司（SERVIER）宣布，其胰腺****藥物易安達（通用名：鹽酸伊立替康脂質體注射液）獲得中國國家藥品監督管理局（NMPA）正式批準上市。

伊立替康**早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液，在實際使用的過程中，該劑型逐漸暴露出一個問題：伊立替康的內酯環結構易水解，在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低，毒性更強。生理條件（pH 7.4）下，由于血清蛋白優先與羧酸鹽絡合而使平衡偏向活性低的羧酸型，造成有效的內酯型比例過低，達到平衡時，“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達90%。

q中包裹的伊立替康以有效的內酯型為主，這也意味著伊立替康脂質體內水相pH偏酸性（pH6左右）。而眾多文獻及Onivyde專利文件實施例均表明外水相pH在近中性時更有利于脂質的穩定，Onivyde專利文件的實施例表明外水相pH在7.25左右時脂質長期穩定性比較好。這需要伊立替康脂質體外水相和內水相存在pH差異，同時外水相偏堿性的緩沖對不能在長期儲存中進入內水相升高內水相pH，否則內水相中的伊立替康將會轉化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。四、不易穿過脂質膜的羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）更適用于伊立替康脂質體

HEPES，全稱為4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸，又名N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸或N-2-Hydroxyethylpiperazine-N-2-EthaneSulfonicAcid，是一種在生物化學和分子生物學領域中廣泛應用的化學物質。以下是對HEPES的詳細介紹：配制方法單一HEPES溶液：可以配制單純的HEPES+NaOH溶液。例如，要配制500ml 1M HEPES，pH=7.0的溶液，可以將119.15g HEPES溶解在400ml蒸餾水中，加0.51M的NaOH水溶液調節至所需pH（HEPES的有效pH范圍是6.88.2），然后用蒸餾水定容至500ml，于4攝氏度保存。HEPES+鹽溶液：也可以配制含有其他成分的HEPES溶液。例如，將HEPES、NaCl、Na2HPO4·7H2O等按一定比例溶解在蒸餾水中，用NaOH調節pH值后定容。注射用HEPES CDE已登記登記狀態為A；

在流式細胞術中的優化?HEPES（10 mM）可維持細胞懸液pH穩定，減少熒光染料淬滅。但需與FBS或BSA聯用以防止非特異性結合。HEPES緩沖液能減少細胞聚集，提高流式分析的準確性。在長時間流式實驗中，HEPES可替代碳酸氫鹽緩沖液，避免因CO2逸出導致的pH漂移。HEPES的低離子強度特性減少了對細胞膜的損傷。HEPES緩沖能力在4-37℃范圍內變化<10%，優于Tris緩沖液。但高溫（>50℃）會導致降解，需避免高壓滅菌。HEPES在低溫下仍保持良好緩沖能力，適合冷庫或冰上操作。在熱穩定性實驗中，HEPES緩沖液能有效維持反應體系的pH穩定。但需注意HEPES在高溫下的降解產物可能干擾實驗結果。注射用HEPES緩沖液中美雙報高性價比；浙江高純度HEPES大批量采購

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使用注射級氨丁三醇緩沖劑的注意事項：1.Tris緩沖液的pH值受溫度影響大，△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃時緩沖液的pH＝8.4，則37℃時的pH＝7.4，所以一定要在使用溫度下進行配制，室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃～4℃。2.Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大，緩沖液稀釋十倍，pH值的變化大于0.13.Tris在一定程度上與各種分子反應，包括RNA酶抑制劑，醛，酶，DNA以及常見金屬如Cr3+，Fe3+，Ni2+，Co2+和Cu2+等，在有些系統中會起抑制作用，在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用；4.Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2，配制的緩沖液要注意蓋嚴密封；5.Tris緩沖液對某些pH電極發生一定的干擾作用，需使用與注射級氨丁三醇溶液具有兼容性的電極；6.Tris緩沖液不適用于二喹啉甲酸（BCA）測定；7.吸入，攝入，皮膚吸收注射級氨丁三醇可造成傷害，操作時需戴好手套和護目鏡；8.作為蛋白緩沖液時，若后續工作需要質譜，則不適宜用注射級氨丁三醇，比較好換成其他質譜儀可耐受的緩沖液。四川有登記號HEPES價格