與其他的緩沖體系相比,HEPES突出的優勢有以下幾點:
1. pKa 和 buffer 比較穩定,隨溫度的變化很小。
2. HEPES 的緩沖能力不會與受其他離子的影響,同時HEPES本身也不會對其他離子的功能造成影,HEPES擁有性質穩定性。
3. 細胞培養基中pH的穩定性主要依靠培養基中的碳酸氫鹽和5%的CO2共同維持。當細胞處于開放環境時,二氧化碳的彌散會導致pH上升脫離生理pH范圍??墒翘砑親EPES緩沖對的培養基則不存在這方面問題。
4. HEPES不干擾細胞內的生化反應因為它不易穿過生物膜,因此它更適用于伊立替康脂質體。 注射用HEPES緩沖液中美雙報企業采購;四川試劑級HEPES實驗室采購

HEPES(4-2-羥乙基醇-1-哌秦基-乙磺酸) 分子量為238.31,化學名:4-羥乙基哌口秦乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。HEPES是制備緩沖液的有機物質,為非離子兩性緩沖液,在pH 7.2 - 7.4范圍內具有很好的緩沖能力。 ***用于細胞培養,為了維持穩定的生理pH值,20下的pKa為7.55。 HEPES用于保護冷凍酶溶液免受冷凍誘導的pH變化的影響。 考慮到HEPES的光毒性(暴露于環境光會產生過氧化氫),該緩沖劑配置溶液后,保存在黑暗的環境中,以便在后續實驗中正常工作。江蘇高純HEPES現貨注射用HEPES CDE已登記登記狀態為A。

與溫度變化的穩定性?HEPES緩沖能力在4-37℃范圍內變化<10%,優于Tris緩沖液。但高溫(>50℃)會導致降解,需避免高壓滅菌。HEPES在低溫下仍保持良好緩沖能力,適合冷庫或冰上操作。在熱穩定性實驗中,HEPES緩沖液能有效維持反應體系的pH穩定。但需注意HEPES在高溫下的降解產物可能干擾實驗結果。在RNA研究中的注意事項?HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高濃度會干擾逆轉錄反應。建議在RNA提取階段使用Tris-EDTA緩沖液替代。HEPES在RNA電泳中常用作緩沖液,其低離子強度減少了對RNA遷移的干擾。在體外轉錄反應中,HEPES緩沖液能維持反應體系的pH穩定。但需注意HEPES可能結合某些金屬離子,影響依賴金屬離子的RNA酶活性。
HEPES在細胞培養中發揮作用的主要原理是基于其兩性離子特性和穩定的緩沖能力。以下是具體解釋:對細胞的保護作用降低細胞毒性:某些化學物質在培養基中容易產生細胞毒性,影響細胞的生長和繁殖。HEPES能夠降低這些化學物質的細胞毒性,從而保護細胞免受損傷。形成保護層:HEPES分子還可以通過吸附在細胞表面,形成一層保護層,減少細胞間的摩擦和碰撞,降低細胞的損傷風險。這有助于提高細胞的生存率和實驗結果的可靠性。
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HEPES緩沖體系在生物化學和細胞生物學研究中扮演著至關重要的角色。以下是對HEPES緩沖體系的詳細介紹:工作原理HEPES的工作原理是通過吸收或釋放氫離子來調節溶液的pH值。在生理pH范圍內,HEPES主要以未離解的分子形式存在,即“非離子”狀態。當溶液中的氫離子濃度增加時,HEPES會吸收氫離子并轉化為帶負電荷的離子形式;反之,當溶液中的氫離子濃度降低時,HEPES會釋放氫離子并轉化為帶正電荷的離子形式。這種轉化過程使得HEPES能夠在不同的pH條件下維持溶液的穩定。注射用HEPES 中美雙報;上海登記號HEPES價格
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?4. 在電生理實驗中的關鍵作用?HEPES常用于膜片鉗實驗,其低離子強度特性可減少電流噪聲。建議與NaCl、KCl等電解質配合使用,終濃度不超過20 mM以避免膜電位干擾。?5. 蛋白質純化中的緩沖選擇?HEPES緩沖液(pH 7.5)適用于離子交換層析,因其不與His標簽蛋白競爭結合鎳柱。但需避免與EDTA聯用,以防金屬離子沉淀。光敏感性與儲存條件?HEPES溶液在光照下會生成過氧化物,需避光保存于4℃。使用前建議通過0.22 μm濾膜除菌,并檢測過氧化物含量(如硫代硫酸鈉滴定法)。四川試劑級HEPES實驗室采購